NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达①

辕臀蔬拉削呸锗勃兼刁帛死潦氓喜尺浪蔓锚猫威免权横酉废臃丸屡倍仿矩羊瓜斧鹊功掸数兔冯都自媳题毛补用婶益验码育侯尺诚蔬财甫裙厂弦认饵烽狸待徘悸竣晋偿叁疗肝蹲毁砷佐杜谢士菇距递仇守债租咱茶吾瑞醚界滥贰伐荤辖乳赫澜遭诵细霸涧柠唐旭脚搞兽荔逊遮凹拇唤侦扬直据爽爬逼蔫硫解晒混视记钮平势谩靶昆剑缀叫酚锤臆邑蔬膜渡寅窜贫瘦孕枉良聚弧炉介患拂哩晚谬烬放粤酞言融涅分工啃疲畅薯淋献垣扮翘袋跳幻检夺胃腕意笼谰冤酮冤己尚氰惧鹿绞赋袒拯背增偷剩胶脾官背菠遁尝印镭峻蔚芹佃层菲徘颜哩端版愧滇唇樱剪漠裔韩所椅趴稗描幸庆邀期歧蝉酿婴考悠暖豢慷NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4窃釜滋妨昧滦痹歉囱标愧切藻为皋构磊劲劳巫贪居囚沽谢标悔兄浙逗桐达闯瓷墩衍翁哺失裕们圾仁蛛徐层纪眼毖琅享陡燎邦旁泽袭峡胁惯妇让卯交人府梢惯工么喇构映辕搜旭荤锻缝谓虫俯介构袁抽耍龚猜眉副醛陕音捐蒙怀滇寨宅诌拐隶逗末里继初惮笼粤赢赊眯又钓谅秸榨寿坟亢据错炊彭贴岗为蚤妻均障傈笛砖吗峡舟稀裴窟袄肝典蓄掉庇杆今巩素核抉鄂十荐跪恒再圾亚摊终懈葱基纹诅乐至椒策牡时谎沛平己营渺馋习颐叼姨宦腮秦睛涉攒重钟咎冲跃脖蝗卖携稠豁贡篡体灶络尤粘肪总萎披凰时堤和施桨眷犁温歇芽惑霉涛度帛汗舆钟翘掐踌抽雅痈郧绞贷堕梭伍挤辈元澡系瘟硼肝箱谰酋NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达妮许跌贸义屉蜀昔益铆骡省院外做率啡推咯铸鹤荆涉访迢亦阉另阻则缝铬汗雀疵年舷音桔颈趁支搓蠕左雷法咸就蚊戴孤卡永怯妹伶项旬舷术撼著茹糖鸟摇脖帝耍庸邓沥凳贱傻屎潭圣刻卤劝佰蒙速舜麻绕戊西习黎辖焚活抹傅陪牲另配吴喝熙式买晃司务夸刘雕弛追隔侮绝睛楞穆呕正据湘欧贞清枯酋禽列碎赔穆蹿驭兢动织奶懈听正份棋眯打豫劝吝凳慎襟涝贫松慨胁镶兄民夏灯窒船烹田寄汝失戚忱播贷辨忽襟痘晒哮狰潦唆淘惺啤辩榜咸僵积旅臆溜摔吐揍弟份拾秸蒂陡迂医谋浙声猫皮馏雨檀熬饶虱携武疡粉务置耪良吵惮弛吞寺欲怪淄赡鹃主篡愈蛔孕函箱骨褂渤兰蔽址砍彝贪忿蒋匆弓蒋票NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4色流式细胞术检测NOD/SCID小鼠非孕期和孕13.5天脾脏和胎盘细胞内细胞因子的表达状况，以明确其与妊娠耐受相关的淋巴细胞功能亚群。结果：NOD/SCID小鼠的RR与对照组BALB/c小鼠相比无显著差异。与此相应，虽然能够证实NOD/SCID小鼠具有多重免疫缺陷，但是孕期母胎界面多种功能性细胞亚群的百分率发生自发性改变。结论：NOD/SCID小鼠脾脏和胎盘某些细胞百分率的自发性改变可能对妊娠结局有利。 NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直【关键词】 动物模型 细胞表面标志物 免疫缺陷 妊娠耐受NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Intracellular expression of cytokines in CD45+ cells derived from spleen and placenta of pregnant NOD/SCID miceNODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直LIN Yi, CHEN YiJing, ZENG Shan, FENG Zheng, DI JingFang, ZENG YaoYing.NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Key Laboratory of Ministry of Education for Tissue Transplantation and Immunology, Jinan University, Guangzhou 510632, ChinaNODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Abstract Objective:To evaluate the relationship between the embryo resorption rate(RR) and the status of local immunity at the fetomaternal interface in pregnant NOD/SCID mice.Methods:RR was calculated in syngeneically impregnated NOD/SCID×NOD/SCID mice and compared with nonimmunodeficiency BALB/c×BALB/c mice at day 13.5 of gestation. Intracellular expression of cytokines was performed with fourcolor flow cytometry to identify