奥尼罗非鱼双亲的选育.doc

奥尼罗非鱼双亲的选育 张海明1 、2 陈远生1 陈国华1 朱子和11.厦门鹭业水产有限公司 3610212.集美大学 361021摘 要 奥尼罗非鱼是以奥利亚罗非鱼为父本，尼罗罗非鱼为母本的杂交子一代，在台湾省称吴郭鱼 2、5，对我国跃升为全球最大的罗非鱼养殖与出口国曾立下汗马功劳。为不断提高奥尼罗非鱼的生长速度、雄性率、抗寒力和鱼品加工出品率, 笔者10余年来对奥尼罗非鱼双亲进行不懈选育,取得了理想结果,2006年，鹭业牌奥尼鱼苗种被认定为国家重点新产品。为交流经验，现将我们的选育情况报告于下。关键词 奥利亚罗非鱼 ，尼罗罗非鱼，选育一、 材料与方法1.试验鱼尼罗罗非鱼（简称NA）和奥利亚罗非鱼（简称AA），1993年从台湾省引进。自1997年起，每年参与选育的同批苗，NA保持在3540万尾，AA保持在2030万尾。2试验设施本项目选育工作在厦门鹭业国家级水产良种场进行，使用各类鱼池43口（30000m2、45亩)、水泥池75口和网箱500口；增氧、提灌等各类机械设施50余台套。水泥池长1.5m,宽1m,深1.2m。网箱相应为5 m, 1 m ,1.2 m,60目筛绢布制。其长度隔成3 m 和2 m二个区。3. 选育技术路线本项目罗非鱼选育采用群体选育与个体（家系）选育相结合的方法2-6。尼罗及奥利亚罗非鱼选育的技术路线相同,如图l所示。群体选育目标在于选育构建生长快、体型好（头小、体高、体厚）、体质强的亲本系。个体选育是以群体选育为基础，进一步选择怀卵量大、子代雌雄比好（11）的父母本并形成繁育系。通过这二种选育方法的结合，赋予它们自交及（奥、尼）杂交子代生长迅速、个体大、产肉多、抗病和抗寒力强的特性，并赋予奥尼罗非鱼自然雄性率高的优良品质。 群 体 选 育 下一代亲鱼选育亲鱼培育 亲本引进苗种培育 配种自繁 第一次选留 下一代亲鱼选育传 代亲 鱼 初选传 代亲鱼后 备亲 鱼鱼 种阶 段 第四次选留 第三次选留 第二次选留 个 体 选 育 优良双亲筛选双亲 选 亲 繁 殖F1培育、生殖 选 育 传 代配 对性状检测 亲 鱼 图1 罗非鱼选育技术路线 4.选育依据群体选育侧重于外部(头小、背高、体厚等)形态、生长、体质等特征1、7；个体选育側重于亲鱼怀卵量、子代性比等生殖指标，其选育依据为SC1027-1998，GB/18654-2002；种质综合指标委托农业部水产种质监督检验测试中心（广州）检验。5. 筛选方法(参见选育技术路线) (1)群体选育 每一代亲本的群体选育都经四次筛选:第一次筛选: 其过程是用3龄传代亲鱼在繁殖池群配,通过精心强化培育20d左右即可以见苗。取其第二、三批产出的苗进行培育，其中NA 品系同批苗达到3540万尾、AA品系达到2030万尾，以充分扩大参选基数。鱼苗经2025d培育进入夏花鱼种阶段，进行第一次选留，用9.510朝鱼筛选提留生长最快(全长5.5cm)的鱼种，再经手选剔除特异个体后分池继续培育。第二次筛选：鱼种培育至7月上、中旬到大规格(全长10cm)阶段时, 进行第二次选留， 以3.54吋鱼筛再次提留生长最快(全长10.5cm)的鱼种, 又经手选剔除特异个体后分池继续培育。第三次筛选：至当年11月初, 接近初次性成熟时进行第三次筛选(越冬筛选)。此次筛选除考察外部形态特征,可数、可量性状及生长等情况外，还需按性比确定雌雄鱼的大致数量，抽样检测性腺发育等内部构造情况。被选留的（后备）亲鱼进入越冬养殖管理。第四次筛选：越冬后备亲鱼在翌年经整整一年培育或利用（繁育生产用亲鱼等），再经越冬至第三年春（2龄）经配种筛选后成为传代亲鱼。此次筛选以性比为主，使雌雄鱼数量配比合适，剔除少数欠佳个体。