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家兔离体肠肌活动的影响实验家兔离体肠肌活动的影响实验 摘要摘要 目的目的 研究乙酰胆碱 Ach 肾上腺素 E HCl NaOH 溶液 25 台氏液及缺氧复氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响 方法方法 制备家兔离体小肠 平滑肌标本 放置于灌流浴槽中 生物信号采集处理系统记录在不同因素作用 下张力曲线 结果结果 滴加乙酰胆碱 Ach NaOH 溶液后 肠肌运动张力和 频率都增大 滴加肾上腺素 E HCl 肠肌运动张力和频率迅速降低 25 台氏液刺激离体肠肌时 肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大 停止通 氧后 肠肌运动张力和频率逐渐降低 复氧后肠肌运动张力和频率恢复 结论结论 乙酰胆碱 Ach NaOH 溶液刺激能促进肠肌运动 肾上腺素 E HCl 能抑 制肠肌运动 短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常 缺氧使肠肌运动 减弱 关键词关键词 HCl NaOH 离体肠肌 乙酰胆碱 肾上腺素 氧气 消化道平滑肌与骨骼肌 心肌一样具有肌肉组织共有的特性 但消化道平滑 肌兴奋性较低 收缩缓慢 富有伸展性 具有紧张性 自动节律性 对化学 温度和机械张力刺激较为敏感 给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境 消 化道平滑肌可保持良好的生理特性 1 实验材料与方法实验材料与方法 1 1 实验材料 1 1 1 实验动物 家兔 雌雄不限 浙江中医药大学动物实验中心提供 1 1 2 实验材料与器械 麦氏浴槽 超级恒温器 张力换能器 铁支架 电脑 木锤 止血钳 手术刀 20ml 注射器 手术剪 持针器 手术圆针 缝线 烧 杯 手术盘 搪瓷碗等 蒂罗德液 即台氏液 0 8 NaCl 0 02 KCl 0 026 MgSO477H2O 0 0065 NaH2PO4 0 02 CaCl2 0 1 NaHCO3 0 1 葡萄糖溶液 肾上腺素 乙酰胆碱 HCl NaOH 溶液 1 2 实验方法 1 2 1 将台氏液快速充满空气小泡后 分成两份 一份置于 25 恒温水浴中 使其温度保持在 25 另一份放放入恒温水泵中的不锈钢槽内预热至 37 38 1 2 1 1 打开恒温水泵 加热台氏液 1 2 1 2 打开空气泵 调试恒温离体小肠灌流装置内槽台氏液中的气流速度 1 2 1 3 打开电脑 点击生物信号采集处理系统图标 显示生物信号采集处 理系统窗口 选择菜单 实验 常用生理学实验 离体小肠平滑肌运动 并将张力换能器输出线连接到已确定作为记录张力的通道 1 2 2 离体小肠段的制备 1 2 2 1 准备两个小手术盘 一个小手术盘用于清洗肠内容物 另一小手术 盘盛预冷台氏 液倒入中 其液体量已淹过小肠段为准 1 2 2 2 用持针器夹持手术圆针 穿线备用 1 2 2 3 取家兔一只 将其倒提 用木锤猛击后脑勺 使之昏迷 迅速进行以 下操作 将其仰卧位固定 用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤 约 5cm 长 打开腹壁 暴露腹腔 顺着胃找到与胃相连的十二指肠 沿十二指 肠向空肠的方向取出小肠段约 30cm 放入一小手术盘中 用注射器抽取预冷台 氏液冲洗肠内容物 直至冲洗干净为止 将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏 液的小手术盘中 用手术刀刮去肠管外的血管和系膜 将小肠段切割成小段 每 小段肠约 2cm 长 并在小段肠的两端 距断端约 1mm 处各穿约 30cm 长的线 注意在操作过程中 每 10 分钟换一次预冷台氏液 1 2 3 安装离体肠段 具体操作是 1 2 3 1 取出固定架 将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩 并牢固地 绑紧在小钩上 将固定架放回内槽 小钩尽量靠近槽底 重新用张力微调 器固定固定架 将空气泵重新连接至固定架 并通过固定架将空气输入内 槽的台氏液中 1 2 3 2 将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接 用张力微调器缓慢 升降拉线 保持线有一定紧张度 肠段 线应与地平面垂直 同时 肠段 及上端的线头不得碰及槽壁和固定架 1 2 3 3 换液 打开灌流槽的内槽排水阀门 排去原来的台氏液 用注射器从 恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中 其每次用 量以淹过肠段的量为准 调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮 使气 泡即细小 均匀 又不影响肠段的运动 1 3 实验观察与记录 1 3 1 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线 观察其收缩活动的特点 向台氏 液中加入 HCl 盐酸 2 滴 观察小肠收缩活动的改变 反应稳定后冲洗 2 遍 1 3 2 记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线 向台氏液中加入 NaOH 2 滴 观察 小肠收缩活动的改变 反应稳定后冲洗 2 遍 1 3 3 肠活动恢复后 将原 37 38 台氏液换成等量的 25 台氏液 观察 肠活动的改变 待其活动改变明显时 冲洗 1 遍 再加入等量的 37 38 的台氏液 1 3 4 肠活动恢复后 向台氏液中加入肾上腺素 2 滴 观察小肠活动的改变 待反应稳定后冲洗 2 遍 再加入等量的 37 38 的台氏液 1 3 5 肠活动恢复后 向台氏液中加入乙酰胆碱 2 滴 观察小肠收缩活动的 改变 待反应稳定后冲洗 2 遍 1 3 6 待肠活动恢复后 停止空气泵的工作 5min 观察肠活动的改变 待其 收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗 1 遍 再加入等量的 37 38 的台 氏液 空气泵打开 5min 肠段收缩活动恢复曲线后终止实验 2 实验结果实验结果 实验名称 传出神经系统药对家兔离体肠肌的影响 实验日期 2016 11 10 2 1 加入 2 滴 HCl 后 肠段张力曲线和频率下降 2 2 加入 2 滴 NaOH 后 肠段张力曲线迅速上升 频率略微加快 2 3 在 25 台氏液中 离体肠肌张力曲线和频率先迅速下降 后逐渐增大 2 4 加入乙酰胆碱后 离体肠肌张力曲线明显上升 频率没有明显变化 2 5 加入肾上腺素后 离体肠肌张力曲线下降 频率减慢 2 6 缺氧状况下 张力曲线下降 频率略微减慢 复氧后曲线基线高于缺氧前 3 讨论讨论 见附页 4 实验结论实验结论 乙酰胆碱 Ach NaO
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