【毕业学位论文】（Word原稿）DEFB-1基因多态性与甘肃裕固族人群龋病易感性的关联性研究

第一章 前言 1 龋病 病概述 龋病 是 口腔中多种因素复合作用导致的牙齿硬组织 慢性 进行性病损 1， 临床主要 表现为 牙体硬组织中 无机质的脱矿 及 有机质的分解，随着 龋病 病程发展 ，牙体硬组织发生从 色泽变化到形成实质性病损 。龋病不仅 可以 导致口颌系统功能障碍 ，而且是多种全身性疾病的危险因素，如 消化系统疾病 、 心血管疾病、过敏性紫癜肾损害 等 2。 龋病列为仅次于心血管病、癌症之后的第三大非传染性重点防治疾病，并提出 “ 在未来 10 年应重点加强对影响人群范围最大且严重影响人们生活质量的龋病及其后遗症方面的研 究” 3。 全 国口腔第三次健康流行病学调查显示，我国 5岁儿童乳牙龋病患病率为 12岁儿童恒牙龋病患病率为 中老年人龋病患病率达 80%以上 4。由此可见，我国的龋病防治任务非常艰巨 。如不采取有效的预防和治疗措施， 龋病 将严重影响人类的健康。 病的致病因素 龋病是人类最普遍最严重的口腔感染性疾病，针对龋病的病因学研究、风险评估乃至预防策略是目前研究的重点问题。龋病四联因素学说认为细菌、宿主、环境、时间均是龋病发生的必要条件。 菌斑和致龋细菌 牙菌斑是附着在牙齿表面 软而 未矿化的细菌沉积 物的膜样物质，即牙表面的生物膜。 目前新兴“生态菌斑假说” 5， 6 认为菌斑是一个整体，应整体看待其生物学行为，即 “致龋性”的细菌不 只是 变 异 链球菌 (S. 而是种类丰富的一群细菌，这些细菌是口腔正常菌群，它们通过复杂的相互作用使牙体硬组织维持整体的脱矿与再矿化水平；当口腔内环境因素发生改变，菌斑内菌群或者基因成分发生改变向脱矿水平倾斜，不断的恶性循环使脱矿过程持续进行进而使牙体硬组织发生龋坏。 7 等采用 16S 隆文库技术发现含有变形 链球菌的龋病易感个体，其他菌属诸如奇异菌属 (丙酸菌属 (及乳酸菌属 (常以更高比例存在；在没有检测到变形链球菌属的龋病易感个体，乳酸菌属、双歧杆菌属 （ 以及低 的非变形链球菌属则是优势菌属；因此， 为患龋易感个体口腔内除变形链球菌之外，韦荣菌属、乳酸菌属、双歧杆菌属、丙酸菌属、低 非变形链球菌属、放线菌属以及奇异菌属都与龋病的发生发展有着显著相关性。 食因素 在龋 病的发病过程中，饮食因素至关重要， 目前通过流行病学研究及实验室研究发现，蔗糖是高致龋性食物，随着摄糖量的增加，人群患龋的风险也随之 增加 8 。 糖类可 作为细菌代谢的底物 ， 在代谢过程中为细菌生存提供营养，其终末酸性 产物又可造成 牙体硬组织的进行性 破坏 9 。 用葡萄糖冲击实验发现，当口内 下降时，变形链球菌和乳酸杆菌 （ 较之前分别增加了 19 和 180 倍，并且抑制了其他非致龋菌的生长和代谢 10 。 研究发现，随着口腔内蔗糖摄 入的增多，细菌生物膜可以生成更多的 胞外多糖，牙釉质脱矿程度也随着口腔内 的下降而 增强 11 。虽然近年关于牙菌斑生物膜形成与饮食因素相关机制的研究越来越多，但迄今尚未阐明蔗糖与生物膜胞外多糖增多而导致牙体硬组织脱矿的确切机制。 主因素 目前大多数学者认为，龋病 的发生发展 不仅 受 致龋菌、食物的性质及食物停留在口内的时间 等因素的影响 ，宿主的遗传易感性也是龋病发生的重要因素 。 龋病的 易感性存在个体差异， 即宿主个体间遗传基因的差异和环境的差异，其患龋病的风险程度不同 ，龋病 易感性亦不相同 。 唾液的成分和功能 的改变 与龋病 发生发展密切相关 。唾 液是牙齿的外环境，唾液的分泌量、成分，缓冲能力及抗菌系统都与龋病发生过程有着密切的关系。唾液对维持口腔正常 持牙面完整性和促进已脱矿牙硬组织的再矿化方面有重要的影响 ，唾液的理化性质及唾液的功能成分 能抵御杀灭唾液或菌斑内致龋微生物， 其中唾液中最有意义的成分是蛋白质如黏蛋白、抗菌蛋白、抗菌肽等 ，它们 影响 着 龋病 的 发生发展 。 这是因为作为牙齿的外环境，唾液的理化性质及唾液的功能成分存在宿主个体间的差异，而这些差异可能导致了宿主龋病易感性的不同。 