血细胞分析仪.ppt

血细胞分析仪及其临床应用 第一节概述第二节仪器的基本原理 第三节血细胞分析仪参数的临床意义 第四节方法学评价 第五节试剂系统第六节操作程序 http www a00 tv http www a00 tv 血细胞分析仪的发展史及特点 一 概述 http www a00 tv 1 稀释技术的进步 早期的仪器一般要求在测定前先进行人工稀释 现代的血细胞分析仪则更加先进 已经将自动稀释技术 自动进样方式全部添加到仪器本体内 2 定量部的改进 在血细胞计数仪开始阶段 人们设计了U型水银管压力计 通过水银的重量和在两个电极间的距离来控制吸入的标本量 最新的光电计时容量控制技术控制标本进入计数区的量 可以使得进入计数区域的细胞悬液定量更加准确和无污染 同时还可判断小孔是否出现堵塞或半堵塞问题 以及便于维护 3 自动取样技术 最初的仪器是需要进行手工取样和稀释的 后来逐渐有了外置式专用取样稀释器 再后来仪器内部设置了内置式负压取样稀释器目前认为采用旋转阀取样技术是比较精确的方法 旋转伐内部有多个按一定体积设计的小孔 当血液进而后 旋转伐从吸入的小孔转向排出的小孔 此时血液不能再进入 而孔内保留的固定量的血液进入仪器的稀释部 然后清洗 再进入下一次循环 目前许多更加先进的血液分析仪均采用陶瓷制的旋转阀来分配血液标本 4 进样方式最初的单一预稀释方式 演化为预稀释和全血方式两者兼有 现在许多先进的五分类血液分析仪还采用了更多种进样方式 如末梢血方式 开盖手工进样 闭盖手工进样 急诊检验进样 全自动进样等方式以及连接到全自动流水线的自动进样技术等 大多的血液分析仪采用了平推式的自动进样系统 5 仪器的清洗技术 最初的仪器的清洗靠人工浸泡或使用毛涮清洗 如果测定完一个很高值的标本 则需要用空白液清洗一下 以防止对下一个标本的携带污染 而现在许多仪器在完成一个标本的检测后可自动对计数小孔 管道进行冲洗 还可同时对取样器 稀释器 取样针内外进行全面清洗 减少交叉污染的机会 6 质控程序的进展 早期的血液分析仪一般没有质控程近年来的许多仪器都增加了多种质控程序7 用户界面的改进 最早的仪器几乎没有什么复杂功能 需要用机械按键的方式选择白细胞计数还是红细胞计数 没有打印和储存 在更有一些仪器采用了触摸屏控制方式 使得仪器操作界面更加人性化和更加方便 8 其他技术的应用 多数现行的血细胞分析仪都有标准计算机接口 可与医院信息管理系统进行连接 使用软盘或大硬盘对数据和细胞分析图形进行储存和检索 使用条码技术对标本进行分类和处理 使用全自动进样装置实现全自动化 通过磁卡或条码技术对试剂进行管理 对血细胞分析项目进行有规律的组合和选择等 这些技术的应用给当代血细胞分析仪提供了更加方便的使用方式和良好的管理方式 现代的许多仪器还增加了包括对试剂的管理 试剂消耗 试剂有效期和温度的管理 二 仪器的基本原理 1 电阻抗法仪器分析原理 1 信号发生器 通过小孔的细胞产生电阻信号2 放大器 将微伏信号转化为伏级信号 从而触发电路3 阈值调节 计数不同细胞时 应调节阈值电平 使计数结果尽量符合实际水平4 甄别器 将低于参考电平的各种非计数目标的假信号去掉 提高技术的准确性5 整形器 将不一致的波形调整为一致平顶波形6 计数系统 仪器对大小不同的脉冲进行选择 区分不同类型的细胞并进行计数 2 仪器的组成 3 电阻型血细胞分析仪分析流程图 血液标本 1 25000 稀释 RBC PLT通道 产生大 小脉冲 3 30fl PLT MPV PDW PCT 30f RBC RDW MCV HCT MCH 稀释 1 250 WBC HGB通道 溶血剂 释出Hb HiCN 转化剂 流动比色池 Hb MCHC 邹缩白细胞 脉冲大小 二或三分类细胞 脉冲数 WBC 30 90fl 90 160fl 160 450fl 小细胞 中间细胞 大细胞 4 检测参数 详见课本 5 血细胞直方图 定义血细胞分析仪在计数细胞数量的同时 还提供细胞体积分布图形 横坐标为血细胞体积大小 纵坐标为不同体积细胞的相对频率 这些用于表示细胞群体分布情况的曲线图形 称作细胞直方图 血细胞直方图 仪器检测屏上显示白细胞通过脉冲 细胞体积直方图 白细胞直方图 红细胞直方图 血小板直方图 6 影响直方图的因素 不同类型仪器直方图有差异 即使是同一标本 其细胞直方图也有差异凡是影响细胞脉冲大小的因素都可以使直方图发生变化试剂性能的好坏会影响直方图操作人员的技能因素循证医学对血液分析仪的指导作用 7 血细胞分析仪的操作步骤 1 血液的采集与抗凝2 仪器准备 清洗仪器 按仪器操作完成 空白计数 直接计数稀释液中的颗粒数量 应达到说明书的要求3 质控物分析 用全血或单项质控物在仪器上分析4 血液标本分析 按仪器操作规程进行5 结果判断 8 结果报告注意事项 1 各项分析参数和体积分布直方图均正常时 若为全自动电阻型血细胞分析仪且白细胞为三分类 不必做显微镜白细胞分类 对已确诊或疑为血液病的患者 必须进行血涂片白细胞分类 若为半自动血细胞分析仪且白细胞为两分类 应做血涂片白细胞分类 并按镜下结果报告 2 仅有白细胞数量或体积分布直方图异常时 应作血涂片白细胞分类 并按镜下分类报告3 仅有红细胞或血小板分析参数及其体积分布直方图异常时 应做血涂片镜下观察红细胞和血小板的形态及大致数量变化 当观察结果和血细胞分析仪一致时应反复测定并报告显微镜结果 结果报告注意事项 二 血细胞分析仪检测参数的临床意义 一 细胞直方图的应用 1 白细胞直方图 M2 幼稚细胞占72 L2 幼稚细胞63 LC增多 大颗粒淋巴42 白细胞直方图 2 红细胞体积直方图的临床意义 IDA 地贫 珠蛋白生成障碍性贫血 MA治疗前 治疗后 铁粒幼细胞性贫血 3 血小板新参数及直方图的临床意义 1 激光型血细胞分析仪 2 联合检测型血细胞分析仪 电阻法 高频负电磁波技术和激光技术