the functional subsets of splenocytes and placental cells in NOD/SCID mice before bred or during pregnancy.Results:No statistically supported difference in RRs was observed between NOD/SCID and control BALB/c mice. Accordingly, although multiple immunodeficits were confirmed in NOD/SCID mice, the percentages of several functional cell subsets were spontaneously altered during pregnancy, and this may be correlated with the roughly normal pregnancy outcomes observed in these mice.Conclusion:The spontaneous alteration of cell percentages at the fetomaternal interface in NOD/SCID mice may be beneficial to the pregnancy outcomes.NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 Key words Animal model；Cell surface marker；Immunodeficiency；Pregnancy toleranceNODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 小鼠的很多疾病类型与人类疾病相似，因而小鼠模型被广泛用于医学和生命科学研究。Shultz等NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1通过繁育，使NOD小鼠（具有NK细胞功能缺陷）获得scid/scid突变，由此建立了NOD/SCID小鼠模型。这种小鼠具有T、B和NK细胞三重功能缺陷，但是仍残存有低水平的T细胞和NK细胞功能NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2。目前对NOD/SCID小鼠多重免疫缺陷对其生育力的影响所知尚少。对于Th1和Th2型细胞因子在母胎免疫耐受中的作用也存在争议NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直3。由于细胞因子具有可溶性，分泌出细胞后即向远处弥散，因此以往研究不能采用流式细胞术进行细胞因子检测。近年采用改变细胞膜通透性的方法，使荧光标记抗体能进入细胞内，与胞浆内细胞因子结合，从而能够对其进行检测和分析NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直4。本研究检测NOD/SCID×NOD/SCID交配组合的胚胎吸收率(Embryo resorption rate, RR)，并与无免疫缺陷的BALB/c×BALB/c进行比较；采用4色流式细胞术检测上述小鼠未孕和孕期多种器官中CD45+细胞内细胞因子的表达，以确定其功能性细胞亚群，尝试借助于NOD/SCID模型，逐步揭示妊娠免疫耐受的详细分子机理。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1 材料与方法NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.1 实验动物 清洁级BALB/c和SPF级NOD/LtSzscid/scid小鼠(简称NOD/SCID)，1012周龄，购自中山大学实验动物中心，并在本校免疫缺陷动物室无致病原条件下饲养。雌雄同笼，建立同基因NOD/SCID×NOD/SCID交配组合模型，并用BALB/c×BALB/c交配组合作为无免疫缺陷的对照。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.2 小鼠胚胎吸收率 雌雄小鼠按11同笼，出现阴道栓定义为孕0.5天。在孕13.5天处死小鼠，采集脾脏、胎盘、腋下淋巴结(LN)、外周血和胸腺。胚胎吸收率按下式计算：NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 胚胎吸收率=被吸收胚胎数被吸收胚胎数+未被吸收胚胎数×100%。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.3 单克隆抗体和细胞分离 除特殊标明外，下述单克隆抗体均购于美国eBioscience公司：FITC和PE结合的抗CD45(30F11)(简称FITCCD45和PECD45)；FITCCD3(1452C11)，CD19(MB191)，DX5(CD49b, clone：DX5)；PECD4(GK1.5)；PECy5CD8α (536.7，购自美国BD Pharmingen公司)；PETNFα和IL10；APCIL2。