因此宿主的易感因素成为当前研究热点，多数学者认为 遗传因素是龋病发生发 展的重要因素 12， 遗传因素在个体患龋风险因素中高达 4013。 间 龋病 发生 的每一 阶段均 需要一定的时间才能完成。从牙面上清除所有附着物到获得性膜开始产生；从获得性膜附着到菌斑形成；从致龋菌代谢碳水化合物产酸到釉质脱矿等过程均需要一定时间。同时时间因素还包括牙齿萌出之后的时间和碳水化合物滞留于牙面的时间。不论哪种情况，时间因素都和其他三大因素有联系。 病易感基因的研究 单核苷酸多态性（ 研究遗传变异应用最 广泛的一种， 是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的 列多态性 ，在任何已知或未知基因内和附近都可能找到 具有密度高、遗传稳定性好、应用范围广和易实现自动化分析等特点，是研究相关易感基因的新一代遗传标记。 H 等 14首次应用龋病双生子研究调查 171对异卵双胞胎和 130 对同卵双胞胎的龋病发生情况，发现同卵双胞胎的龋病发生情况更为相似，因此，该学者认为龋病的发生与遗传 因素 密切相关。之后亦有学者证实了H 的研究 15， 16，但由于实验样本量较少，龋病双生子研 究龋病易感人群遗传因素存在较大局限性。随着现代科技的不断进步，基因组学和基因检测技术的深入发展，易感基因多态性的研究已经成为探究龋病宿主遗传因素的重要手段。因此，利用 选龋病相关易感基因，可以更好地理解龋病发生发展的机制，从而为龋病的早期预防、诊断和治疗提供重要的 依据 。 白细胞抗原系统（ 人白细胞抗原系统（ 位于号染色体的短臂，片段大小为 3500有数十个基因座；其中 龋病易感基因，抗原与变形链球菌的定植、粘附相关 17， 18； 1302 分别与唾液中乳酸杆菌和链球菌数量相关，提示其可能为龋病易感基因 19。但也有学者报道上述基因在不同人种间与龋病的关联性有差异20，提示我们 龋病易感基因位点可能与种族及 异性相关。 生素 D 受体基因 （ 维生素 D 受体 （ 亲核蛋白，是介导 1， 25(D 发挥生物效应的核内生物大分子，属于类固醇激素 /甲状腺激素受体超家族成员 。 参与 因的转录与调节，与唾液中钙磷离子浓度、牙体硬组织的钙化程度密切相关。 李志强等 通过对甘肃特有少数民族东乡族、裕固族和保安族的 因多态性的研究发现 t 基因型个体其患龋风险显著增高 21；张良等通过检测长春地区儿童龋病患者 因多态性，亦证实其基因型在病例组与对照组有显著差异，并与龋病发展程度成正相关 22。 质形成蛋白基因 (牙釉质是口腔内高度矿化的牙 体最坚硬部分，由 95机物（主要为含钙和磷的磷灰石晶体）组成，其 它 为水及有机物。 龋病的发生首先是从牙釉质开始，目前多数学者认为编码釉质形成的蛋白异常可使患龋风险增高。 报道证实成釉蛋白基因（ C/T）基因多态性与龋病严重程度显著关联（ 1， P= 5， P=15， P=20，P=23;其他一些学者研究亦证实 因位点 龋 病易感性显著相关 24， 25。 防御素 1 基因多态性与龋病的关系 抗菌肽 （ 是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽，分子量在 2000 7000 左右，由 20 60 个氨基酸残基组成。这类活性多肽多数具有强碱性、热稳定性以及广谱抗菌等特点。 防御素是抗菌肽家族中的一个重要组成部分，其广泛存在于自然界有机生物体内，其主要由消化道、呼吸道口腔粘膜上皮及免疫细胞产生。研究发现人类防御素对革兰氏阳性、阴性细菌、真菌、支原体、衣原体及肿瘤细胞等都具有 高效而广泛的杀伤作用；当病原微生物侵入机体后，防御素可以更快更有效的杀灭微生物，其速度是 100 多倍 26。上世纪 80 年代 次从家兔巨噬细胞中发现防御素，此后又在不同物种间发现了 20 余种相似结构，其蛋白结构中均富含半胱氨酸形成的二硫键，所以统称为防御素 27。根据二硫键的结构和位置，防御素又可以分为 3 种： 防御素，人类主要分布的防御素是 （ ， 具有广谱抗菌 的特点 ， 在生物体和环境之间形成第一道防御线。 