A2蟾蜍骨骼肌及心肌收缩

刺激强度、频率与骨骼肌收缩的关系,心肌收缩记录与心肌特性,实验二,实验目的实验原理实验材料实验内容注意事项,基本内容,实验目的,1.坐骨神经腓肠肌标本的制备2.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系。掌握阈刺激，阈下刺激，阈上刺激，最大刺激的概念。3.观察用不同频率的最大刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响，了解和掌握单收缩、复合收缩、强直收缩特征和形成的基本原理。4.观察心肌收缩的特点并与骨骼肌比较。,实验原理,1.观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系阈下刺激阈刺激-阈强度阈上刺激最大刺激,刺激强度对肌肉收缩的影响,2.不同频率的最大刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响单收缩不完全强直收缩-描记曲线为锯齿形完全强直收缩。,刺激频率对肌肉收缩的影响,3.心肌收缩的特点心肌-具有较长的不应期期前收缩代偿间歇,蟾蜍、蛙板、手术剪、敷料镊、刺针、丝线、玻璃分针、烧杯、锌铜弓、任氏液、滴管、RM6240信号采集系统、刺激电极。,实验材料,一坐骨神经腓肠肌标本制备（第21页）,破坏中枢神经系统：将探针自枕骨大孔(枕骨大孔定位：以脊柱正中线为纵线，两侧眼后毒腺的连线为横线，两线交汇的凹陷处即为枕骨大孔)插入，先左右横断脊髓，再向前搅毁脑，然后再将探针撤回，反向插入脊椎管破坏脊髓。检查蟾蜍四肢全身肌肉完全松驰。,实验内容,剪断脊柱：用粗剪刀自胸部剪断脊柱。 剪除前肢及内脏去皮肤,一坐骨神经腓肠肌标本制备,分离左右下肢：用粗剪刀沿脊柱中线把标本分为左右两半。注意勿损伤神经。 分离坐骨神经：大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。 分离肌肉：分离腓肠肌的跟腱，用线结紧，自跟腱的附着点剪断。提起跟腱将腓肠肌剥离出来，并将小腿其余部分剪掉，保留一小段(约1.5cm)股骨，,一坐骨神经腓肠肌标本制备,一坐骨神经腓肠肌标本制备,二.刺激强度对肌肉收缩的影响,1.标本与仪器的连接股骨断端固定于肌槽的插孔中，神经干搭在刺激电极上，腓肠肌肌腱上的线与换能器相连，换能器与RM6240相连。 点击“实验”菜单，选择“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”，仪器参数：通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz，扫描速度1s/div，灵敏度10-30g，时间常数：直流，滤波频率100Hz。,1.标本与仪器的连接,2.观察项目：,刺激方式单刺激，刺激幅度0.1-3V可调，刺激波宽0.1ms。记录阈刺激和最大刺激值。测量每一刺激强度所对应的肌肉收缩张力；测量最大刺激时肌肉的收缩期和舒张期时间。,三.刺激频率对肌肉收缩的影响,1.点击“实验”菜单，选择“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”，仪器参数：通道模式为张力，采样频率400Hz-1kHz，扫描速度1s/div，灵敏度10-30g，时间常数：直流，滤波频率100Hz。2.系统采用频率递增，刺激幅度：最大刺激强度，波宽0.1ms，采用自动频率方式，起始频率1Hz，结束频率30Hz，步长1Hz，串间隔大于5s。刺激频率按1Hz，2Hz，3Hz，4Hz，5Hz30Hz逐渐增加，连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。3.