载体激素类药物分析

第九章 甾体激素类药物分析甾体激素类药物的 分类肾上腺皮质激素雄性激素蛋白同化激素性激素 孕激家雌激素各种甾体激素结构上的差异主要在于其取代基的种类 、 位置 和 数目 ， 双键 的位置和数目 以及 C10上有无角甲基等。 基本母核 环戊烷骈多氢菲第九章 甾体激素类药物分析第九章 甾体激素类药物分析一、 药物结构与性质关系分析二、 鉴别试验三、 杂质检查四、 含量测定本本 章章 内容内容五、 药物的疗效及用途 肾上腺皮质激素 第九章 甾体激素类药物分析本类药物的结构特点：（ 1）具有 21个碳原子（ 2） A环具有 4-3-酮基的 ， - 不饱和羰基结构（ 3） C17具有 - 醇酮基并多数有 - 羟基（ 4） C10、 C13具有角甲基； C11具有羟基或酮基（ 5）其它：有些皮质激素具有 1， 6 、 9 -卤素， 16 -羟基， 6 、 12 、 16 、 16 -甲基等。 肾上腺皮质激素 第九章 甾体激素类药物分析在结构上，肾上腺皮质激素可以认为是皮质酮的衍生物。3皮质酮 肾上腺皮质激素 第九章 甾体激素类药物分析例如，氢化可的松、醋酸地塞米松、曲按西龙、地塞米松磷酸钠等等。氢化可的松 肾上腺皮质激素 第九章 甾体激素类药物分析返 回 （一）与强酸呈色反应 （二）官能团的反应（三）氧化还原反应（四）沉淀反应（五）衍生物熔点第九章 甾体激素类药物分析（六）水解反应（七）薄层色谱法（八）高效液相色谱法（九）紫外 分光光度法（十）红外吸收光谱法返 回 （一） 与强酸呈色反应 第九章 甾体激素类药物分析1.许多甾体激素能与硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸等呈色，其中以与 硫酸 的呈色反应应用较广。 2.试剂：硫酸的呈色反应中最常用的试剂为甲醇和乙醇，而稀释反应体系的试剂常为稀硫酸或水。 3.应用实例：以氢化可的松的鉴别为例取本品约 2mg ，加硫酸 2ml 使溶解，放置 5 分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入 10ml水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。 返 回 （二） 官能团的反应 第九章 甾体激素类药物分析1.酮基的呈色反应： 甾体激素分子中，大多在 C3和 C20位上含有酮基，能与羰基试剂 肼 发生呈色反应，产生有色物质 腙 。原理：常用的试剂： 2,4 二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼。 H2N NHNO2NO2 H2N NH CON （二） 官能团的反应 第九章 甾体激素类药物分析2. C17位 醇酮基的呈色反应 ： 某些， C17位上具有 -醇酮基（ -CO-CH2OH）的甾体激素，具还原性，可与氧化剂四氮唑盐发生呈色反应，产物的颜色随所用试剂条件不同而定，多为红色或蓝色。 原理： -醇羟基可以被氧化为醛、或醇酮基发生断裂。而氧化剂四氮唑盐被还原而发生呈色反应， （二） 官能团的反应 第九章 甾体激素类药物分析3.甲酮基的呈色反应 ：具有甲酮基或活泼亚甲基的甾体激素类药物亚硝基铁氰化纳芳香醛呈色黄体酮其他甾体亚硝基铁氰化纳 蓝紫色（灵敏、专属）淡橙色或不显色 （二） 官能团的反应第九章 甾体激素类药物分析4.有机氟的呈色反应 ：含氟的甾体激素药物 氧瓶燃烧 F 茜素氟蓝硝酸亚铈显蓝紫色返 回 （三） 氧化还原反应 第九章 甾体激素类药物分析1.碱性酒石酸铜的反应 ：皮质激素的C17-醇酮基具有还原性碱性酒石酸铜Cu2O（橙红色） （三） 氧化还原反应 第九章 甾体激素类药物分析2.