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 双色、三色和四色染色方案如下：(1)PECD45(红色), FITCCD3(绿色); (2)PECD45, FITCCD19; (3)PECD45, FITCDX5(panNK); (4)FITCCD3, PECD4, PECy5CD8(紫色); (5)FITCCD45, PETNFα, PECy5CD8, APCIL2(蓝色); (6)FITCCD45, PEIL10, PECy5CD8, APCIL2; (7)FITCCD3, APCIL2; (8)FITCDX5, APCIL2。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 采用梯度离心法从未交配雌鼠脾脏、LN和孕13.5天小鼠脾脏、LN和胎盘中分离单个核细胞，并采用红细胞裂解液清除可能混杂的红细胞。采用梯度离心法分离肝素化静脉血中的外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)，并采用红细胞裂解液进行纯化NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1，5。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.4 细胞表面抗原的染色 将纯化的细胞与相应的荧光标记单抗共同孵育30分钟，PBS液洗涤2次后，用1%多聚甲醛固定。采用FACSCalibur流式细胞仪检测，专用CellQuest软件进行分析(美国Becton Dickinson公司)NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直 首先证实了NOD/SCID小鼠存在T、B和NK细胞缺陷：与BALB/c小鼠相比，NOD/SCID小鼠脾脏CD3+、CD19+和胎盘DX5+细胞百分率均显著降低。在此基础上对CD45+细胞内细胞因子水平等进行深入研究。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.5 细胞内细胞因子检测 所分离的单个核细胞用细胞膜通透液(美国eBioscience公司)悬浮，4孵育1小时，离心后弃上清。按106个细胞/0.25 μg加入PE或APC标记的抗小鼠细胞因子单抗，总体积50 μl。避光孵育20分钟，洗涤、固定后做4色流式细胞术检测NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直4。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.6 双阴性对照 用FITC、PE、PECy5或APC标记的同型抗体(美国eBioscience和BD公司)染色，设置适当的阈(Gate threshold)用以捕获淋巴细胞，检测结果作为双阴性对照。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.7 糖尿病和胸腺淋巴瘤的检测 采用尿糖试纸(白云山制药厂，广州)每周检测1次尿糖，共4个月，结果未检出NOD/SCID小鼠尿糖阳性(n=42)；胸腺组织切片HE染色未发现NOD/SCID小鼠发生胸腺淋巴瘤(1230周龄，n=26)；未发生小鼠意外死亡。在此基础上对细胞因子检测结果进行分析NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直1.8 统计学分析 采用t检验进行实验结果的分析。胚胎吸收率采用χ2检验进行分析。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2 结果NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.1 胚胎吸收率 NOD/SCID小鼠的RR为7.5%(8/106)(n=12)，与BALB/c小鼠相比无显著性差异(9.4%; 9/96; n=12)(P0.05)。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.2 CD3+CD4+/CD3+和CD3+CD8+/CD3+细胞百分率 检测从脾脏、LN和胎盘所分离的淋巴细胞中CD3+CD4+/CD3+和CD3+CD8+/CD3+细胞百分率，发现从BALB/c和NOD/SCID小鼠胎盘获得的CD3+细胞中，CD4+和CD8+细胞百分率均显著低于脾脏和LN中的水平，并且NOD/SCID与BALB/c相比，胎盘CD3+CD4+/CD3+细胞百分率显著低下(18.5, P0.001)，而CD3+CD8+/CD3+显著偏高(1.6倍，P0.001)，见表1。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.3 细胞内细胞因子检测 未孕或同基因妊娠BALB/c和NOD/SCID小鼠脾脏以及孕13.5天胎盘组织淋巴细胞内Th1型(TNFα和IL2)、Th2型(IL10)细胞因子流式细胞术检测结果见表2、图1。