（2）个体选育 ：在保种场500个网箱和75口水泥池中进行。选育过程如下： 配亲繁殖： 4月下旬水温超过22后，从群体选育出的传代亲鱼中选出300对以上亲鱼,按对分置于（编号）网箱的3m区中培育待产。经25d左右可陆续见苗。将已产双亲提出置于同箱的2m区中继续培育、待产。当鱼苗长至12cm时对苗量计数。苗种培育、生殖性状检测 性别检测： 苗种经45d左右培育、雌雄鱼生殖孔已明显分化，进行雌雄性别鉴定，计算性比和记录相关资料。此项工作对于同对亲鱼都作一次重复。筛选双亲：根据双亲2批F1代的数量、性比等检测数据,分析比较选出优秀双亲。构建繁育系: 将入选亲鱼作为传代亲鱼进入亲本库,同时对它们的F1代按群体选育的方法育成传代亲鱼,以扩大亲鱼群体形成繁育体系。二、结果与讨论（一） 群体选育1基本情况 尼罗与奥利亚罗非鱼亲鱼群体选育工作的基本情况见表1、2。群体选育工作从1993年亲本引进时就已进行,至今从未中断，选育目标是头小、背高、体厚、生长快和抗逆性强。其中1999年2005年(F4F6)的选育工作取得长足进展。在2002年选育F5时，这一选育目标已基本实现,到2005年育成F6代时目标已全面实现。截止2006年11月,保种场选育、存养传代亲鱼8772尾（10622.3 kg），其中尼罗6220尾(4457 ,1763，8326.2kg)，奥利亚2552尾(1952,600，2296.1kg)。表1 尼罗罗非鱼亲本群体选育情况年 份选育世代参选苗数（万尾）第一次选留第二次选留第三次选留第四次选留总选留率()数量(万尾)规格(cm)数量(尾)规格(cm)数量(尾)规格(g)数量(尾)规格(g)变异系数(%) 1999-01第五代(F4)37.0(990411)20.0(990602)6.016000(990815)17.81880（991110)4455041680(010415)75810901.962.104.54 2001-03第六代(F5)54.9(010519)29.0(010617)6.05000(010710) 10.51610 (011113)4585171540(030415)76511031.831.782.81 2003-05第七代(F6)36.0(030517)20.0(030611)6.05000(030705) 10.81700(031106)4505151650(050416)77811261.872.104.58 :1, 各世代亲鱼第三、四次选留数量中,雌雄性比控制在3.54:1; 2. 数量下括弧中数字为选留年月日;3.亲鱼重量规格系平均值。表2 奥利亚罗非鱼亲本群体选育情况年 份选育世代参选苗数（万尾）第一次选留第二次选留第三次选留第四次选留总选留率数量(万尾)规格(cm)数量(尾)规格(g)数量(尾)规格(g)数量(尾)规格(g)变异系数%1999-01第五代(F4)32.0(990411)7.3( (990601)5.52000 (990803)214.01720 (991110)4024501030(010415)6018952.101.953.22 2001-03第六代(F5)19.4 (010520)9.6 (010617)5.55000 (010710)38.01600 (011112)4164601140(030415)6109101.981.885.882 2003-05第七代(F6)20.0(030516)6.0 (030610)5.54000(030706)40.01508( 0311064104651068(050413)6229061.831.805.34:1, 各世代亲鱼第三、四次选留数量中,雌雄性比控制在3.54:1; 2. 