胃蛋白酶原PG临床推广.ppt

胃蛋白酶原I II临床推广胃蛋白酶原是筛查胃癌和评价幽门螺旋杆菌 HP 根除治疗效果的指标 消化性溃疡复发和胃癌切除术后复发的判定指标 一 胃蛋白酶原的特性 pepsinogen 胃蛋白酶原有 型和 型两种胃蛋白酶原在pH 5 0时活化为胃蛋白酶 pepsin 胃蛋白酶原I II PGI II 分泌部位 PG 是胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌 PG 除主细胞和颈粘液细胞分泌外 幽门腺和十二指肠腺亦可产生 PGI PGII 食道 胃底 贲门 幽门 十二指肠 胃窦 幽门括约肌 黏膜皱襞 斜肌层 胃大弯 内腔 胃小弯 浆膜 纵肌层 环肌层 蜂巢胃 胃腺 黏膜 黏膜肌层 胃小凹 血管 黏膜下层 斜肌层 环肌层 肌层 纵肌层 结缔组织层 内脏腹层 浆膜 胃部结构图 胃蛋白酶原I II PGI II PGI是检测胃泌酸腺 胃底腺 细胞功能的指针 胃酸分泌增多PGI升高 胃酸分泌减少或胃粘膜腺体萎缩PGI降低 PGII与胃底粘膜病变的相关性较大 相对于胃窦粘膜 其升高与胃底腺管萎缩 肠上皮化生或假幽门腺化生 异型增生有关 PGI II比值进行性降低与胃粘膜萎缩进展相关 介绍内容 检测方法 放射免疫测定法 RIA 有放射性酶免疫测定法 EIA 需样少 较低特异性和灵敏度时间分辨荧光免疫分析法 TRFIA 灵敏 简便 较高特异性 灵敏度较低 易受干扰 乳胶增强免疫比浊法 较低灵敏度及特异性 方便 适合大规模筛查 易受干扰 五 胃蛋白酶原检测 五 胃蛋白酶原检测 酶标板 反应底物 包被抗体 检测抗原 酶标抗体 酶标抗体 反应产物 酶免疫测定法 乳胶免疫测定法 LIA法 以血清或血浆为样本 利用全自动生化分析仪对样本的乳胶凝集反应所导致的吸光度变化进行检测 将抗PGI II 抗体与乳胶颗粒表面结合制成乳胶试剂 与试验样本中的PGI II 反应 使乳胶颗粒产生凝集 在确定的波长下测定该反应的浊度变化 其变化量会随着检测样本中PGI II 的浓度而成比例增加 根据已知浓度的PGI II 标准液制备标准曲线 求出样本中PGI II 的浓度 乳胶颗粒 抗体 抗原 乳胶免疫测定法 LIA法 凝集产生浊度 化学发光 chemiluminescence 是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象 某些物质 发光剂 在化学反应时 吸收了反应过程中所产生的化学能 使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态 当电子从激发态回复到基态时 以发射光子的形式释放出能量 这一现象称为化学发光 化学发光法原理 底物A 底物B 发光反应 化学发光酶免疫分析法 CLEIA 胃蛋白酶原I II PGI PGII 试剂盒性能指标 BSBE 最低检测限为PGI 1ng ml PGII 1ng ml线性范围 PGI 200ng mL PGII 100ng mL抗干扰性 0 1g l的胆红素 18g l的甘油三酯和2 5g l的血红蛋白 RF为520IU ml 小于上述浓度的物质不会对该试验产生干扰稳定性 开盖放在试剂仓中14天 空白无变化 质控结果基本无变化 可两点定标 采血要求 静脉采血2 3mL于普通管中 不能使用含EDTA 枸橼盐酸试管 离心分离出血清 2 8 条件下 样本可保存7天 20 可长期保存 避免样本反复冻融 五 胃蛋白酶原检测 检验方法实验前准备 1 将试剂盒从冷藏环境中取出 放置室温 18 25 平衡至少30分钟 2 将恒温箱或恒温水浴锅温度调到37 待温度稳定后使用 3 取1包固体洗液用500mL纯化水溶解后备用 实验步骤 较准品或血清 酶结合物 室温振荡 洗板 拍干 发光底物A B 发光仪检测 包被板 37 温育60min 河南美凯生物其他二类产品 A 化学发光定量检测系列产品1 性激素系列LH FSH PRL T P E2 fE32 甲功系列T3 fT3 T4 fT4 TSH Anti TG Anti TPO3 糖尿病系列C P INSB 胶体金快速检测系列产品LH HCGC 微生物类系列产品BV诊断 唾液酸酶法 BV联合检测 化学反应法 Uu和Mh培