消毒与灭菌

第五节 抑制或杀灭微生物的理化因素,内容,第一节 消毒灭菌的常用术语第二节 消毒灭菌的方法第三节 消毒灭菌的运用第四节 影响消毒灭菌效果的因素第五节 病原微生物实验室生物安全,第一节 消毒灭菌的常用术语,灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。消毒：杀灭物体上或环境中的病原微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。防腐：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。清洁：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。无菌：不存在活菌的意思。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。,第二节 消毒灭菌的方法,一、物理消毒灭菌法,（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）干燥与低温抑菌法,（一）热力灭菌法,湿热80经5-10min可杀死所有细菌繁殖体和真菌,原理：,多数无芽胞细菌经55-60作用30-60min后死亡,分类：,干热灭菌法、 湿热灭菌法,干热灭菌法,焚烧：废弃物品、动物尸体。烧灼：接种环、试管口灭菌。干烤：160-1702h,玻璃器皿、瓷器等。红外线：1-10m波长最强，但只在照 射到的物体表面产生热效，医疗器械的灭菌。,脱水干燥，使大分子变性,干烤灭菌器,湿热灭菌法（一）,巴氏消毒法：杀灭液体中的病原菌或特定微生物，不耐热成分不被破坏61.1-62.830min或71.115-30s一般用于酒类、牛乳等的消毒。,煮沸法：101.325kPa, 1005min杀灭繁殖体，1-2h杀灭芽胞加入2%的碳酸氢钠，促进芽胞的杀灭，防止金属器皿生锈一般用于食具、刀剪、注射器的消毒。,湿热灭菌法（二）,流动蒸汽消毒法：常压蒸汽消毒法，10015-30min杀灭繁殖体，但芽胞不被全部杀灭。间歇蒸汽灭菌法：100加热15-30min，37过夜，连续三次，用于含糖、牛奶等培养基。,压力蒸汽灭菌法：103.4kPa（1.05kg/cm2),121.3，15-20min杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等物品。,灭菌锅,预真空压力蒸汽灭菌器,湿热灭菌比干热效果好,湿热灭菌时，菌体蛋白质较易凝固。湿热灭菌时，菌体吸收水分，蛋白质含水愈多，凝固所需温度降低。 湿热穿透力比干热大，可使被灭菌物品内部温度迅速上升。 湿热蒸气可放出潜热，这种潜热迅速提高被灭菌物体的温度 。,（二）辐射杀菌法,紫外线,杀菌机理：,波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用,干扰DNA的复制与转录,紫外线穿透力较弱,不耐热物品的表面消毒,特 点：,应用范围：,空气消毒手术室、传染病房、细菌实验室,杀菌机理：,应用范围：,电离辐射,包括高速电子、X射线和射线,干扰DNA合成，破坏细胞膜，产生游离基,一次性医用塑料制品的消毒,食品、药品、生物制品的消毒不破坏其营养成分,微波,波长1-1000mm的电磁波,杀菌机理:,热效应，但不均匀，灭菌效果不可靠,应用范围:,食品、非金属器械、检验室用品、无菌室和病室中食品用具、药杯及其他物品的消毒。,微波干燥杀菌设备,微波药材灭菌干燥设备,（三）滤过除菌法,机制:利用特殊的滤器以去除液体或空气中的细菌，以达到无菌目的。用途:主要用于不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素、药液，以及空气的除菌 。特点:仅能除去细菌，不能去除病毒、支原体、衣原体和有些L型细菌等。,用于滤过除菌的各式滤器,滤菌过程,层流室,（四）干燥与低温抑菌法,在低温状态下真空抽去水分,用途：保存菌种的最好方法,冷冻真空干燥法：,二、 化学消毒灭菌法,化学消毒剂的杀菌机制,促进菌体蛋白质变性或凝固，如酚类（高浓度）、醇类、重金属盐类（高浓度）等；干扰细菌的酶系统和代谢，破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化剂、重金属盐类（低浓度）；损伤细菌的细胞膜，如酚类（低浓度）、表面活性剂、脂溶剂等。,常用化学消毒剂杀菌机理,常用的化学消毒剂及防腐剂对人体组织都有危害，所以只限于外用或环境消毒。 局限于： 1、体表（皮肤、粘膜、伤口的消毒） 2、手术器械消毒 3、排泄物及周围环境的消毒,消毒剂的应用,消毒剂的分类,按消毒剂杀灭微生物的能力分三级： (1)高效消毒剂：可杀灭所有种类的微生物。 (2)中效消毒剂：能杀灭除芽胞以外的微生物。 (3)低效消毒剂：可杀死细菌繁殖体和亲脂性病毒。,消毒剂的效力分类,第三节 消毒灭菌的运用,医疗器械物品的消毒灭菌室内空气消毒灭菌手和皮肤的消毒黏膜的消毒病人排泄物与分泌物的消毒灭菌病人污染物品的消毒饮水的消毒环境的消毒,（一）医疗器械物品的消毒灭菌,（二）室内空气消毒灭菌,物理消毒法 紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用 滤过除菌化学消毒法：化学消毒剂喷雾和熏蒸 过氧乙酸喷雾、熏蒸 过氧化氢喷雾 二氧化氯溶液喷洒 中草药点燃烟熏。,（三）手和皮肤的消毒 用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 （四）黏膜的消毒3%H2O2：口腔粘膜消毒0.01%-0.1%洗必泰或高锰酸钾：冲洗尿道、阴道、膀胱等1%硝酸银：新生儿滴眼以预防淋球菌感染。,（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌用等量的200g/L漂白粉搅拌均匀作用2h（六）病人污染物品的消毒 日常生活小用具：0.5%过氧乙酸浸泡家具： 0.5%过氧乙酸擦洗衣服、被褥：流动蒸气消毒30min（七）饮水的消毒自来水：氯气消毒；少量饮用水：漂白粉 （八）环境的消毒厕所、阴沟：生石灰（氢氧化钙）,第四节影响消毒灭菌效果的因素,消毒剂,微生物,环境,性质,浓度,数量,种类,有机物,温度,酸碱度,作用时间,物理状态,影响消毒灭菌效果的因素,微生物的种类：不同微生物对不同化学消毒剂的敏感性不同，微生物对消毒灭菌的敏感性高低排序：真菌细菌繁殖体有胞膜病毒无胞膜病毒分枝杆菌芽胞。微生物的生理状态：微生物的生长情况影响其抵抗力。微生物的数量：微生物最初的数量越大，所需消毒的时间就越长。消毒剂的性质、浓度和作用时间：一般来说浓度高时，消毒灭菌效果好，消毒时间长，微生物被杀灭的机率大。,影响消毒灭菌效果的因素,温度：提高温度可以增强消毒剂的杀菌能力。酸碱度：在其适宜的酸碱度范围内，杀菌力最强。有机物：有机物能消耗或抑制消毒剂的杀菌能力。,选择适当的消毒剂,低毒,价廉,低破坏,方便,易贮藏,有效,第六节 细菌的分类,一、细菌的分类原则与层次1、传统分类2、数值分类3、分子生物学分类（种系分类）细菌分类的层次与其他生物相同，也是界、门、纲、目、属、种。,属（genera） 由密切相关