维生素C标准操作规程.doc

维生素C检验操作规程起 草 人日 期20 年 月 日审 核 人日 期20 年 月 日批 准 人日 期20 年 月 日生效日期颁发部门质量部分发部门1.目的 建立维生素C检验标准操作规程，规范操作2.范围 适用于维生素C的检查3.依据： 中国药典2010版二部4.职责4.1 起草 ：QC ，审核： QA ，批准人：质量负责人 4.2 QC实施本规程。4.3 QA监督本规程的实施。5.内容5.1.1性状本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味酸；久置色渐变微黄；水溶液显酸性反应。本品在水中易溶，在乙醇中略溶，在三氯甲烷或乙醚中不溶。5.1.2熔点5.1.2.1试液及仪器一般实验仪器和熔点仪5.1.2.1分析步骤 取供试品，置研钵中研细，移置扁形称量瓶中，采用105干燥；取两端熔封的毛细管，于临用前锯断其一端，将开口的一端插入上述预处理后的供试品中，再反转毛细管，并将熔封一端轻叩桌面，使供试品落入管底，再借助长短适宜（约60cm）的洁净玻璃管，垂直放在表面皿或其他适宜的硬质物体上，将上述装有供试品的毛细管放入玻璃管上口使其自由落下，反复数次，使供试品紧密集结于毛细管底部；装入供试品的高度应为3mm。放入WRS-1D 型熔点仪中。全熔时毛细管内的液体应完全澄清。个别药品在熔融成液体后会有小气泡停留在液体中，此时容易与未熔融的固体相混淆，应仔细辨别。熔点为190-192，熔融时同时分解。5.1.3 比旋度5.1.3.1试液及仪器一般实验仪器和旋光仪5.1.3.2分析步骤 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.10g的溶液，供试液的测定温度应为200.5，使用波长589.3nm的钠D线，（汞的404.7nm和546.1nm也有使用）。供试液与空白溶剂用同一测定管，每次测定应保持测定管方向、位置不变。旋光度读数应重复3次，取其平均值，按规定公式计算结果。以干燥品（药品标准中检查干燥失重）或无水物（药品标准中检查水分）计算。 100 固体样品t= 液体样品t= lc ld式中为使用光源的波长，如使用钠光灯的D线可用D代替； t为测定温度；l为测顶管的长度，dm； 为测得的旋光度； d为液体的相对密度； c为100ml溶液中含有被测物质的重量g，（按干燥品或无水物计算） 测定含量时，取2份供试品测定读数结果其极差应在0.02以内，否则应重做5.2鉴别5.2.1鉴别（1）5.2.1.1试液及仪器一般实验仪器 二氣靛酚钠试液：取2，6-二氯靛酚钠0.lg，加水100ml溶解后，滤过，即得。硝酸银试液：取硝酸银17.5g,加水适量使溶解成1000ml, 摇匀。5.2.1.2 分析步骤称取本品0.2g，加水10ml溶解后，分成二等份（每份5ml），在一份中加硝酸银试液0.5 ml，观察：在另一份中加二氯靛酚钠试液1-2滴，观察。5.2.2鉴别（2） 红外光谱5.2.2.1试液及仪器一般实验仪器和红外分光光度计5.2.2.2分析步骤取供试品约1mg，置玛瑙研钵中，加入干燥的溴化钾或氯化钾细粉约200mg，充分研磨混匀，移置于直径为13mm的压模中，使铺布均匀，压模与真空泵相连，抽气约2分钟后，加压，保持2-5分钟，除去真空，取出制成的供试片，用目视检查后均匀，无明显颗粒。对空气作为背景扫描完后，立即放入供试片进行扫描，录制光谱图。比较本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集450图）5.3检查5.3.1溶液的澄清度与颜色5.3.1.1试液及仪器一般实验仪器5.3.1.2分析步骤称取本品3.0g，加水15ml振摇使溶解，溶液应澄清无色；如显色，将溶液经4号垂熔玻璃漏斗滤过，取滤液，测定时，以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在420nm的波长士 2nm以内测试吸光度。除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长2mn以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长。一般供 试品溶液的吸光度读数，以在0. 30. 7之间为宜。仪器的狭缝波带宽度宜小于供试品吸收带的半高宽度的十分之一，否则测得的吸光度会偏低；狭缝宽度的选择，应以减小狭缝宽度时供试品的吸光度不再增大为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸光度后应减去空白读数，或由仪器自动扣除空白读数后再计算含量。 以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸收度的规定波长范围（nm）220240241250251300300以上吸光度0.40.20.10.055.3.2炽灼残渣5.3.2.1试液及仪器一般实验仪器5.3.2.2分析步骤取本品1.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中，精密称定，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0. 5 1ml 润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在500600；炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷，精密称定后，再在500600炽灼至恒重，即得。计算遗留残渣。残渣%=式中 W坩埚+样后-炽灼后恒重的坩埚与样品称样量；W坩埚-炽灼前恒重的坩埚称样量。5.3.3铁5.3.3.1试液及仪器一般实验仪器和原子吸收分光光度计标准铁溶液 精密称取硫酸铁铵863mg，置1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。