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考点规范练36传统发酵技术的应用微生物的培养与应用1.从古至今,酒就与人类生活息息相关。请回答下列与酿酒有关的问题。(1)人类利用的酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌,酵母菌酒精发酵的反应式是;进行酒精发酵一般将温度控制在。(2)葡萄酒呈现深红色的原因是。(3)工厂化生产果酒时,为提高果酒的品质,更好地抑制其他微生物的生长,采取的措施是,并接入合适的菌种。(4)某同学人工自酿葡萄酒时,在发酵后期向发酵液中通入空气,并将发酵液置于3035 环境中,结果发现发酵液中有出现,这类微生物在糖类缺乏时可以使转化为,后者再转化为。答案:(1)c6h12o62c2h5oh+2co2+能量1825 (2)红葡萄皮的色素进入发酵液(3)对原料和设备进行消毒和灭菌(4)醋酸菌乙醇乙醛醋酸解析:(1)人类利用的酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌,酵母菌的无氧呼吸产生酒精,反应式为:c6h12o62c2h5oh+2co2+能量;20 左右最适合酵母菌繁殖,酒精发酵的最佳温度为1825 ,ph最好是弱酸性。 (2)葡萄酒的色素主要来自于葡萄皮。(3)工厂化生产果酒时,为提高果酒的品质,更好地抑制其他微生物的生长,采取的措施是对原料和设备进行消毒和灭菌,并接入合适的菌种。(4)1825 有利于酵母菌的生长和酒精发酵,3035 有利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵,因此会在发酵液中发现醋酸菌,该菌在有氧且糖源不足时,可以将乙醇转化为乙醛,然后再将乙醛转化为醋酸。2.请根据下图回答有关制作果酒和果醋的问题。(1)在向甲装置中加入菌种前要对装置进行;在甲装置中加入适量的酵母菌后,开始的一段时间里要打开阀,目的是使酵母菌在有氧条件下繁殖,然后关闭阀,偶尔打开阀几分钟,目的是使酵母菌在无氧条件下产生酒精并排出产生的co2;若要进行醋酸发酵,则需要对甲装置进行的操作是。酒精发酵时一般将温度控制在,醋酸菌适宜生长的温度为。(2)图乙中的过程和分别发生在酵母菌的和中。(3)过程产生乙醇,过程产生醋酸的反应式分别是:、。(4)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是。a.应先除去葡萄枝梗,然后反复冲洗,直至彻底干净b.应控制发酵温度维持在20 左右,变化不能太大c.发酵过程中应该不断从充气口进行通气,以维持发酵的需氧环境d.酵母菌存在广泛、生命力强,因此果酒制作时不需对所用器具进行灭菌答案:(1)清洗aab打开阀a1825 3035 (2)细胞质基质线粒体(3)c6h12o62co2+2c2h5oh+能量c2h5oh+o2ch3cooh+h2o+能量(4)b解析:进行果酒发酵时,酵母菌要先进行有氧呼吸,故应打开阀a,让酵母菌繁殖;然后关闭阀a,让酵母菌进行无氧发酵,但要偶尔打开阀b,以释放无氧呼吸产生的二氧化碳。如果进行醋酸发酵应在有氧条件下,故应打开阀a。图乙中的过程为细胞呼吸第一阶段(在细胞质基质进行),为无氧呼吸第二阶段(在细胞质基质进行),为有氧呼吸第二、三阶段(在线粒体中进行),为醋酸发酵。在清洗葡萄时,为防止杂菌的污染应先清洗再除去枝梗;酒精发酵过程中应先通入氧气,然后密闭进行无氧呼吸;酒精发酵过程中,要对所用器具进行灭菌。3.腐乳、腌白菜等因其味道鲜美时常出现在人们的餐桌上,这些食品都是经过腌制加工而成的,请回答下列问题。制腐乳坯a加盐腌制b密封腌制(1)腐乳制作过程中,多种微生物参与发酵作用,其中起主要作用的微生物是一种状真菌。图中a表示,制作腐乳坯时用沸水处理豆腐的目的是,豆腐含水量不能过高的原因是。(2)腐乳制作过程中加盐的作用是和。(3)制作腐乳的卤汤中通常要加入料酒、黄酒等,含量一般控制在12%左右,其目的是。(4)泡菜发酵过程中,会产生多种酸,其中主要是乳酸,还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与n-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成色化合物。(5)据图可知腌白菜在腌制天后食用最佳。答案:(1)丝让豆腐长出毛霉消毒豆腐含水高不利于毛霉的生长,制作的腐乳也不易成形(2)析出豆腐中的水分,使豆腐变硬抑制微生物的生长,避免豆腐变质(3)抑制微生物的生长,使腐乳具有独特的香味(4)比色玫瑰红(5)12解析:(1)豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪,都是大分子有机化合物,难以消化、吸收。毛霉是一种丝状真菌,分泌的蛋白酶能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,分泌的脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。