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文档简介
实验二 生物组织中可溶性还原糖 脂肪 蛋白质的鉴定 一 实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应 因此可以用这些化学试剂检测生物组织中的有机化合物 实验二 生物组织中可溶性还原糖 脂肪 蛋白质的鉴定 1 可溶性还原糖的检测可溶性还原糖 斐林试剂 砖红色沉淀ch2oh choh 4 cho 2cu oh 2 ch2oh choh 4 cooh cu2o 2h2o 实验材料 苹果或梨等富含还原性糖的植物组织 实验试剂 甲液 0 1g ml的naoh溶液乙液 0 05g ml的cuso4溶液 使用方法 现用现配 生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖 果糖 麦芽糖 蔗糖 前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基 因此叫还原性糖 而蔗糖的分子中没有 因此叫非还原性糖 再加入2ml刚配制的斐林试剂 水浴煮沸2分钟 先在试管中加入2ml组织样液 斐林试剂 淡蓝色的cu oh 2 与可溶性还原糖在加热的条件下 生成砖红色的cu2o沉淀 如用沸水浴加热 cu2o沉淀颗粒较大 呈现砖红色 如用酒精灯直接加热 cu2o沉淀颗粒较小 呈现黄色 2 蛋白质的检测蛋白质 双缩脲试剂 紫色反应在碱性溶液 naoh 中 双缩脲 h2noc nh conh2 能与cu2 作用 形成紫色的络合物 很多与双缩脲结构相似的肽键也能进行双缩脲反应 实验材料 1 植物组织样液 黄豆种子 浸泡1 2天 或用豆浆 2 动物组织样液 鸡蛋清蛋清 水 1 10稀释 搅拌均匀后 用6 7层纱布过滤 先加2ml组织样液 再加2ml双缩脲试剂a液 加3 4滴双缩脲试剂b液 实验试剂 a液 0 1g ml的naoh溶液b液 0 01g ml的cuso4溶液 为什么先加a液再加b液而不是同时加或先加b再加a呢 3 脂肪的检测脂肪 苏丹iii 橘黄色脂肪 苏丹iv 红色当含有大量油滴的植物细胞用苏丹 染色后 在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒 实验材料 富含脂肪 植物油 的种子如花生 核桃 蓖麻等的种子 花生干种子 在实验前需要浸泡3 4h 浸泡时间过长 则组织太软 影响切片效果 新鲜的花生可不浸泡或浸泡少许时间 材料处理 徒手切片法 制片过程 课本19页 4 淀粉的检测与观察淀粉 碘 浅蓝色 材料 马铃薯匀浆 碘液不要加太多 加1到2滴就行了 为什么 加碘液太多 碘液的颜色遮住反应产生的颜色 影响到实验结果的观察 二 注意事项 1 合理安排 注意安全2 苹果组织液必须临时制备 保存时间不能过长3 双缩脲试剂b cuso4 不能多加 硫酸铜自身颜色会影响到实验结果的观察 因此b液不能多加 三 讨论与探究 1 你能否用鉴定可溶性还原糖的方法 对青菜叶 韭菜叶和甘蔗茎做相应的鉴定 2 你有没有简便 直观的方法证明花生种子中含有脂肪组织 1 青菜叶和韭菜叶内含有的糖是纤维素 它们不具有还原性 只有将纤维素在高温高压和催化剂的作用下 生成具有还原性的葡萄糖 斐林试剂来鉴别 而甘蔗茎中含有蔗糖 它也无还原性 可将其在硫酸的作用下生成具有还原性的糖 再用斐林试剂来鉴别 1 现有下列生物材料 苹果 黄豆种子 梨 花生种子 蛋清 马铃薯块茎 最适于用来鉴定还原性糖的有a b c d 2 将面团包在纱布中在消水中搓洗 鉴定粘留在纱布上的粘稠物质和洗出的白浆分别用的试剂是 a 碘液 苏丹iii溶液b 双缩脲试剂 碘液c 亚甲基兰溶液 苏丹iii溶液d 碘液 斐林试剂 3 使用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时 必须将斐林试剂的甲液和乙液a 分别加入样液中b 混匀后再加入样液c 加热后再加入样液d 同时加入样液中 4 用苏丹iii染液对脂肪组织进行染色时 可用来冲洗浮色的试剂是 hclb h2oc 50 的酒精d 无水酒精 5 下列关于实验操作步骤的叙述中 正确的是 用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液 可直接用于蛋白质的鉴定b 脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到花生子叶中
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