数量下括弧中数字为选留年月日;3.亲鱼重量规格系平均值。2005年10月，本项目组对F6尼罗和奥利亚罗非鱼传代亲鱼随机抽样30尾,检测了它们的外形特征等主要种质指标，结果于后。2.外形特征 尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼外形特征，比照我国水产行业标准SC1027-1998、SC1042-2000和国标GB/T18645.3-2002（下简称为标准）， 除体高、体厚、头部特征（隆起）优于国标外，其余全部符合标准。 3可数性状（见表3） 表3中，尼罗和奥利亚罗非鱼的6项可数性状，除鳃耙数外其余全部合标。它们的鳃耙数上限值，分别高出标准1枚和2枚，表明传代亲鱼经十多年的选育，它们的鳃耙间隙变小，对食物的筛选功能增强，是进化的表现。表3 传代亲鱼F6的可数性状项 目尼罗罗非鱼奥利亚罗非鱼标准值检查值标准值检查值背鳍鳍式D.,1214D.,1214D.,1113D.,1213臀鳍臀鳍A.,911A.,911A.,910A.,910上侧线鳞数1326202518292123下侧线鳞数1320142012181316鳃耙数2731273225292931下咽齿左右下咽齿愈合上有浓密的蓖齿左右下咽齿愈合上有浓密的蓖齿上下颌有圆錐状颌齿各三列最外列“Y”型上下颌有圆錐状颌齿各三列最外列“Y”型 4可量性状（见表4）表4列出了尼罗与奥利亚罗非鱼可量性状的标准值和本项目F6传代亲鱼(30尾)的实测值,由于准标没有提供样本的容量数和可量性状指数的标准差(s),因此我们无法与其进行统计假设测验,只能将相应指标作常规比较分析。又由于准标与本项目的个体大小的取样范围不同,因此对它们全长、体长、体重三项绝对值进行比较就无意义,但比较全长/体长等8项相对指标却有重要价值,因为它们是判断鱼类形态定型与离散程度的重要依据。表4 传代亲鱼F6的可量性状项 目尼罗罗非鱼奥利亚罗非鱼国家行标F6国家行标F6全 长 (cm)10.017.829.633.3420.534.527.731.74体 长 (cm)11.9722.6624.9227.9417.029.623.2526.95体 重 (g)26.8218.31059.41166.8无810.7905.4全长/体长1.2350.0381.1910.0101.1900.0201.1900.010体长/体高2.4070.1592.2120.1312.7350.2052.3170.145体长/头长3.2020.2093.4400.0223.4250.8652.1000.130头长/吻长3.0770.7102.8130.2322.9450.5552.8500.280头长/眼径4.2630.4385.6900.4504.4800.7604.6450.495 头长/眼间距2.1820.3481.9940.1042.2050.1452.7050.210体长/尾柄长10.0201.3496.4530.3437.8801.996.1050.750 体长/尾柄高无7.5861.0158.1352.0756.8050.420从表4可以看出,在奥利亚罗非鱼F6的8项相对指标中，除体长/体高明显小于标准值外, 其余七项虽与标准并无差异,都处在标准值的区间内,但它们的变幅几乎都比标准值小,这从更多方面揭示了奥利亚罗非鱼F6遗传基础的一致性和品质的优良性。而体长/体高值明显小于准标值，反映出F6的体高经长期选育获得了明显增加。在尼罗罗非鱼F6的三项头部比值中,头长/吻长和头长/眼间距与标准相符,头长/眼径稍大，即F6的眼径稍小。