腐乳的制作流程是制腐乳坯让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制。为防止杂菌污染,需要用沸水对豆腐消毒。(2)腐乳制作过程中加盐的作用是析出豆腐中的水分,使豆腐变硬,还可以抑制微生物的生长,避免豆腐变质。(3)卤汤直接关系到腐乳的色、香、味,卤汤中加酒可以抑制微生物的生长,同时能使腐乳具有独特的香味。(4)对亚硝酸盐的定量测定可以用比色法,因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与n-1-萘基乙二胺盐酸盐偶联成玫瑰红色化合物。(5)由图可知,12天之后亚硝酸盐含量最低,此后食用最佳。4.下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图回答下面的问题。(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜,原因是。(2)为了保证既无杂菌,又能使发酵菌发挥正常作用,应如何处理所用盐水?。(3)在泡菜腌制过程中经常向坛口边缘的水槽中补充水分的目的是。(4)测定亚硝酸盐含量的方法是,在泡菜腌制过程中定期测定亚硝酸盐含量的目的是。(5)同样的材料和腌制条件,不同坛中各时期测得的亚硝酸盐含量不同,最可能的原因是。(6)在果醋的制作过程中酒精浓度较高时,通常不适宜进行醋酸发酵的原因是。(7)在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中,需要氧气的是。其中在腐乳制作时,要加盐腌制,其目的是。要制作出色、香、味俱佳的腐乳,关键在于的配制。答案:(1)亚硝酸盐的含量低(2)先将盐水煮沸杀灭杂菌,然后冷却至室温时再使用(3)提供发酵过程中所需的无氧环境(4)比色法把握取食的最佳时间(5)各坛中微生物的种类和数量不同(6)较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢,使产酸量下降(7)制作腐乳、果醋析出豆腐中的水分,使豆腐块变硬,同时抑制微生物的生长,避免豆腐块腐败变质卤汤解析:(1)若放置时间过长,蔬菜中的硝酸盐易被还原成亚硝酸盐,因此制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜。(2)先将盐水煮沸,可杀灭其中的杂菌;然后冷却至室温时再使用,以免杀死发酵用的乳酸菌。(3)乳酸菌为厌氧菌,因此制作泡菜时须严格控制无氧环境,通常的做法是用水封法密封泡菜坛。(4)通过比色法可测定亚硝酸盐的含量,从而确定泡菜的最佳取食时间。(5)硝酸盐在微生物的作用下可转化为亚硝酸盐,不同泡菜坛中微生物的种类和数量不同,因此不同坛中各时期测得的亚硝酸盐含量不同。(6)较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢,影响产酸量,因此酒精浓度较高时通常不适宜进行醋酸发酵。(7)制作腐乳的毛霉和制作果醋的醋酸菌为需氧微生物,制作泡菜的乳酸菌为厌氧微生物。5.尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。请分析回答有关从土壤中分离分解尿素的细菌的有关问题。(1)如图是利用法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。 (2)如果要对培养的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及以后每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行。 (3)下表是一种培养基配方:成分kh2po4na2hpo4mgso47h2o葡萄糖尿素琼脂含量/g1.42.10.210.01.015.0(多选题)该培养基属于培养基。a.液体b.固体c.鉴别d.选择e.天然使用该培养基的目的是。在培养基中加入指示剂,可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。 (4)(多选题)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,a同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只筛选出大约50个菌落。a同学的实验结果产生的原因可能有。a.土样不同b.培养基污染c.操作失误d.没有设置对照答案:(1)平板划线稀释(2)灭菌(3)bd筛选出能分解尿素的细菌酚红(4)abc解析:(1)题图中的接种方法是平板划线法,该方法的特点是随着划线次数的增多,线上的细菌数逐渐减少,最后成为单个分布的细菌。(2)操作的第一步和以后每次划线之前要对接种环进行灼烧灭菌,杀死接种环上的杂菌。(3)从成分上看,该培养基中含有琼脂,为固体培养基;尿素是唯一的氮源,所以属于选择培养基,目的是筛选出能分解尿素的细菌。(4)该同学的培养基中菌落的数目明显多于其他同学,可能的原因是培养基被污染、采用的土样中细菌较多或者操作有误(如接种时没有将菌液摇匀等)等。6.