对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局部麻醉药物分析

学习要求 1 掌握对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局部麻醉药物的结构与性质 代表性药物的鉴别 检查和含量测定的方法 原理与特点 2 熟悉主要对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局部麻醉药物的杂质结构 危害 检查方法与含量限度 3 了解影响对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局部麻醉药物稳定性的主要因素及体内样品与临床检测方法 本章主要内容 结构与性质鉴别试验特殊杂质与检查含量测定体内药物分析 局部麻醉药 localanaesthetics 是一类能在用药局部可逆性的阻断感觉神经冲动发生与传递的药品 简称 局麻药 局麻药物的化学结构通常包括三个部分 亲脂性芳香环 中间连接功能基 亲水性胺基 第一节对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类药物的结构与性质 对氨基苯甲酸酯类药物基本结构与典型药物1 本类药物分子中都具有对氨基苯甲酸酯的母体 结构通式如下 2 典型药物 苯佐卡因 Benzocaine 盐酸普鲁卡因 ProcaineHydrochloride 盐酸丁卡因 TetracaineHydrochloride 说明 抗心律失常药盐酸普鲁卡因胺 其化学结构与盐酸普鲁卡因仅存在羧酸酯与酰胺的差异 化学性质与本类药物很相似 故也在此一并列入讨论 二 酰苯胺类药物基本结构与典型药物 1 基本结构本类药物均系苯胺的酰基衍生物 其结构共性是具有芳酰氨基结构通式为 2 典型药物 盐酸利多卡因 LidocaineHydrochloride 盐酸布比卡因 BupivacaineHydrochloride 盐酸罗哌卡因 RopivacaineHydrochloride 三 主要理化性质 1 芳伯氨基特性对氨基苯甲酸酯类药物的结构中具有芳伯氨基 除盐酸丁卡因外 故显重氮化 偶合反应 与芳醛缩合成Schiff碱反应 易氧化变色等 酰苯胺类药物结构中具有芳酰氨基 在酸性溶液中也可水解为芳伯氨基化合物 而显芳伯氨基特性反应 2 水解特性对氨基苯甲酸酯类药物因分子结构中含有酯键 故易水解 影响药物水解反应的快慢因素 光 热或碱性条件苯佐卡因 盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸 PABA 盐酸氯普鲁卡因4 氨基 2 氯苯甲酸 盐酸丁卡因对丁氨基苯甲酸 BABA 3 弱碱性脂烃胺侧链为叔胺氮原子 除苯佐卡因外 具有一定碱性 可以成盐 能与生物碱沉淀剂发生沉淀反应 只能在非水溶剂体系中滴定 4 与重金属离子反应特性因酰苯胺类药物分子结构中酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合 生成有色的配位化合物沉淀 此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂而呈色 5 吸收光谱特性因该类药物分子结构中均含有苯环及相应的取代基与脂烃胺侧链 具有特征的紫外吸收光谱与红外光谱行为 6 其他特性其游离碱多为碱性油状液体或低熔点固体 难溶于水 可溶于有机溶剂 其盐酸盐均系白色结晶性粉末 具有一定的熔点 易溶于水和乙醇 难溶于有机溶剂 第二节鉴别试验 一 重氮化 偶合反应分子结构中具有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 均可发生重氮化反应 生成的重氮盐可与碱性 萘酚偶合生成有色的偶氮染料 芳香第一胺类鉴别反应 说明 盐酸丁卡因分子结构中不具有芳伯氨基 无此反应 但其分子结构中的芳香仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应 生成N 亚硝基化合物的乳白色沉淀 可与具有芳伯氨基的同类药物区别 二 与金属离子反应 1 盐酸利多卡因的鉴别方法ChP2010取本品0 2g 加水20ml溶解后 取溶液2ml 加硫酸铜试液0 2ml与碳酸钠试液1ml 即显蓝紫色 加三氯甲烷2ml 振摇后放置 三氯甲烷层显黄色 说明 苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸氯普鲁卡因和盐酸丁卡因等 在同样条件下不发生此反应 其在酸性溶液中与氯化钴试液反应 生成亮绿色细小钴盐沉淀 盐酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后 加硝酸汞试液煮沸 显黄色 对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色 可与之区别 2 盐酸普鲁卡因胺的鉴别方法ChP2010取本品0 1g 加水5ml 加三氯化铁试液与浓过氧化氢溶液各1滴 缓缓加热至沸 溶液显紫红色 随即变为暗棕色至棕黑色 