研究发现 表 达 水平可能与龋齿、牙周炎 和 口腔鳞癌 相关 28， 29 ， 因编码序列的不同可影响 其 表达与调控 。与其他抗菌肽作用于病原微生物体内酶不同的是防御素主要作用于病原微生物的细胞膜，因此其不易产生抗药性，迄今尚未发现微生物对其有抗药性 30。因此，防御素在机体天然免疫中具有重要的意义，是一种具有广泛应用前景的多肽。 防御素 1 的分子结构和生物学活性 防御素是 1980 年 次从兔肺巨噬细胞中发现 ， 其后又从兔和人的中性粒细 胞胞浆颗粒中分离出 ， 是一类富含半胱胺酸、精氨酸的阳离子抗微生物多肽 ， 分子量较小 (103)， 6 个保守的半胱胺酸残基形成三个分子内二硫键 ，使肽链折叠成三束 子内二硫键对维持防御素结构的稳定性具有重要作用 ， 是防御素抗微生物活性和细胞毒效应的重要结构基础。 成熟的 含 3650 个氨基酸残基 ，其中 6 个半胱氨酸残基 (23独特的空间模式形成二硫键 ， 与 在多肽核内引入环状共价链。根据 收录的数据资料 ， 原肽 (前体 )一般由64200 个氨基酸残基组成。 体的结构比较简单 ， 包括信号序列、短的 (或者无 )原片段、 31。与 32。已知的防御素中 ， 仅 有 11 个氨基酸残基的原片段 。 级结构 是由 3 对二硫键形成 3 股 发夹环 ， 在 螺旋。紧邻 螺旋区段的包裹主要由 间的二硫键驱使形成。已经清楚 ,由于结构上细微的差异 ,特别是 分子表面的性质 ,决定了功能的特异性。通过这些多肽的生物学活性所共有的结构折叠推测 ,它与对应的受体发生相互作用时要达到的最佳尺寸、形状很重要 33。 三级结构 虽然和 防御素 在 列或二硫键拓扑结构并不相同 ,但它们具有相似的三级结构 ,并表现出共同的性质 ,如抗微生物活性 34。 在整个结构中 ,子中心含有一个共同的 (类防御素 )拓扑折叠。这种折叠的原型是人 3 的结构。 子内含 3 个反向平行的 由 3 个分子内二硫键连接。在 , 螺旋片段连接 ,形成分子 片层的连接位点是通过二硫键来稳定的 (35， 36。 四级结构 有 形成多种低聚结构 (潜能 ,这些低聚结构影响着防御素蛋白的生物学活性和功能。 本质为特异性蛋白，这种蛋白的 形成归功于 4 个非共价二聚体 ,每个单体的第一条 种二聚体与以前提到的 37。 因序列中无 和 号通路，故其不因炎症 因子 的表达而上调，而是在上皮组织中生理性表达 38，构成了人体第一道机体免疫防御屏障。 伤的细菌谱很广，包括 伴放线放线杆菌、 牙龈卟啉单胞菌、链球菌、乳酸杆菌、 金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓假单胞杆菌和嗜血流杆菌 等 ，而且可在几分钟内见效 39。多数学者认为 菌 作用机制 是：当致病微生物被 吞噬细胞 吞噬 后， 含有高浓度 胞质颗粒 与 病原微生物细 胞膜融合，将 放至细菌 胞膜 周围， 以插入 病原微生物细 胞壁， 并使其形成孔洞 ， 最终病原微生物因细胞壁破裂而死亡。 抗菌肽除了损伤细菌胞壁， 还 可抑制胞内 发抗菌酶 ； 抗菌肽还可以 杀 真菌菌体和由脂蛋白包被的病毒如流感病毒和单纯疱疹病毒 ，但其具体机制 尚 不清楚 35,38。 其可能抗菌机制过程为： A 白 结构； E 病原微生物被吞噬细胞吞噬后 ， 含有 高浓度 质颗粒被 释放到 胞 外 四周 ， 与 微生物 直接接触，并行使功能； C 双极分子， 如图 1 所示：带正 电的氨基酸侧链 (红色 )和 负电 的氨基酸侧链 (绿色 )， 通过 膜电场作用进入 病原微生物胞 质膜 ；而 后合 ,发生蛋白质构架改变 ，使 病原微生物胞 质膜张力下降， 从而 形成孔洞， 最终病原微生物细胞壁破裂 （图 1） 40。 防御素 1 与口腔疾病的关系 口腔黏膜持续受到各种细菌微生物的挑战、理化因素的刺激而不被感染 ,除了传统观念认为黏膜上皮机械屏障、宿主的获得性免疫系统、正常菌群对致病菌或机会致病菌的制约作用等以外 ,还与机体产生的抗微生物多肽和蛋白密切相关。