【毕业学位论文】(Word原稿)异养硝化细菌的筛选及硝化性能研究-应用微生物学与基因工程

分类号： 单位代码： 10389 密 级： 学 号： 1101730 福建农林大学硕士学位论文 异养硝化细菌的筛选及硝化性能研究 学 科 门 类：理学 一级学科名称：生物学 二级学科名称：微生物学 研 究 方 向：应用微生物学与基因工程 研 究 生： 指 导 教 师： 博士、 研究员 博士、副研究员 完 成 时 间：二 O 一三年四月 of of 2013 独创性声明 本人声明，所呈交的学 位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位（毕业）论文作者亲笔签名： 日期： 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅 ; 学校可以公 布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 不保密，本论文属于不保密。 学位（毕业）论文作者亲笔签名： 日期： 指导教师亲笔签名： 日期 福建农林大学硕士学位论文 目 录 摘 要 . I . 言 . 1 1 养猪废水的危害 . 1 质污染 . 1 田污染 . 1 气污染 . 1 2 养猪废水脱氮技术 . 2 统生物脱氮技术 . 2 型异养硝化脱氮技术 . 2 3 异养硝化细菌的研究进展 . 2 养硝化细菌的富集与培养 . 3 养硝化细菌的种类 . 3 养硝化细菌的功能 . 3 养硝化细菌的硝化功能 . 3 养硝化细菌的反硝化功能 . 4 养硝化细菌功能的影响因素 . 4 养硝化细菌的应用 . 4 养硝化细菌的固定化 . 5 定化包埋材料 . 5 定化技术在含氮废 水中的应用 . 6 4 本研究的主要内容及创新点 . 6 第二章 异养硝化细菌的分离及鉴定 . 7 1 材料与方法 . 7 料 . 7 品信息 . 7 养基 . 7 要仪器设备 . 8 法 . 8 养硝化细菌菌株分离与筛选 . 8 株鉴定 . 8 2 结果与分析 . 9 养硝化细菌菌株分离和筛选 . 9 养硝化细菌 的鉴定结果 . 9 养硝化细菌硝化活性分析 . 9 养硝化细菌 生理特性 . 10 养硝化细菌 长曲 线测定 . 11 养硝化细菌 16S 鉴定 . 11 福建农林大学硕士学位论文 3 讨论 . 12 第三章 异养硝化细菌种类分子 多态性分析 . 13 1 材料和方法 . 13 料 . 13 株 . 13 养基 . 13 要仪器设备 . 13 法 . 13 养硝化细菌菌株的 析 . 13 养硝化细菌菌株的 析 . 14 养硝化细菌菌株的 析 . 15 养硝化细菌菌株的多态性分析 . 15 2 结果与分析 . 15 养硝化细菌菌株的 态性分析 . 15 养硝化细菌菌株的 态性分析 . 16 养硝化细菌菌株的 态性分析 . 18 养硝化细菌种类的分子多态性分析 . 18 3 讨论 . 19 第四章 异养硝化细菌 P. 氮性能的研究 . 20 1 材料与方法 . 20 料 . 20 株 . 20 养基 . 20 要仪器设备 . 20 法 . 20 析测试方法 . 20 . 氮性能的测定 . 20 种量对 P. 氮性能的影响 . 21 源种类对 P. 氮性能的影响 . 21 ，有效去除环境中氮素的污染，为生物脱氮技术提供了一个新的思路。为了 筛选对高浓度 殖废水具有高效硝化能力的菌株，研究其硝化性能 ， 本文 比较了几种已报道的筛选方法和不同生境中异养硝化细菌筛选效果，确定了以乙酰胺为唯一碳源和氮源，从高 境中可以筛选到高效的异养硝化细菌 。 通过富集培养分离，从 养猪场 沼气池 出水口水中分离到一株异养硝化细菌，并根据部分长度的 16S 列进行了系统发育分析。 16S 序列分析鉴定，该菌株与 有 99%相似性，结合生理生化 实验 分析认定该菌株 是一株脱氮副球菌，命名为 P. 从不同地点的养猪废水中共分离到 24 株异养硝化细菌，利用 术结合 究异养硝化细菌的分子多态性。通过对电泳结果进行聚类分析，结果显示 术可以将同类菌 株聚在一起，不同种类的异养硝化细菌间的分子差异明显。 菌株 P. 有高效异养硝化功能，在初始氨氮浓度为 104 2 h 后，氨氮和总氮去除率可达 最终氨氮和总氮去除率可达 且培养液中无明显的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮累积。在实验条件下，考察了各种因素对 P. 氮特性的影响。 研究结果表明 接种量越大，菌株脱氮效果越好， 且 在低接种量 ，培养 20 h 后仍可达到良好的脱氮效果；菌株对 环境中 氨氮 浓度 的最大耐受值为 600 株进行脱氮作用的最佳条件为 C/N 8、 度 35 ，在此条件下， 8 h 内 菌株 P. 氮去除率达 总氮去除率 比较 不同材料制作 P. 定化小球 的效果，选取海藻酸钠钙法制作固定化小球， 经试验比较 在海藻酸钠 3%、 包埋 18 h 时， 制作的 固定化小球性能最佳。研究固定化菌体对氨氮的去 除特性，结果显示在异养氨化培养基中，固定化菌体除氮时间比游离菌体时间长，但在实际养殖污水 的处理中 中，固定化菌体显示出良好的 环境耐受性和除氮特性 ， 利用固定化小球处理 初始氨氮浓度 382.7 24 h 后 氨氮去除率达 68%。 关键 词 ：异养硝化细菌， P. 脱氮性能， 定化 福建农林大学硕士学位论文