自免肝的实验室诊断

,自身免疫消化系统疾病血清学诊断自身免疫性肝病,2015-7-9 张龙锋,非病毒性肝病不容小觑,1,1448例中国军人肝穿病例流行病学的回顾性研究,自身免疫性肝病（ALD)占重要位置,453例非病毒性肝病患者的回顾性分析,10-20% PBC 患者重叠有中等程度的 AIH!,AIH,PSC,PBC,自身免疫性肝病, 原发性胆汁性肝硬化 (PBC) 自身免疫性肝炎 (AIH)原发性硬化性胆管炎 (PSC)重叠综合症,原发性胆汁性肝硬化(PBC), 病理学特点：进行性、非化脓性、破坏性小胆管炎, 发病率: 1.2 / 100，000 /年, 中年女性多见, 症状, 皮肤瘙痒、黄疸, 早期状况良好，从AMA阳性、肝功能正常，进展,至持续肝功能异常，平均6年,实验室检查- 胆汁淤积相关酶、胆红素和血清脂质升高- 免疫球蛋白水平升高 (主要是 IgM)- 存在抗线粒体抗体和抗核抗体 组织学证据 (活检)- 肝内小胆管增生,以前主要在晚期得到诊断（肝硬化） 直到1985年仍认为PBC无法治疗!- 现在提高了实验室检查手段，可实现早期诊断!- 正确的治疗可帮助患者延长生存期!,PBC 诊断,PBC中的自身抗体,GP 210（核膜型）对PBC的特异性为95%AMA阳性的PBC患者中有10-40%阳性率AMA阴性的PBC患者中有20%-40%的阳性率SP 100 和PML（核点型）SP 100对PBC的特异性为97% AMA阳性PBC患者中有20%的阳性率AMA阴性PBC患者中有60%的阳性率PML的意义与SP 100相近,GP210,SP100,PBC相关抗核抗体,特异性指标与临床：AMA,2009年PBC诊断指南的更新1,2009关于PBC指南的诊断2,组织学有非化脓性破坏性胆管炎和小,生化检查提示淤胆，特别是ALP升高； 肝功异常(肝源性ALP升高超过6个月)且血清AMA阳性即可确诊。血清AMA阳性；肝活检对诊断非必须，组织学上特,征性胆管损害可协助诊断。,叶间胆管破坏。随访见ALP正常但AMA(+)者很有可能,有二项阳性可诊断为PBC。1.Keith D et al,Hepatol,2009;50(1):291-308,发展为PBC。2. Ulrich Beuers,et al,J Hepatol 2009;51:237-267,AMA+的PBC，肝活检并非必须,肝脏组织,同时满足,肝源性ALP升高血清AMA(+)即可确诊 PBC患者中AMA阳性率高达90-95% 自免抗体检查避免了肝穿刺后出现近10%并发症的发生!,自身免疫性肝病 原发性胆汁性肝硬化 (PBC) 自身免疫性肝炎 (AIH) 原发性硬化性胆管炎 (PSC) 重叠综合症AIH,PSC,PBC,临床表现-疲劳、上腹不适、瘙痒、食欲不振；早期肝脾肿大、黄疸等-晚期伴有肝硬化腹水实验室检查- 血清转氨酶和胆红素升高- 免疫球蛋白水平升高 (主要是IgG)- 90% 患者可检测到自身抗体鉴别诊断 - 必须排除其他免疫性肝病 (PBC，PSC)和 慢性肝炎（如：病毒，药物，酒精）,AIH诊断,根据自身抗体成组或单独出现而进行的分型，没有任何临床或治疗意义。,AIH 相关自身抗体,1. ASMA（抗平滑肌抗体）,鼠胃：,鼠胃,黏膜肌层,肌层,黏膜腺体间收缩蛋白,肾小管周围纤维,肾小球膜细胞,血管肌层,ASMA (rat stomach),Actin (HEp-2 cells),Actin (primate liver),2. ANA（抗肌动蛋白抗体）,肝片： 出现 “T” 字或 “丁”或“Y” 字样荧光,HEp-2：细胞浆中出现无数束状纤维样结构，有时可伸展到细胞核,仅近端肾小管有荧光，远端小管阴性（半阴半阳）,3. 抗肝肾微粒体（LKM）抗体,鼠肾,鼠肝,肝细胞胞浆产生明显的细颗粒到均质的荧光,荧光表现: 肝细胞胞浆荧光阳性，肝小叶中 心区域荧光减弱阳性率: 1 - 2% 靶抗原: FTCD 亚胺甲基转移酶-环化脱氨酶,LC-1 (liver rat),4. LC-1(肝细胞溶质抗原1型),鼠肝,可溶性肝抗原, SLA (Manns, 1987)肝胰抗原, LP (Berg, 1981),检测: ELISA, Immunoblot阳性率:10-30%靶抗原:UGA-抑制剂- 丝氨酸-tRNA 相关蛋白(Costa, 2000)适应症: 无法解释的转氨酶升高, SLA/LP (Wies, 2000),5. SLA/LP（可溶性肝抗原/肝胰抗原）,C.Liaskos,et al. J Hepatology,2007,1(1):250.,SLA/LP 伴随 Ro52预示病情严重,自身免疫性肝病 原发性胆汁性肝硬化 (PBC) 自身免疫性肝炎 (AIH) 原发性硬化性胆管炎 (PSC) 重叠综合症AIH,PSC,PBC,原发性硬化性胆管炎（PSC),PSC一种肝内和肝外胆管的纤维性炎症，伴有胆汁淤积临床表现。, 发病率: 0.7 /100,000/年年轻男性更常见8%13%发展为胆管癌常伴有溃疡性结肠炎 (50%),pANCA 对PSC是非特异的 :e.g 也可在PBC、AIH、溃疡性结肠炎、丙型肝炎、乙型肝炎中出现pANCA: 自身免疫性肝病的指征（MPO+）,自身抗体,阳性率,70-80%,PSC 相关的自身抗体,Profile(4 Ag):AMA-M2LKM-1LC-1SLA/LP,Profile New(9Ag):AMA-M23E (BPO)Sp100*PML*gp210*LKM-1LC-1SLA/LPRo-52*,* 核型: 核点* 核型: 核膜* Liaskos et al., Antibody responses specific for SLA coocur with Ro-52 in AIH patients,自免肝谱,PBC血清学检测命中率: 94%,检测人群, ALD疑似患者, 原因不明的