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【三维设计】2013高中生物 第1部分 专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数应用创新演练 新人教版选修1随堂基础巩固1在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称做()a鉴别培养基b加富培养基c选择培养基 d基础培养基解析:鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊化学物质,微生物的代谢产物与特殊化学物质发生特定化学反应,产生明显特征变化;加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物;基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基,例如牛肉膏蛋白胨培养基;选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物质,抑制不需要微生物的生长,有利于所需微生物生长的培养基。答案:c2请选出下列正确的操作步骤()土壤取样称取10 g土壤,加入盛有90 ml无菌水的锥形瓶中吸取0.1 ml进行平板涂布依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度a bc d解析:在分离土壤中某细菌时,应先选取土样(10 g),然后加无菌水获得土壤浸出液,并进行不同倍数稀释,最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养,并分离和计数。答案:c3用以尿素为唯一氮源加入酚红指示剂的培养基,培养细菌后,指示剂将()a变蓝色 b变红色c变黑色 d变棕色解析:细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨,氨会使培养基的碱性增强,ph升高,加入酚红指示剂将变红。答案:b4某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中的活菌数目,培养基配方如下:kh2po4na2hpo4mgso47h2o蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g(1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_(能/不能),原因是_。(2)该培养基为_培养基(按物理状态分),因为培养基中含有_。(3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的_就能大约推测出样品中活菌数。(4)如果把该培养基中的蛋白胨去掉,培养的微生物是不是一定是能分解尿素的细菌?_。为什么?_。解析:选择能分解尿素的细菌必须在以尿素为唯一氮源的选择培养基上;以琼脂作为凝固剂,因此该培养基为固体培养基;稀释涂布法常用来统计样品中活菌的数目;如果把该培养基中的蛋白胨去掉,由于培养基中尿素作为唯一氮源,因此可以作为分解尿素的微生物的选择培养基;但是有些微生物可以利用尿素分解菌合成的其他代谢产物生长繁殖,因此该培养基上培养的微生物并不一定能分解尿素。答案:(1)不能培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(2)固体凝固剂琼脂(3)稀释涂布平板菌落数目(4)不一定因为有些微生物可以利用尿素分解菌代谢产生的含氮代谢产物生长繁殖课时跟踪训练(满分:50分时间:25分钟)一、选择题(每小题3分,共24分)1下列关于土壤取样的叙述错误的是()a土壤取样,应选取肥沃、湿润的土壤b先铲去表层土3 cm左右,再取样c取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌d应在火焰旁称取土壤解析:微生物的培养要注意无菌操作,土壤取样用的小铁铲和信封在使用前需灭菌,后续稀释等操作均需在火焰旁进行。答案:c2可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()a以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂b以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂c以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂d以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析:在以尿素为唯一氮源的培养基中,不能分解尿素获得氮源的细菌不能生长,而分解尿素的细菌能以尿素为氮源,将尿素分解为氨,使ph升高。若培养基中加入酚红指示剂,指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基,又属于鉴别培养基。答案:a3在培养微生物的培养基中加入某些物质能分离出所需的微生物。下列前项是在培养基中加入的物质,后项是能分离出的微生物,正确的是()a氢氧化钠;酵母菌b盐酸;放线菌c适量的青霉素;霉菌d适量的伊红和美蓝;大肠杆菌解析:氢氧化钠、盐酸为强碱、强酸,酵母菌和放线菌都不能生存,加入伊红和美蓝的培养基是鉴定大肠杆菌,但不能分离出大肠杆菌。