3-COLOR样本错误分析.doc

FLOW CYTOMETRY April 2000 三色 样 本 错 误 分 析血样A 试剂 CD3/4/45 良好样本 血样放置时间 0小时 染色后放置时间0小时 FL3/SSC图上，淋巴细胞典型表现为CD45强阳性，小SSC的紧密细胞群。单核细胞出现在淋巴细胞之上1112点对位置。粒细胞为FL3弱阳性，大SSC的密集细胞群。大SSC且FL3强阳性的是TruCOUNT标准微球。 以淋巴细胞设门，FL1/FL2图上明显可见 CD3 + 4 - , CD3 4 + , CD3 4 -的 三群 相互分开细胞。FL1/SSC图上可见FL1强阳性，小SSC的淋巴细胞群。此图作为正常对照血样A 试剂 CD3/4/45 有问题的样本 血样放置时间 120小时 染色后放置时间0小时 淋巴细胞群变分散，阈值内出现更多碎片。单核细胞群变分散，偏移到10点 置。粒细胞群变分散 。SSC下降。 FL1/FL2图上仍可见 CD3 + 4 - , CD3 4 + , CD3 4 -的 三群相互分开细胞。但鉴于 CD45/SSC图的表现，分析时要慎重。血样A 试剂 CD3/4/45 无价值的样本 血样放置时间 144小时 染色后放置时间144小时导致淋巴细胞群极度分散，单核细胞群无法辨认，粒细胞群SSC降低。FL1/FL2图各细胞群混和无法分析。FL1/SSC图上T细胞群与其它细胞群混和。此样本应废弃。血样B 试剂 CD4/8/3 良好样本 血样放置时间 0小时 染色后放置时间0小时 此图显示 CD4/8/3 染色时T细胞的典型表现。 FL3/SSC图上，淋巴细胞典型表现为 CD45强阳性，小SSC的紧密细胞群。 FL1/FL2图上，CD4与CD8群体 清晰分开。 此图作为正常对照 血样B 试剂 CD4/8/3有问题的样本 血样放置时间 96小时 染色后放置时间48小时T细胞群分散，不能与碎片分开，设门困难。 FL1/FL2图上细胞群难于区分，增加设十字门的难度。鉴于上图的表现，分析时要慎重。血样B 试剂 CD4/8/3 有问题的样本 血样放置时间144小时 染色后放置时间144小时CD3+细胞群与碎片无法区分，不能设T细胞门。若设门，FL1/FL2图也无法分析。此情况下应废弃该标本。血样C 试剂 CD3/4/45有问题的样本 混匀不当与正常对照相比，淋巴细胞与单核细胞群略分散，如果正确混匀，加血样时血挂壁的失误对样本影响很小。对于这种样本可以继续分析。血样C 试剂 CD3/4/45有问题的样本 未 混匀淋巴细胞、单核细胞及粒细胞群极分散。FL1/FL2图示Q1至Q2的细胞带。回收率尚可，但CD3+4+细胞较之同一血样正常处理的标本只有80%左右。FL1/SSC图显示T细胞与碎片混和，设门困难。应废弃此样本。血样D 试剂 CD3/4/45有问题的样本 溶血素过量( 1000l )FL3/SSC图显示淋巴细胞呈带状与上方单核细胞衔接，淋巴细胞与单核细胞无法区分，不能设门。FL1/FL2图R1图看似正常，但回收率和绝对计数与正常处理标本不可比。FL1/SSC图显示T细胞SSC抬高，无法分析。鉴于CD45/SSC图，应停止分析废弃标本。血样D 试剂 CD3/4/45有问题的样本 溶血不足( 250l )与溶血素过量图类似，FL3/SSC图显示淋巴细胞带上抬更多，淋巴细胞与单核细胞无非区分，不能设门。 FL1/FL2图R1图看