羟肟酸铁盐反应 芳酰胺结构羟肟酸羟肟酸铁 三 水解产物反应 对氨基苯甲酸酯类药物分子中有些具有酯键结构 在碱性条件下可水解 利用其水解产物的特性或与某些试剂的反应可进行鉴别 1 盐酸普鲁卡因ChP 2010 取本品约0 1g 加水2ml溶解后 因具对氨基苯甲酸酯的结构 加10 氢氧化钠试液即析出白色沉淀 加热变为油状物 普鲁卡因 继续加热可水解 产生挥发性二乙氨基乙醇 能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色 同时可生成可溶于水的对氨基苯甲酸钠 放冷 加盐酸酸化 即生成对氨基苯甲酸的白色沉淀 2 苯佐卡因ChP 2010 取本品约0 1g 加氢氧化钠试液5ml 煮沸 即有乙醇生成 加碘试液 加热 即生成黄色沉淀 并发生碘仿的臭气 四 制备衍生物测定熔点盐酸丁卡因的鉴别 取本品约0 1g 加5 醋酸钠溶液10ml溶解后 加25 硫氰酸铵溶液1ml 即析出白色结晶 滤过 结晶用水洗涤 在80 干燥后 熔点约为131 五 吸收光谱特征 1 紫外吸收光谱例如 盐酸布比卡因在0 01mol L盐酸中 照紫外 可见分光光度法测定 在263nm和271nm的波长处有最大吸收 其吸光度分别是0 56 0 58和0 43 0 48 2 红外吸收光谱 第三节特殊杂质与检查 一 盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查杂质来源 水解产生 脱羧 氧化黄色 检查方法 HPLC杂质对照品法 固定相 十八烷基烷键合硅胶流动相 0 1 庚烷磺酸钠的0 05mol L磷酸二氢钾溶液 磷酸调节pH至3 0 甲醇 68 32 检测波长 279nm系统适应性 理论板数按对氨基苯甲酸峰计算不低于2000 盐酸普鲁卡因峰和对氨基苯甲酸峰的分离度大于2 0按外标法以峰面积计算 不得过0 5 二 盐酸普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查 水解产物 4 氨基 2 氯苯甲酸检查方法HPLC法 USP34 NF29LC MS法 杂质成分的分离鉴别 4 氨基 2 氯苯甲酸的MS图谱 光照杂质 盐酸羟基普鲁卡因 三 盐酸利多卡因注射液中2 6 二甲基苯胺及其他杂质的检查 检查方法 HPLC供试品溶液 2mg ml对照品溶液 0 02mg ml2 6 二甲基苯胺对照品溶液 0 8 g ml供试品溶液的色谱图中如有与2 6 二甲基苯胺保留时间一致的色谱峰 其峰面积不得大于对照品溶液主峰面积的0 5倍 0 5 其他各杂质峰面积的总和不得大于对照品主峰面积 1 0 四 盐酸罗哌卡因的光学纯度检查 S型为有效构型R型 心脏毒性较大需严格控制含量 检查方法 毛细管电泳法 步骤 溶液配制 冲洗毛细管 系统适用性实验 测定样品 检测波长 206nm 第四节含量测定 一 亚硝酸钠滴定法1 基本原理伯芳氨基或水解后有芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应 生成重氮盐 可用永停滴定法指示反应终点 反应式为 2 测定条件 1 加入适量溴化钾加快反应速度 KBr是催化剂 在不同无机酸体系中 重氮化反应速度不同 HBr HCl HNO3 H2SO4盐酸条件下 重氮化反应为机制为 因为K1 K2 加入KBr 可增大被测溶液中NO的浓度 因此加快了重氮化反应速度 因为K1 K2 加入KBr 可增大被测溶液中NO的浓度 因此加快了重氮化反应速度 2 加入过量盐酸加速反应作用 1 加快反应速度2 增加重氮盐的稳定性3 防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果酸度增加 反应向左进行 若酸度过大 又可阻碍芳伯氨基的游离 反而影响重氮化反应速度芳胺 盐酸1 2 5 6 3 反应温度1 反应速度加快温度过高2 重氮盐加速分解3 滴定液易分解室温条件下滴定 4 滴定速度避免亚硝酸挥发和分解 先快后慢滴定管尖端插入液面下约2 3处 一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入 使其尽快反应 3 指示终点的方法 1 永停滴定法 chp2010 导致在两电极间有电子流动 从而回路中有电流产生 使得电流计指针发生偏转并且不再返回零点 电位法 外指示剂法 内指示剂法 4 滴定法 先快后慢 盐酸普鲁卡因的含量测定 取本品约0 6g 精密称定 照永停法滴定 在15 25 用亚硝酸钠滴定液 0 1mol L 滴定 二非水溶液滴定基于盐酸丁卡因 盐酸利多卡因和盐酸布比卡因侧链叔胺氮具有弱碱性 因此采用非水溶液滴定法测含量 在滴定盐酸丁卡因时 因其在冰醋酸中碱性弱 加醋酐可以增加其碱性 因醋酐合乙酰氧离子比醋酸和质子的酸性强 可增加碱性 2 CH3CO 2O CH3CO 3O CH3COO 三紫外分光光度法 盐酸丁卡因pH 6条件下于310nm波长处有最大吸收 其紫外光谱吸收特征 可用于原料及其制剂的含量测定 四高效液相色谱法盐酸利多卡因注射液测定法精密量取本品适量 约相当于盐酸利多卡因1 00mg 至50ml量瓶中 用流动相稀释至刻度 摇匀 精密量取