口腔上皮提供了口腔组织与环境之间的第一道防线 ,上皮组织表达的 类中性粒细胞中的 与其它防御因素共同作用维护口腔健康。 防御素 、 2、 3 在 口腔组织的 牙龈、 腮腺、口腔黏膜 、舌、 小 唾液腺 等组织中均有广泛的表达， 而 肠源性防御素 口腔 组织中的含量极少，防御素 前尚无报道 发现 其在口腔中存在的证据 41 尤其是防御素 1、 2 以及防御素 们在龈沟液、唾液中的浓度较高，其可与唾液、龈沟液中的其他蛋白成分（凝集素、黏蛋白、 性富脯蛋白、唾液免疫球蛋白等）协同作用维护口腔组织的健康，抵御病原微生物的入侵，共同构成了口腔粘膜屏障的第一道防线 47， 48。通过体 外培养口腔牙龈角化上皮细胞，在感染状态和正常状态下防御素 表达水平始终呈现生理性分泌而与炎症的程度无关；防御素 3 则有免疫趋化活性，可在炎症因子（肿瘤坏死因子、核梭杆菌、螺旋体、白介素 1 等）诱导下其大量表达并向病灶部位聚集 49。由于 防御素 于生理分泌性抗菌肽，其严重依赖口腔粘膜上皮角化细胞的正常分化功能，细 胞内钙离 ，即 上皮分化的调节因子是 防御素 理性表达的关键介质，检测发现 防御素 要分布在牙龈角化上皮的基底上层细胞（ 表皮层则检测到 防御素 成熟肽片段 50， 51。 研究发现 口 腔鳞癌组织 中存在 防御素 其浓度远高于正常组织 52。 人 亦证实了上述报道，他们还发现防御素 1 表达水平高的鳞癌患者其预后较好，表达水平低的患者其鳞癌易复发和转移 53。白色念珠菌病是口腔常见的疾病之一，有报道指出口腔癌前黏膜病变，如 口腔扁平苔藓、白斑、白 色念珠菌感染等患者口腔病变组织中防御素 防御素 达水平显著高于正常组织 54， 55。 29 对唾液 度与龋病关系的研究显示，唾液 度与个体患龋风险成负相关。这提示 防止龋病的发生有着重要的作用。目前， 菌防龋机制的研究尚不明确，国外关于因多态性与龋病关联性的研究 尚处于初步阶段 56，国内尚未见 报道 。 肃特有少数民族裕固族与龋病的关系 本 研究 前期 研究发现： 裕固族除个别年龄段口腔疾病患病率略好于全国及西部水平外，其余状况均与全国及西部有明显差异，发病率较高 21。本 实验 拟通过病例对照研究，旨在分析 甘肃 裕固族和当地汉族人群基因 个单核苷酸多态性与龋病易感性的关系。 2 研究内容 究基因 究基因 3 研究目的 析基因多态性与裕固族及汉族人群龋病患病风险的关联性 。 分子生物学角度探索甘肃特有少数民族裕固族和汉族龋病的遗传学原因 。 甘肃特有少数民族龋病 的早期预防、诊断及治疗提供依据。 第二章 研究对象与方法 剂盒仪器 主要试剂： 微量 o., 蛋白酶 K（ 盛生物有限公司 ) 琼脂糖（ 北京拜尔迪生物技术有限公司 ） 2凝管（ 沧州永康医药用品有限公司 ） 上下游引物（ 北京博淼生物科技有限公司合成 ） 主要仪器： 美国西格诺 。 北京六一 仪器厂 ) 高温高压消毒设备（ 超 低温冰箱（ 高速低温离心 机 （ 810R 凝胶成像分析系统（ 颗粒制冰机（ 北京六一 仪器厂 ） 烤箱（ 北京六一 仪器厂） 电子分析天平 (一次性口腔检查盘 400个（ 深圳市超今贸易有限公司 ） 低温冰箱（ 海尔 , 中国海尔集团 ） 液样本采集 所有 血液 样本 在 2011年 11月 采集于 甘肃 肃 南裕固族自治县常 驻汉族及裕固族 人 群高龋 组 164例（汉族 85例，裕固族 79例）； 低龋组 191例 （汉族 86例，裕固族 105例 ） ，年龄 30 本研究得到兰州大学以及西北民族大学伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书 。 受检者由两位经过标 准 一致性培训 及检验 的口腔专业高级职称的医师（ 按 纳入标准：龋病检查标准按照 行。 排除标准：有牙周病、黏膜病、口腔溃疡或智齿冠周炎反复发作等口腔疾病，妊娠期或哺乳期，有系统性疾病，有嗜烟酒史，取口腔标本前 1个月内有抗生素使用史。 