河北师范大学考研复试.doc

一、名词解释（每小题4分，共20分）1、负转录调控：当调节蛋白存在，结构基因不转录的调控系统。2、启动子（promotor）：是RNA聚合酶起始RNA合成所特异结合的DNA序列，是一段位于结构基因的5端上游区的DNA序列，能够活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确地相结合，并具有转录起始的特异性。3、增强子(Enhancer)：是一个顺式作用元件，能够提高一些真核生物启动子的利用，并能够在启动子任何方向以及任何位置(上游或者下游)起作用。4、RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指内源性或外源性双链RNA（dsRNA）介导的细胞内mRNA发生特异性降解，从而导致靶基因的表达沉默，产生相应的功能表型的缺失现象。5、外显子：编码成熟RNA的DNA序列。二、论述题（每小题20分，共80分）1、简述Northern杂交的原理及其在分子生物学中的应用 原理是DNA双链中的碱基互补的原则（3分）。将DNA酶切、电泳、转移、固定在膜上（5分），用放射性同位素和非放射性同位素标记探针，和膜进行杂交，显影和显色（5分）。该技术在分子生物学中的用途非常广泛，如检测DNA时用到该技术，基因的拷贝数检测，外源基因是否进入了受体的检测等，举出一种即可（7分）2、以乳糖操纵子为例说明原核生物基因表达调控的精确性。（1）当大肠杆菌的培养基中无葡萄糖，也无乳糖时，但由于存在本底组成型合成，RNA聚合酶就会转录出一个或几个lacZ,Y,a的mRNA，翻译出几个lacZ,Y,a的产物，即半乳糖苷酶，透性酶，转乙酰酶（5分）。当培养基中没有葡萄糖而只有乳糖存在时，细胞会利用本底合成产生的透性酶将膜外的乳糖转运到膜内，由半乳糖苷酶将之分解，产生的别乳糖（诱导物）与结合在操作子上的阻遏蛋白相结合，使阻遏蛋白离开操作子结合区，现在RNA聚合酶可以与启动子相结合，从而具备了转录的条件。这样lacZ,Y,a可以大量转录，合成大量的酶来分解利用乳糖。（8分）（2）而当培养基中只有葡萄糖存在时，由于葡萄糖的一个代谢产物可以抑制AMP环化酶的作用，同时促进磷酸酯酶的作用，使cAMP的浓度下降，CAPcAMP复合物不能形成，则启动子不能正常开启，基因表达被关闭。（7分）3、 详述DNA右手双螺旋结构模型的特点。DNA二级结构模型中，最著名的是1953年Wstson和Crick提出的右手双螺旋结构模型。其涵义为DNA是由两条平行互补的多核苷酸链组成的，构成DNA的两条核苷酸链的方向是相反的（即一条是35，另一条是53），两条链以右手的方向相互缠绕呈螺旋状，因此叫右手双螺旋结构模型（5分）。B型结构的特点：右手双股螺旋；（5分）每圈螺旋10个碱基对，螺旋扭角为36；螺距34埃及，每个碱基对的螺旋上升值为3.4埃及（5分）；碱基倾角 - 2，碱基平面基本上与螺旋轴垂直；螺旋轴穿过碱基对，大沟宽而略深，小沟窄而略浅（5分）。4、论述PCR的原理并举例说明在分子生物学中的应用是体外快速扩增特定基因或DNA序列的一种技术。（3分）通过变性与引物退火（5分），在DNA聚合酶作用下使DNA延伸的循 环技术，能大量扩增目标DNA 的数量（5