(2015西北师大附中四诊)人和哺乳动物的尿中含有尿素,大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答下列问题。(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有、和。(2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在旁进行操作。接种后的培养皿于37 的中培养。(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,从功能上划分该培养基属于培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素分解产生的使ph升高,酚红指示剂产生的颜色变化证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力。(4)与全营养培养基中的菌落相比,以尿素为氮源的培养基中菌落数()a.多b.少c.相等d.几乎为零答案:(1)高压蒸汽灭菌灼烧灭菌干热灭菌(2)酒精灯火焰倒置恒温培养箱(3)鉴别氨越强(4)b解析:(1)常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和干热灭菌。(2)将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养,为避免杂菌污染,操作要在酒精灯火焰旁进行,为防止水蒸气在皿盖上凝结产生水滴,培养皿需要倒置在恒温培养箱中培养。(3)酚红指示剂可用于鉴别微生物,所以含有酚红指示剂的培养基属于鉴别培养基;尿素分解产生的氨可使培养基的ph呈碱性;变色区域越大,说明生成的氨越多,即菌株的分解能力越强。(4)以尿素为氮源的培养基中菌落数少,因为其他微生物不能以尿素为氮源,即不能在该环境中生存。7.高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。其筛选过程如下图所示。(1)进行过程的目的是;过程所使用的接种方法是。(2)号和号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节ph的先后顺序是;对培养基常用法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能。如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是。(3)部分嗜热菌在号培养基上生长时可释放分解培养基中的淀粉,在不同菌落周围形成大小不同的透明圈,应挑出的菌落,接种到号培养基。(4)根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出的细菌数目往往比实际的数目低,原因是。答案:(1)稀释(嗜热菌培养液)稀释涂布平板法(2)先调节ph,后灭菌高压蒸汽灭菌损伤dna的结构将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生(3)淀粉酶透明圈大(4)当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落解析:(1)分析题图可知,过程是梯度稀释,目的是对样品进行稀释;过程是用稀释涂布平板法进行接种。(2)培养基配制和灭菌时应先调节ph,然后再进行灭菌,如果先灭菌再调节ph,在调节ph时又会污染培养基。紫外线对dna分子有损伤作用,所以时常用来作为灭菌的方法,检测灭菌效果的方法就是将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生,如果有,则灭菌效果不好,需要重新灭菌。(3)能分解淀粉的嗜热菌在号培养基上生长时可释放淀粉酶,分解培养基中的淀粉,在菌落周围形成透明圈,透明圈越大说明淀粉酶的活性越强,所以要从中挑出透明圈大的菌落,接种到号培养基上。(4)该题中运用稀释涂布平板法统计活菌数目,其原理是当样品稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落就来源于样品稀释液中的一个活菌。但当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故计算得出的细菌数目往往比实际的数目低。8.(2015黑龙江哈尔滨模拟)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题。(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是;然后,将1 ml水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 ml稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。(3)示意图a和b中,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。

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