本分组（见表 1） 表 1 研究对象的一般情况 of 别 例数 裕固族（男 /女） 汉族（男 /女） 年龄 低龋组 191 86（ 40/46） 105(48/57) 高龋组 164 79(37/42) 85(39/46) 注：经过卡方检验两组之间裕固族和汉族比例无显著性差异（卡方值 =P=男女性别在各组间和组内均未见明显差异（ P 说明民族和性别比例因素对本实验研究结果基本没有直接的影响；两组之间年龄也基本相近，以尽量减少年龄因素对实验的影响。 本采集 抽取前臂静脉血 2超低温冰箱 保存 。 取 血液 o., 方法提取 物 置 冰箱 备用。 因三个位点 物设计 点的选择： （ 1） 结合文献确定本实验 （ 2） 在 站中下载上述候选基因在 用的数据库为7 36 外，分别在候选基因的 5 3端各扩展 5 （ 3） 采用 件对数据进行单体型分析，确定基因的 中最终采用的标准为 （ 4） 在 将 点中，在 5中的 果没有在 出现，则将其取代关联 时将外显子中的 点 点标记出来。 （ 5） 同时，将每一个 基因的位置标记出来，根据所在位置的不同确定每一个位点的重要性，其中 的错义突变及 5域中的位点最为重要。 （ 6） 息核实：在 将每一个已报道过的 点在 的 及在相应基因的位置进行核实。 （ 7）确定 合文献采用 游引物 : 5- 3,下游引物 : 53； 游引物：5- 3, 下 游 引 物 : 5- 3 ； 上 游 引 物53, 下游引物 : 5- 3；序列由北京博淼生物科技有限公司合 成。 增反应 10ng/10 5U/l 25 20上下游引物混合物共 1离子水补足至 494 预变性 10 4 变性 20s, 起始退火温度 56 30s， 72 延伸 1.5 45个循环； 72 延伸5 物经 伸反应、去盐等操作后，点样进行质谱分析。 因型测定 采用质谱分析法（ 国西格诺 接检测 个 量控制及统计学分析 随机抽取 10样本进行重复实验，结果一致；基因频率用 用 2 检验计算两组基因型频率、优势比（ 95可信区间（ 95% = 第三章 结果 1 衡检测 P 2 因 点基因多态性分布 因 （ G/A） 位点高龋组和低龋组基因多态性分布 in rs G/A） 因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5%G 82( 82( - G 56( 84( G/A) 6( 25( 220( 248( - A 108( 134( ：表示 照组） CI(如表 2所示， G/A） 位点基因型频率在高龋组中的分布为 等位基因的分布频率为 在低龋组中的分布为 高龋组和低龋组之间的基因型、等位基因的分布频率统计学上无明显差异 (P 以 龋组 R=5%A 5%50） 以 龋组 5%。 因 （ G/A） 位点高龋组和低龋组基因多态性分布 in rs G/A） 因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5%G 85( 86( - G 54( 82( G/A) 5( 23( 224( 254( - A 104( 128( ：表示 照组） CI(如表 3所示， G/A） 位点基因型频率在高龋组中的分布为 等位基因的分布频率为 在低龋组中的分布为 高龋组和低龋组之间的基因型、等位基因的分布频率统计学上无明显差异 (P 以 龋组 R=5%A 5% =以 龋组 5%。 因 5743407 G/A 基因多态性 表 4 G/A） 位点高龋组和低龋组基因多态性分布 in G/A） 因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5% 87( 96( - G 51( 70( G/A) 6( 25( 225( 262( - A 103( 120( ：表示 照组） CI(如表 4所示， G/A） 位点基因型频率在高龋组中的分布为 等位基因的分布频率为 在低龋组中的分 布为 高龋组和低龋组之间的基因型、等位基因的分布频率统计学上无明显差异 (P 以 龋组 R=5%A 5% =以 龋组 5%。 