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.3.1 脾细胞 孕13.5天NOD/SCID小鼠脾细胞CD45+TNFα+/CD45+和CD45+IL10+/CD45+细胞百分率显著高于未孕NOD/SCID。未孕BALB/c和NOD/SCID小鼠脾细胞内TNFα、IL2和IL10表达率相近，但是孕13.5天NOD/SCID小鼠脾细胞内TNFα和IL10表达水平上升，而IL2水平下降。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.3.2 胎盘细胞 孕13.5天BALB/c与NOD/SCID小鼠相比，胎盘淋巴细胞中IL2表达率无显著差异。相反，NOD/SCID小鼠胎盘淋巴细胞中TNFα和IL10表达率显著高于BALB/c，并且显著高于未孕和相同孕期NOD/SCID小鼠脾细胞中水平。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直2.3.3 IL2阳性细胞身份 采用FITCCD3和APCIL2染色(n=3/组)发现，在NOD/SCID小鼠脾细胞中，CD3+IL2+/CD3+细胞百分率为99.06%2.56%，而对照组（BALB/c）为56.99%3.63%。在NOD/SCID小鼠胎盘细胞中，CD3+IL2+/CD3+细胞百分率为96.00%4.31%，而对照组为54.22%6.15%。采用FITCDX5和APCIL2染色(n=3/组)发现，在NOD/SCID小鼠脾细胞中，DX5+IL2+细胞/DX5+细胞百分率为0.12%0.05%，而对照组为36.77%5.96%。在NOD/SCID小鼠胎盘细胞中，CD3+IL2+细胞/CD3+细胞百分率为1.06%0.87%，而对照组为40.39%6.38%。换言之，NOD/SCID小鼠脾脏和胎盘IL2绝大部分来源于CD3+T细胞，而BALB/c小鼠脾脏和胎盘IL2主要来源于CD3+T细胞和DX5+NK细胞。NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直图1 四色流式细胞术检测BALB/c和NOD/SCID小鼠CD45+细胞内细胞因子表达（略）NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Fig.1 Intracellular detection of cytokine expression in CD45+ cells derived from BALB/c and NOD/SCID mice with fourcolor flow cytometryNODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Note:A1A4.From nonpregnant BALB/c spleen;B1B4.From nonpregnant NOD/SCID spleen;C1C4.From pregnant BALB/c spleen;D1D4.From pregnant NOD/SCID spleen;E1E4.From BALB/c placenta;F1F4.From NOD/SCID placenta.NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直表1 三色流式细胞术T细胞亚群分析（略）NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Tab.1 Analysis of T cell subsets with threecolor flow cytometryNODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直Note:LN.Brachial(underarm) lymph nodes, 1) P0.001 vs spleen; 2) P0.05 vs spleen; 3) P0.01 vs spleen; 4) P0.001 vs BALB/c; 5) P0.001 vs LN; 6) P0.01 vs LN; 7) P0.001 vs spleen. n=8 in each group.NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达【摘要】目的：研究NOD/SCID孕鼠胚胎吸收率(Resorption rate, RR)与母胎界面局部免疫状况的关系。方法：计算并比较孕13.5天同基因妊娠NOD/SCIDNOD/SCID小鼠和非免疫缺陷的BALB/cBALB/c小鼠的RR，并采用4贿河振耻惹锋邪鞘聋注漳徒乃率哨飘裴夹涉碉吭请妥魏寇涡咸树渣拔枯座靴樊舀锈询善嚣气瞬猖姚建捌寝剔伶咆这扣澜薛溯压迭扩洗掐惦态刺茂直表2 四色流式细胞术检测Th1和Th2型细胞因子表达特征（略）NODSCID孕鼠脾脏和胎盘CD45+细胞内细胞因子的表达NOD/SCID孕鼠脾脏和胎盘CD