观察测量各刺激频率所对应的肌肉收缩最大张力。,四.蛙心收缩记录及心肌特性（39页）,1.破坏蟾蜍脑和脊髓，暴露心脏，打开心包膜。 用带有丝线的蛙心夹夹住心尖，将丝线连在张力换能器上，再将换能器固定于铁架台上，调整丝线高度，并将丝线拉紧。将刺激电极安放在心室外壁，使之既不影响心搏又能同心室接触良好。2.张力换能器接RM6240系统第一通道（也可选择其它通道），刺激电极与RM6240刺激输出相连，作刺激标记。,3. 点击“实验”菜单，选择“期前收缩-代偿间歇”，系统进入实验信号记录状态。仪器参数：第一通道，时间常数：直流。滤波频率：10Hz，灵敏度3g，采样频率400Hz，扫描速度1s/div，单刺激模式，阈上刺激强度2-5V，刺激波宽5ms。,四.蛙心收缩记录及心肌特性,仪器连接,在制备标本时，避免过度牵拉神经，避免用手或金属器械触碰神经干。避免动物皮肤分泌物（蟾酥、血液等）污染神经和肌肉；不要用水冲洗，以免影响组织机能。制备标本时，要随时用任氏液润湿神经和肌肉，防止干燥。分离神经时，要把周围结缔组织剥离干净。实验要迅速，以免时间过长影响标本活性, 注意事项, 注意事项,肌肉与换能器的连接松紧适当。给予刺激时，在按刺激器手动开关的同时，按下记录仪的“标记”，记录刺激标记，用于计算肌肉收缩的潜伏期。每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 每次刺激不要超过3-4 秒，以免标本疲劳。实验过程中应常用任氏液润湿标本，以免影响神经和肌肉活性。,RM6240生理信号采集处理系统介绍,一.系统简介1.集生物信号采集、放大、显示、记录与分析为一体，是传统医学实验系统（由放大器、记录仪、刺激器和示波器组成）的换代产品。 2.采用windows中文图形界面，操作简便易学，可使用鼠标，可将图形或实验数据导入Word、Excel中。3.系统功能更强大与灵活，可处理多种生理信号，具有实时显示、记录、分析、处理、打印等多种功能。,二.软件的使用,先开外置仪器，然后再进入“实验系统”，否则系统无法进行“示波”或“记录”，只能对以前记录的波形进行分析。,采集频率,通道模式,扫描速度,时间常数,灵敏度,滤波频率,采集频率：系统采集数据的频率，如采集频率100kHz表示系统100000点/秒的速度采集数据。由于计算机画一个波形是以若干点组成的，所以采集频率应高于信号频率若干倍才能分辩出有效信号。信号频率越高，需要的采集频率就越高。 通道模式：用来选择放大器的工作模式，如：生物电放大器、血压、张力、温度、呼吸流量放大器等。扫描速度：计算机显示波形的扫描速度，如1s/div表示水平方向一个大格代表1秒时间，相当于描笔式记录仪的走纸速度。 灵敏度：物理意义与描笔式记录仪的灵敏度相同，用于选择放大器的放大倍数。,相关参数,时间常数：时间常数用于调节放大器高通滤波器的时间常数，它与高通滤波器的低频截止频率成反比关系。如作神经实验时，因有效信号频率高，应该选择小的时间常数，将低频成份隔离掉，以有助于基线的稳定。有效信号频率低时，应选择高的时间常数或选择直流，如作胃肠电实验时选择5s的时间常数，作张力实验时选择直流等等。时间常数代表放大器低频滤波的程度，1s、0.1s、0.01s、0.001s分别对应放大器的下限截止频率为0.16Hz、1.6Hz、16Hz、160Hz。时间常数越小，下限截止频率就越高，即对低频成分的滤波程度越大。当选择直流时，放大器不作高通滤波。,滤波频率： 用来滤除信号的高频成分。当信号有效成份频率较低时，应选择低的滤波频率，以滤除高频干扰。如观察脉搏波时，选择10Hz的滤波,代表此时放大器的上限截止频率为10Hz，可将10Hz以上的各种干扰滤掉。,标记方式选择、增加标记、删除标记、标记词组选择、打标记,问题,实验过程中，腓肠肌标本的阈值是否会改