与氨制硝酸银的反应 ：皮质激素的 C17-醇酮基具有还原性氨制硝酸银Ag（黑色）返 回（四） 沉淀反应 第九章 甾体激素类药物分析含炔基的甾体激素硝酸银银盐沉淀返 回（五） 衍生物熔点 第九章 甾体激素类药物分析黄体酮 盐酸羟胺 黄体双酮肟 KOH炔雌醇苯甲酰氯 苯甲酸酯 （六）水解反应 第九章 甾体激素类药物分析一些甾体激素类药物具有醋酸酯、戊酸酯及己酸酯的结构，可先行水解，根据水解产物来鉴别。 醋酸可的松 醇制 KOHH2SO4 醋酸乙酯 （香气）返 回（七） 薄层色谱法 第九章 甾体激素类药物分析（八）高效液相色谱法通过比较供试品和对照品保留时间的一致性，进行鉴别 （九）紫外分光光度法 本类药物的分子中存在共扼结构（ 和，具紫外吸收。苯环返 回（十） 红外吸收光谱法 第九章 甾体激素类药物分析中国药典上收载的甾体激素类药物的红外光谱图要求 与 对照图谱一致 。 返 回（一）有关物质（二）游离磷酸盐（三）甲醇和丙酮（四）硒第九章 甾体激素类药物分析返 回 来源：原料、中间体、异构体、降解产物。特点：结构相似、可能存在多个甾体杂质。方法 （具一定的分离能力）：1. 薄层色谱法（多采用高、低浓度对比法）2. 高效液相色谱法（多采用不加校正因子的主成分自身对照法）TLC判定方法： 规定杂质斑点数目； 比较杂质斑点颜色HPLC判定方法： 大多规定杂质峰面积（一）有关物质 第九章 甾体激素类药物分析（一）有关物质 第九章 甾体激素类药物分析2.高效液相色谱法（多采用不加校正因子的主成分自身对照法）炔诺酮中 “有关物质 ”的检查取本品，以甲醇溶解并稀释制成每 1ml中含 2mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取 3ml，置 100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。用含量测定项下的色谱条件，取对照溶液 10l 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高度约为满量程的 10%，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的 2倍。供试品溶液色谱图中如有杂质峰面积的和不得大于对照溶液主蜂面积。 （一）有关物质第九章 甾体激素类药物分析返 回 地塞米松磷酸钠为地塞米松与磷酸形成的磷酸酯二钠盐，所以在其生产和贮存过程中可能引入磷酸盐，因此中国药典对地塞米松磷酸钠进行游离磷酸盐的检查。 原理：方法：对照品法（二）游离磷酸盐 第九章 甾体激素类药物分析740nm 第九章 甾体激素类药物分析期律（二）游离磷酸盐返 回第九章 甾体激素类药物分析（三）甲醇和丙酮 甲醇和丙酮为地塞米松磷酸钠生产过程中所使用的溶剂，甲醇为二类限制使用的溶剂，丙酮为三类溶剂，中国药典均采用气相色谱法测其溶剂残留的。 返 回第九章 甾体激素类药物分析（四）硒 剧毒来源 合成中用二氧化硒 (SeO2)脱氢原理与方法地塞米松磷酸钠 氧瓶燃烧Se6+ 盐酸羟胺 Se4+pH2.02 2， 3-二氨基萘试液 4， 5-苯并苯硒二唑 环己烷 max378nm返 回高效液相色谱法紫外分光光度法比色法第九章 甾体激素类药物分析（一）高效液相色谱法特点：样品用量少、灵敏度高、分离效能好、快速固定相：为十八烷基硅烷键合硅胶流动相：大多是甲醇和水组成的混合液 检测：可采用紫外检测器于 240nm或 280nm波长检测，（因为大多甾体激素都具有 4-3-酮 及苯环等共轭结构）第九章 甾体激素类药物分析返 回（二） 紫外分光光度法 4-3-酮基和 苯环的共扼系统，于紫外光区有特征吸收 4-3-酮 基 max： 240nm波长附近 肾上腺皮质激素 第九章 甾体激素类药物分析返 回（三） 比色法 1.四氮唑比色法2.异烟肼比色法第九章 甾体激素类药物分析（三） 比色法 1.四氮唑比色法原理：17位 -醇酮基（具还