适量的青霉素对原核生物有抑制作用,对真核生物的生命活动并不影响,霉菌为真核生物,因此可利用加入青霉素的培养基分离霉菌。答案:c4在土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验操作中,对使用的平板和试管要进行标记,以下说法正确的是()a对培养皿仅需注明培养基的种类即可b一般在使用之后进行标记c由于试管用得较多,只需对试管进行标记即可d标记的目的主要是为了防止实验中平板、试管等的混淆解析:本实验使用的平板和试管较多,为避免混淆,应在使用前就做好标记。标记时要注明培养基种类、培养日期以及平板上培养样品的稀释度等。答案:d5在做分离分解尿素的细菌实验时,甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有()土样不同 培养基污染操作失误 没有设置对照a bc d解析:甲同学比其他同学的实验数据大许多,可能由于选取的土样不同, 培养基灭菌不彻底或操作过程中杂菌污染,也可能操作失误,如配制的培养基中混入其他含氮物质、稀释度不够准确等。答案:a6(2009安徽高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板b取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml,分别涂布于各组平板上c将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 hd确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析:检测土壤中细菌总数,用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml,分别涂布于各组平板上,将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 h,在确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的一组平板为代表进行计数。答案:d7某同学对101、102、103倍稀释液计数的平均菌落数分别是2760、295和16,则菌落总数为(所用稀释液体积为0.1 ml)()a2.76104个/ml b2.95105个/mlc4.6104个/ml d3.775104个/ml解析:为保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数,因此只有295符合要求。其稀度倍数为102,所用稀释液体积为0.1 ml,代入计算公式得菌落总数为2.95105个/ml。答案:b8某种细菌必须从环境中摄取亮氨酸才能正常生活,此菌株对链霉素敏感(即缺乏抗性)。实验者用诱变剂处理此种菌株,欲从经处理的菌株中筛选出不依赖亮氨酸且对链霉素不敏感(即有抗性)的变异类型,则应选用的培养基是下表中的()选项abcd亮氨酸链霉素注:表格中“”表示加入,“”表示未加入;4种培养基除添加亮氨酸和链霉素有差异外,其他成分及条件均相同且适合细菌生长。解析:解答本题首先必须弄清选择的目标是要选出不依赖亮氨酸且对链霉素有抗性的菌株,因此培养基要针对目的菌株的上述两个特点配制:无亮氨酸(不依赖,能存活),有链霉素(有抗性,对链霉素不敏感,其存在不影响其生存)。答案:c二、非选择题(共26分)9(10分)(2011山东高考改编)研究发现乳酸菌素(小分子蛋白质)有抑菌作用,其提取及应用如图所示。抑菌实验(1)筛选乳酸菌a时可选用平板划线法或_接种。对新配置的培养基灭菌时所用的设备是_。实验前需对超净工作台进行_处理。(2)培养基中的尿素可为乳酸菌a生长提供_。(3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过观察透明圈的_来测定乳酸菌素的抑菌效果。解析:(1)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法;新配制的培养基需要用高压蒸汽灭菌锅灭菌;实验前需对超净工作台进行消毒处理。(2)尿素可为乳酸菌a提供氮源;(3)透明圈越大,表明抑菌效果越好。答案:(1)稀释涂布平板法(或:稀释混合平板法)高压蒸汽灭菌锅消毒(2)氮源(3)直径(或:大小)10(16分)不同微生物有各自的代谢特点,人们常据此分离鉴别微生物的种类。实验室有两个菌种:胱氨酸依赖型细菌(无胱氨酸不能生长),甲基营养细菌(只能利用甲醇、甲烷作碳源),但试管上标签脱落。某同学的鉴别思路是配制3个培养基,只接种其中的任一菌种,根据生长状况将其鉴别出来,另一种自然鉴别出来。请根据这一思路完成实验方案。(1)实验步骤:第一步:在两个菌种的试管上分别标记a、b;第二步:配制不含胱氨酸和甲基营养物的培养基,分别倒入3个培养皿中,标上1、2、3,_。第三步:_。(2)结果分析:_。(3)和其他微生物的培养一样,第二步和第三步中都应注意_操作,否则将导致实验失败。解析:题干给出了两个菌种的代谢特点,要对其进行分离,需人为创造两菌种各自所需要的生长发育条件,即设计选择培养基,本实验属于探究性实验,结果分析需分情况讨论。答案:(1)在1号培养皿中加入适量胱氨酸;在2号培养皿中加入适量甲基营养物(甲醇、甲烷);3号作为对照,一起灭菌将a菌(或b菌)接种于1、2、3号培养皿中,适宜条件下培养数天,观察细菌生长状况(2)若接种的a菌在1号培养皿中能生长,在2、

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