利用 )函数描绘 所示 其在高龋组与低龋组均无统计学差异 。 X 轴 组别 Y 轴 ) 相关性对照组 2 3 基因 点基因多态性在裕固族组和汉族组的分布 因 因多态性在汉族组和裕固族组的分布 表 5 基因 )位点在汉族和裕固族人群基因多态性分布 in ) in an 民族 /因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5%G 37( 46（ 汉族 3( 42( 32 A 15( 17( 86 (G/A) G 107( 134( A 63( 76( 79 45( 36( 裕固族 3( 42( 57 A 11( 8( 22 (G/A) G 113( 114( A 45( 58( 50 注：表示 照组） n = 例数 R（ CI(按民族分组后，汉族组中基因 )基因型和等位基因频率分布如表 5所示。图表结果显示基因多态性分布在高龋组和低龋组中无明显差异（ P 低龋组中为 低龋组中为 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 裕固族组中基因 )基因型和等位基因频率分布亦如表 5所示。结果表明基因 P。 低龋组中为 低龋组中为 5%计学有显 著意义（ P 说明携带 群患高龋的风险降低了了 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 因 因多态性在汉族组和裕固族组的分布 表 6 基因 )位点在汉族和裕固族人群基因多态性分布 in ) in an 民族 /因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5%G 37( 47（ 汉族 4( 41( 71 A 14( 17( 95 (G/A) G 108( 135( A 62( 75( 74 48( 39( 裕固族 0( 41( 83 A 11( 6( 90 (G/A) G 116( 119( A 42( 53( 12 注：表示 照组） n = 例数 R（ CI(按民族分组后，汉族组中基因 )基因型和等位基因频率分布如表 6所示。图表结果显示基因多态性分布在高 龋组和低龋组中无明显差异（ P 低龋组中为 低龋组中为 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 裕固族组中基因 )基因型和等位基因频率分布亦如表 6所示。结果表明基因 P 。 低龋组中为 基因在高龋组中为 ，低龋组中为 ， 5%计学有显著意义（ P 说明携带 群患高龋的风险降低了了 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 因 因多态 性在汉族组和裕固族组的分布 表 7 基因 )位点在汉族和裕固族人群基因多态性分布 in ) in an 民族 /因型 /等位基因 高龋组 低龋组 卡方值 P 5%G 39( 51（ 汉族 1( 37( 65 A 15( 17( 93 (G/A) G 109( 139( A 61( 71( 75 48( 45( 裕固族 0( 33( 31 A 11( 8( 95 (G/A) G 116( 123( A 42( 49( 75 注：表示 照组） n = 例数 R（ CI(按民族分组后，汉族组中基因 )基因型和等位基因频率分布如表 7所示。图表结果显示基因多态性分布在高龋组和低龋组中无明显差异（ P 低龋组中为 低龋组中为 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 裕固族组中基因 )基因型和等位基因频率分布亦如表 7所示。结果表明基因多态性分布在在高龋组和低龋组中无明显差异（ P 低龋组中为 低龋组中为 低龋组中占 等位基因频率分布为高龋组 低龋组 无统计学差异（ P 利用 )函数描绘汉族、裕固族人群 所示 裕固族组中 X 轴 组别 Y 轴 ) 对照 (汉 /裕 ) (汉