5.3.3.2分析步骤 称取本品5.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铁溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。在248.3nm的波长处分别测定。调节增益使能量值位于0.9-1.0之间，然后将显示转为吸光度。吸入空白溶液后按自动调零。吸入标准溶液（A），记录吸光度值，若仪器灵敏度低，则关闭火焰后调节喷雾状态，之后重新点火测试。反复几次，直至获得满意的结果。测定一组标准溶液(A)，记录其相应吸光度后绘制工作曲线。测定待测试样溶液(B)，根据待测试样吸光度在工作曲线上查得实际浓度5.3.4铜5.3.4.1试液及仪器一般实验仪器和原子吸收分光光度计标准铜溶液 精密称取硫酸铜393mg，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。5.3.4.2分析步骤 取本品2.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另一份中加标准铜溶液1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。在324.8nm的波长处分别测定。调节增益使能量值位于0.9-1.0之间，然后将显示转为吸光度。吸入空白溶液后按自动调零。吸入标准溶液（A），记录吸光度值，若仪器灵敏度低，则关闭火焰后调节喷雾状态，之后重新点火测试。反复几次，直至获得满意的结果。测定一组标准溶液(A)，记录其相应吸光度后绘制工作曲线。测定待测试样溶液(B)，根据待测试样吸光度在工作曲线上查得实际浓度 5.3.5重金属5.3.5.1 试液及仪器一般实验仪器稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得。本液含HC1应为9.5%10.5%。酚酞指示液：取酚酞lg ,加乙醇100m l使溶解，即得。变色范围：PH8.310.0(无色红）。氨试液：取浓氨溶液400ml，加水使成1000ml，即得。醋酸盐缓冲液（pH3. 5) ：取醋酸铵25g，加水25ml溶5解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2moI/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节p H 值至3 . 5 (电位法指示），用水稀释至100ml ，即得。硫代乙酰胺试液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液（由1mol/l氢氧化钠溶液15ml、水5.0ml、）5.0ml，加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。1mol/l氢氧化钠溶液：取澄清的氢氧化钠饱和溶液56ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。5.3.5.2分析步骤取三只比色管，分别标记为甲，乙，丙。甲管中加标准 铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5)2ml后,加水稀释成25ml，乙管中加本品1.0g，加水溶解成25ml，丙管中加人本品1.0g，加水适量使溶解，再加标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3. 5)2ml后，用水稀 释成25ml;若供试品溶液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀 焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管、丙管一致； 再在甲、乙、丙三管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放 置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，当丙管中显出的颜色 不浅于甲管时，乙管中显示的颜色与甲管比较，不得更深。5.3.6草酸 5.3.6.1试液及仪器一般实验仪器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。氯化钙试液：取氯化钙7.5g，加水使溶解成100ml，即得。5.3.6.2分析步骤 取本品0.25g，加水4.5ml，振摇使维生素C溶解，加氢氧化钠试液0.5ml，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为供试品溶液；另精密称取草酸75mg，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，加稀醋酸1ml，加氯化钙试液0.5ml，摇匀，放置1小时，作为对照品溶液。供试品溶液产生的浑浊与对照品溶液比较。5.4.含量测定5.4.1试液及仪器一般实验仪器稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml，即得。碘滴定液（0.05mol/L) 取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐酸3滴与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。淀粉指示液：取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倾人100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放