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文档简介

课题：基因工程的基本操作程序（第三课时）【学习目标】1.掌握目的基因检测与鉴定的方法。2.dna分子杂交技术的原理。3.总结基因工程操作中的一些注意事项【重点难点】重点:目的基因检测与鉴定的方法。难点：目的基因检测与鉴定的方法。【自主学习】目的基因的检测与鉴定（1）为什么要检测与鉴定：（2）检测的内容与方法的比较类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第一步目的基因是否进入受体细胞是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出mrna是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质是否成功显示出杂交带个体水平鉴定（3）目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是。（4）什么是探针？。（5）dna分子杂交技术的原理是。【问题探讨】1.为什么需要进行个体生物学水平的鉴定？2.若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？3.dna分子杂交技术还有哪些应用?4.dna分子杂交与分子杂交有什么区别？5.基因工程的操作中，哪些过程发生碱基互补配对现象?【课后小结与反思】基因工程操作的8个易错点(1)目的基因的插入位点不是随意的基因表达需要启动子与终止子的调控，所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位。(2)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象第一步存在逆转录法获得dna，第二步存在黏性末端连接现象，第四步检测存在分子水平杂交方法。(3)原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少。(4)一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。(5)目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中。(6)不熟悉标记基因的种类和作用：标记基因的作用筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等。(7)对受体细胞模糊不清：受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌)；一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟的红细胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白质。(8)还应注意的问题有：基因表达载体中，启动子(dna片段)起始密码子(
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