这种变化是否存在正负影响,目前未见有报道。比较分析表5中体长/体高等4项粗体字指标可知，它们与标准值均有差异，向我们提供了如下信息:（1）尼罗与奥利亚F6的体高增加 由表4可知尼罗和奥利亚F6体长/体高值的变幅，都完全落在标准值的区间之外、明显小于标准值，因此可以肯定，它们的体高经长期定向选育已取得成效。（2） 尼罗与奥利亚F6的头部缩小 尼罗和奥利亚F6体长/头长值较之标准值也都有明显提升,表明F6的头部确已缩小,其定向选育已取得成效。（3） 尼罗F6尾柄增长、奥利亚F6有相同趋势 表4中尼罗F6全长/体长和体长/尾柄长值都较准标值小,前者说明或是F6的体长变长了或是尾鳍缩短了，而后者或是F6的体长变短了或是尾柄增长了。要能使这2种结果统一的唯一条件,应是F6尾柄增长。F6奥利亚的体长/尾柄长平均值也明显小于标准值，但由于标准值变幅很大，又未表明标准差，因此我们不能对此做作出差异显著的推断，只能认为F6奥利亚的尾柄也有增长的趋势。尾柄之所以增长，可能是由于体高增加使连接臀鳍部位的尾柄，在形态上发生和谐性变化。尾柄是鱼肉的重要来源之一, 其增长有利于提高产肉率。综上分析，可以得出如下初步结果: F6尼罗及奥利亚亲鱼的遗传基础具有很高的一致性, 种质提纯复壮收到理想效果,突显出优良种质； F6尼罗与奥利亚的形态有明显改良,呈现出头小、体高的体型特征，对提高奥尼杂交罗非鱼产肉率具有重要意义。5生长表5、表6列出了F6尼罗、奥利亚罗非鱼不同阶段体长与体重的生长实测情况，同时列入了标准值以做比较。表中标准值与F6相应值差异极大:F6尼罗罗非鱼0龄、1龄的体长分别是标准值的1.83倍、1.58倍。体重分别是标准值的6.71倍、4.63倍。F6 0龄的体重居然比1龄的标准值还重160%；奥利亚罗非鱼F6 1龄、2龄、3龄的体长分别是标准值的1.69倍、1.36倍、1.16倍。体重分别是标准值的5.11倍、2.79倍、1.98倍。F61龄的体重是2龄标准值的1.95倍,还超出3龄标准值20.5g。以上两种F6罗非鱼的生长与标准值间出现如此巨大差异，可能与制定标准用的样本品系、区域、生长期、养殖条件等因子有关，但F6经10多年连续选育和提纯复壮，使生长等种质获得到大幅提升应是根本原因。表5 尼罗罗非鱼生长实测情况实测参数标准值F6实测值 年龄 (龄)01012实测体长(cm)12.50.617.21.622.90.3527.20.3831.60.31实测体重(g)74.311.8192.157.1498.821.5889.322.61217.328.2 :因标准值实测体长、体重未区分雌雄性别,F6也相应取雌雄鱼各半的平均值表6 奥利亚罗非鱼亲本生长实测情况实测参数标准值F6实测值年 龄 (龄)123123实测体长(cm)13.060.4719.491.2323.931.4922.10.2526.60.3327.80.22实测体重 (g)85.6910.17231.9537.65417.1444.99437.521.9164814.64827.218.86: 因标准值实测体长、体重未区分雌雄性别,F6也相应取雌雄鱼各半的平均值分析取得上述理想结果的原因，除年复一年不懈选育外，主要有以下几方面： 选育用的亲鱼年龄理想：每一代亲鱼选育，使用的都是3龄的传代亲鱼并取其第二、三批产出的苗。总结长期生产实践经验，我们发现罗非鱼自初次性成熟后虽在2、3、4、5龄都能繁殖，但以3龄亲鱼繁殖力强,其产出的鱼苗个体大、体质好、生长快。而3龄亲鱼又以其第二、三批苗的产量大、质量好。无疑，应用这种子代来选育后代有利于传代亲鱼品质不断提升。 