《细胞生物学实验》教学大纲.doc

细胞生物学实验教学大纲课 程 名 称：细胞生物学实验 英 文 名 称：Cellular biological experiment课 程 编 号：14070101 实 验 课 性 质：非独立设课课 程 负 责 人：张尚立 开放实验项目数：25大 纲 主 撰 人：杨晓梅 曹慧仁 大 纲 审 核 人：张尚立时永香 石 梅 一、学时、学分课程总学时：54 实验学时：54 课程总学分：1.5 实验学分：1.5二、适用专业及年级 生物科学、生物技术、生态学、生物工程和生命基地三年级三、实验教学目的与基本要求细胞生物学实验是为生命科学学院13年级各专业学生开设的实验课程，本实验课程的教学目标是：培养学生的基本实验技能，专业基础类实验能力及创新思维能力；训练学生依据实验方案能够自主完成实验项目。通过实验训练，使学生能够具有观察、比较、分析、专业基础类，实验动手，数据处理和书写实验报告、生物绘图、制表等方面的能力。四、主要仪器设备普通光学显微镜、倒置显微镜、荧光显微镜、复式光学显微镜及其摄影装置、电子显微镜、超薄切片机、冷冻切片机、石蜡切片机、制刀机、离心机、恒温箱、冰箱、培养箱、二氧化碳培养箱、恒温蜡箱、恒温水浴锅、解剖器械、超净工作台、组织捣碎机、分析天平、放大机、电热板、流式细胞仪、电泳仪、湿盒、细胞电泳仪、计算机、酶联免疫仪。五、实验课程内容和学时分配序号实验项目名 称实 验 内 容学时分配实验属性实验类型每组人数实验要求指导教师已开/未开1细胞膜通透性试验1.了解细胞膜对物质通透性的一般规律2.了解溶血现象及发生机制3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开2死活细胞的鉴别1.掌握死活细胞鉴别的原理及方法2.掌握细胞计数的方法3.了解类坏死现象的原理3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开3细胞凝集反应1.了解细胞膜表面结构2.测量凝集时间3.镜下观察凝集细胞的形态3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开4显微放射自显影技术1.试剂的配制2.动物的注射方法3.了解放射性同位素的基本知识4.基本操作：掺入（标记）、样品制备、乳胶膜制备、曝光、显影、定影、染色、观察6专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开5叶绿体的分离及荧光观察1.掌握细胞器分离的一般原理和方法2.学习差速离心法3.熟悉荧光显微镜的使用4.观察叶绿体的形态、自发荧光和次生荧光3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开6小鼠肝细胞线粒体的超活染色及观察1.观察活细胞内线粒体的形态、数量与分布2.学习一些细胞器的超活染色技术3.掌握各种具有专一性的活体染料3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开7细胞培养方法1.原代细胞培养2.细胞传代培养3.培养细胞的生长特征与形态分型4.培养细胞的冻存、复苏技术6专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开8细胞融合1.了解细胞融合的基本原理、类型和方法2.掌握PEG诱导细胞融合的方法3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开9动物染色体标本制备及观察1.掌握动物染色体标本制备的基本过程，了解操作步骤的原理2.掌握常用动物染色体的数目及特点6专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开10染色体核型分析1.掌握人类染色体的分组特征及核型分析方法2.染色体显微镜分析（计数、分组）3.染色体照相分析3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开11巨噬细胞吞噬现象观察1.了解细胞吞噬作用的过程及其意义2.掌握小鼠腹腔给药和脊椎脱臼处死的方法3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开12显微摄影术1.学会并掌握显微摄影装置及其操作技术2.学会照片的拍摄、冲洗方法3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开13各种因素诱导细胞凋亡及凋亡细胞的形态和生化特征观察1.光镜下的形态学观察2.电镜形态学观察3.DNA电泳4.流式细胞仪检测5.原位末端标记9专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开14透射电子显微镜样品制备1.试剂的制备2.组织固定与包埋3.支持膜的制作4.玻璃刀的制作5.切片6.切片的染色3专业基础类演示2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开15PAS法显示糖类1.试剂的配制2.熟悉PAS法原理及操作步骤3.观察糖原在组织细胞中的分布3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开16脂类细胞化学苏丹III染色1 了解脂类染色原理、操作步骤及脂类标本制片原则2 学会小白鼠的肠系膜铺片3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开17DNA的Feulgen反应染色法1.熟悉Feulgen反应的原理及操作步骤2.观察DNA的分布3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开18过氧化物酶显示（色素形成法）1.了解过氧化物酶显示方法的原理、操作步骤2.观察过氧化物酶的分布3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开19甲基绿派洛宁法显示RNA、DNA1.熟悉甲基绿派洛宁法显示核酸的原理及操作步骤2.观察RNA、DNA在细胞中的分布3.学会做血涂片3专业基础类综合2必做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开20间接免疫荧光法显示中间纤维1.熟悉免疫细胞化学的原理及操作步骤2.掌握免疫荧光法的原理及实验方法3.学会荧光显微镜的原理及使用3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开21联会复合体的染色及观察1.学习光学显微镜显示联会复合体技术2.观察光镜下联会复合体的形态结构3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开22原位杂交技术1.了解原位分子杂交技术的原理及应用2.掌握原位分子杂交的操作过程3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开23细胞电泳1.细胞介质的制备2.样品的制备3.盐桥的制备4.网格目微尺的校正5.毛细管测量层的选择6.电泳速度的测定3专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开24抑制细胞增殖的有效成分的筛选1.光镜下的形态学观察2.电镜形态学观察3.DNA电泳4.流式细胞仪检测5.酶联免疫仪检测9专业基础类综合2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开25石蜡切片及冰冻切片技术1.试剂配制2.样品的取材、固定、脱水、浸蜡、包埋、修块、切片3.切片的脱蜡及染色3专业基础类演示2选做张尚立时永香杨晓梅石 梅曹慧仁已开六、考核方式根据细胞生物学理论及实验教学的要求，结合细胞生物学实验课程教学的特点，制定以下考核办法：实验课考核的最终成绩，由平时成绩和期末考评组成，平时成绩占40%，考试成绩占60%。记分办法：1. 实验课课堂表现：包括实验态度、操作技能，实验记录及实验结果。（10分）2. 实验报告：要求实验报告书写规范，简明扼要，结果真实，对出现的问题、现象能以科学态度分析，进行结果讨论。（20分）3. 纪律卫生：不迟到、不旷课，不在实验室打闹、不大声喧哗。实验结束，认真整理实验室台面，值日生负责清扫实验室卫生，离开实验室前检查实验室水电安全情况。（10分）期末考试：实验动手能力，实验设计能力和实验创造性能力检验，老师设计各种命题让学生抽签选择，学生根据命题要求回答、操作，给出考查成绩（60分）。七、实验教科书、参考书（一） 教科书细胞生物学实验（第二版）， 杨汉民、刘玉章等，高