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课题:基因工程的基本操作程序(第二课时)【学习目标】1基因表达载体的构建2将目的基因导入受体细胞的方法【重点难点】重点:1基因表达载体的构建2将目的基因导入受体细胞的方法难点:将目的基因导入受体细胞的方法【自主学习】一、基因表达载体的构建(1)基因工程的核心(2)构建表达载体的目的:使目的基因在受体细胞中,并且可以遗传给。(3)表达载体必须有、。(4)启动子位于基因的,它是识别和结合的部位,驱动基因转录得到。终止子位于基因的,也是一段有特殊结构的。启动子与终止子的结构单位是(5)标记基因的作用是。(6)构建过程的示意图:(7)由于受体细胞不同,将基因导入受体细胞的方法也不同,所以基因表达载体的构建不是千篇一律的。二、将目的基因导入受体细胞阅读课本1213页,(一)转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内的过程。(二)将目的基因导入植物细胞(1)受体细胞:(2)农杆菌转化法(采用最多的方法)农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对_ 植物没有感染力;ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的上。转化过程:构建的表达载体转入导入植物细胞目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(3)基因枪法基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(4)花粉管通道法我国独创的一种方法(三)将目的基因导入动物细胞(1)方法:(2)受体细胞:(3)操作程序:目的基因表达载体取卵(受精卵) 显微注射注射了目的基因的受精卵移植到性动物的内发育新性状动物。(四)将目的基因导入微生物细胞(1)原核生物特点:、多为、相对较少等。(2)大肠杆菌最常用的转化方法是:处理细胞,成为细胞表达载体与感受态细胞混合细胞吸收dna分子。【问题探讨】1.启动子与起始密码子有何区别?2.终止子与终止密码子有何区别?3.基因表达载体的构建需要哪些工具酶,如何将目的基因与运载体连接起来形成重组dna分子(以质粒为运载体)?4.培育转基因动物时,受体细胞能否采用动物体细胞,为什么采用受精卵?5将目的基因与载体混合并
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