选育时跨长：从表1、表2可以看出，每代亲鱼选育都时跨3年，要经过2年生长和2次越冬考验, 这不仅能使优良亲鱼循优生劣汰自然法则脱颖而出,而且能使选育人员对它们有深入的了解予以准确选择。 选育强度大选留率小：从1999年至2005年，尼罗罗非鱼F4F6三代选育中 ，每代参选的同步鱼苗数多达36万尾54.9万尾, 先后经历4次筛选，总淘汰率高达99.54%99.72%,总选留率仅0.28%0.46%;奥利亚罗非鱼相应为19.4万尾32万尾、 99.41%99.68%和0.32%0.59。 选育标准高: 在选育全过程中不仅要求个体大、体格强和头小、背高、体厚的体型特征明显，而且严格要求生长指数一致，表1、2由于受表宽限制，我们仅列出了亲鱼的体重变异系数。由表1、2可知,无论是尼罗还是奥利亚的变异系数都很小，仅2.0%左右,而体长变异系数更小，只在0.5%上下,微小的变异系数,客观上揭示了传代亲鱼遗传基础的同一性,是品质优良的重要依据。（二）个体选育1.基本情况个体选育起自1997年,2005年2006年，通过个体选育共筛选出150对尼罗亲鱼，100对奥利亚亲鱼。同时它们的子代分别进入了F7、F8的群体选育阶段。现仅将本项试验结果列于(表7)。 表7 尼罗与奥利亚罗非鱼亲本个体选育情况种类选育 年份参选亲鱼年龄(龄)参选数(对)平均体重(g)选留数(对)选留率(%)平均产苗量(尾/批对)子代雌雄比(%)尼罗2005F63100110020.786060362083251.31：48.692006F7220078615.39045348793251.18：48.82奥利亚2005F6310085318.796060356270649.33：50.672繁殖与子代雌雄性比鉴于传代亲鱼来之不易，因此未对F6代再作解剖检测，我们仅以农业部水产种质监督检验测试中心资料进行分析比较（见表7）。F3入选的每对尼罗亲鱼（加权,下同）平均每次产苗3540尾，子代雌雄比51.2348.77。奥利亚亲鱼相应为3495尾和49.1550.85。表7 尼罗与奥利亚罗非鱼的个体怀卵量检测参数尼罗罗非鱼奥利亚罗非鱼标准值实测值标准值F5实测值年 龄 ，龄4 月2121体 重 ，g141.854.91213.5110.850150200350258.5390.5绝对怀卵量，粒1335.7456.414989.81958.525060080012009341601相对怀卵量，粒10.55.112.31.253434: 相对怀卵量,单位体重(g)所含卵粒数。 由表7可知，无论尼罗F5还是奥利亚F5，它们的相对怀卵量都比标准值高，而尼罗更加突出。虽然绝对怀卵量在亲鱼的年龄、体重不同情况下缺乏可比性，但当年龄相同时，可直观地确判别它们繁殖性状的优劣。如表7中F5奥利亚的1龄应与标准值的2龄相当，然其绝对怀卵量要明显高出标准值，这在生产中具有重要价值。3. 奥尼杂交罗非鱼的雄性率表8是近几年我们的自检结果。由表8可见,奥尼罗非鱼的雄性率已接近100%。目前，我国罗非鱼养殖的主要品种是奥尼杂交罗非鱼，从理论上讲，它们的雄性率应是100%，但实际只在80%90%，仅少数能达到95%以上，由此引发出养殖效益、环境与产品质表8 奥尼杂交罗非鱼的实测雄性率 抽检数：100尾/次时间，年.月2004.72005.72006.72006.11体重，g132.6138.8128.7133.2146.9155.0540.0565.5雄性率，%10099100100量安全等一系列问题7。专家暜遍认为亲鱼种质退化、不纯是造成雄性率低的主要原因。本项目NA、AA在引进后的头几年，检测不同鱼池、批次自交子代性比，发现变幅很大，