大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的临床分离和耐药性分析.doc

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱-内酰胺酶的临床分离和耐药性分析【关键词】 大肠埃希菌; 肺炎克雷伯菌; 超广谱-内酰胺酶; 耐药性分析超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是由细菌质粒或染色体介导产生的，是引起大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生多重耐药性的主要原因之一1。为及时观察临床产ESBLs酶的细菌变化趋势及耐药情况，对有效治疗和预防该菌引起的院内感染非常重要。作者对我院2006年1月至2009年1月间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs的检测和耐药性分析，为临床抗菌药物的合理使用提供依据，控制ESBLs的传播和流行。1 资料和方法1.1 菌种来源:全部菌种均来自2006年1月至2009年1月住院患者的各类送检标本。1.2 质控菌株:卫生部临床检验中心提供的标准大肠埃希菌(ATCC 25922)和肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)。1.3 试剂:抗菌药敏纸片及M-H培养基 头孢他啶(30ug/片)、头孢他啶-克拉维酸(30/10ug/片)、头孢噻肟(30ug/片)、头孢噻肟-克拉维酸(30/10ug/片)，均购自北京天坛药物生物技术开发公司。培养基 M-H水解酪蛋白琼脂购自上海伊华医学科技有限公司。1.4 仪器:法国梅里埃ATB Expression。1.5 方 法1.5.1 细菌鉴定及药敏试验:细菌鉴定采用法国梅里埃公司的ATB鉴定系统。ATB鉴定及其配套药敏系统检测最低抑菌浓度(MIC)。ESBLs确诊采用纸片扩散法做确证试验：将待检菌稀释成0.5麦氏单位浓度的菌液，均匀涂布于M-H水解酪蛋白琼脂。待琼脂稍干后，贴药敏纸片，每一个纸片中心至少相距≥4mm。药敏结果按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS.2004)标准判断1.5.2 确证试验：将待检菌液均匀涂布到M-H平板上，分别将头孢他啶和头孢他啶-克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟-克拉维酸4张纸片均匀贴在M-H平板上，35孵育1824h，测量抑菌环直径，2对纸片其中1对的直径相差≥5mm，判为产ESBLs阳性菌株。1.5.3 质控菌株为肺炎克雷伯菌(ATCC 700603)和大肠埃希菌(ATCC 25922)。2 结 果2.1 产ESBLs检出阳性率:实验总菌株为352株，确证实验ESBLs阳性率为76株，阳性率为21.6%。其中大肠埃希菌249株，确证阳性为55株(22.1%)。肺炎克雷伯菌为103株，确证阳性率为21株(20.4%)。2.2 抗菌药物耐药性:产酶菌株对青霉素类100%耐药，对第一、二代头孢菌素耐药率90%，对环丙沙星耐药率70%，对亚胺培南均十分敏感，对阿米卡星和含酶抑制剂的抗生素如头孢哌酮—舒巴坦、哌拉西林—他唑巴坦等耐药率较低。3 药敏实验结果ESBLs阳性和阴性菌株对12种抗生素的耐药率，见表1。表1 ESBLs阳性和阴性菌株对12种抗生素的耐药率4 讨 论肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌是临床上最常见致病菌，可引起呼吸道、泌尿系、伤口等感染。产ESBLs的菌株是丝氨酸蛋白酶的衍生物，是存在于细菌染色体的蛋白质。它水解β内酰胺环，可通过质粒形式在细菌之间传播。ESBLs目前是革兰阴性菌耐药的主要原因之一1，导致其对除碳青酶烯类之外的所有β-内酰胺类抗菌药物耐药。由表1可知，近年来我院从临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶阳性率有上升趋势，分别是22.1%和20.4%。临床应该引起高度重视。根据(NCCLS.2000)要求，确证是阳性菌株，不论体外药敏试验是否敏感，均应按耐药处理，不得使用一、二代头孢菌素。产酶菌株和非产酶菌株对亚胺培南十分敏感，对阿米卡星和含酶抑制剂的抗生素如头孢哌酮—舒巴坦、哌拉西林—他唑巴坦等耐药率较低。其它抗生素对产酶株均较非产酶株耐药率显著增高。本组资料显示，产酶菌株和非产酶菌株对亚胺培南十分敏感，故建议对产ESBLs的菌株的重症患者最好采用亚胺培南治疗，以免延误病情，造成多药耐药和交叉感染。由于ESBLs的菌株往往带有如氨基糖甙类和氟喹诺酮类的耐药基因形成多重耐药菌2，故表现为其交叉耐药。由于产酶菌株具有较高的耐药性，提示临床对此类细菌引起的感染治疗仅靠经验用药是很难达到治疗效果的，必须以实验室的药敏结果合理选用抗生素。为了控制医院中ESBLs阳性菌株引起的医院感染，应限制和谨慎使用广谱β-内酰胺类抗生素，以减轻抗生素的选择性压力。同时加强医院内消毒隔离措施以减少交叉感染。【参考文献】 1 罗燕萍,张秀菊,徐雅萍,等.产超广谱-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的分布及其耐药性研究J.中华医院感染学杂志,2006,16:101-1