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Department of Histology and Embryology, School of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, China;p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯2. Department of Anatomy, Xinxiang Medical College, Xinxiang 453003, Henan, China; p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯3. Department of Histology and Embryology, Shandong Medical College, Linyi 276002, Shandong, China)p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯To explore the expression of p38 mitogenactivated protein kinase(p38MAPK)in early embryos and the endometrium during periimplantation in mice. Methods Early embryos at different stages and uterus of the nonpregnant, and pregnant uterus of 1 to 8 days pseudopregnancy in mice were obtained. The expression and changes of p38MAPK in early embryos and the periimplantation mouse endometrium were examined by immunohistochemistry. An image analysis was also performed. Results p38MAPKpositive staining was found in the preimplanted embryos and gradually increased with development. In the pregnant group, p38MAPKpositive expression was weak at 3 days and peaked at 4 to 5 days in the endometrium of pregnant mice, then declined in the lumina epithelium, but increased in decidual cells. In the pseudopregnant group ,weak staining of p38MAPK was only observed on the 4th day of gestation, and negative staining was observed on the other days. p38MAPK was expressed weakly in the endometrium of nonpregnant mice. Conclusion p38MAPK activity may be required to support embryo development through the murine preimplantation interval. p38MAPK, in addition to relating to blastocyst implantation, p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯胚泡植入是哺乳动物生殖过程的关键环节,涉及胚泡与子宫内膜之间一系列复杂的相互作用。植入过程受众多因素的影响,近年国外研究发现,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase, p38MAPK)参与植入前胚的发育,但国内相关的报道很少,对小鼠围植入期子宫内膜中p38MAPK表达的研究国内外均未见报道。本实验利用免疫组织化学技术及图像分析法,对小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜中p38MAPK的表达进行系统检测,旨在深入探讨p38MAPK信号传导通路在早期胚胎、子宫内膜中的变化及其与胚泡植入的关系,为抗植入研究提供一定的理论依据和适宜的动物模型。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1 材料与方法p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 11 实验动物及处理 p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯未经产健康成年雌性昆明小鼠与同品系成年雄性小鼠由山东大学实验动物中心提供。雌鼠体重2530?g, 雄鼠体重3035?g。颗粒饲料喂养, 随意饮水,正常光照, 室温2225?。将正常雌性小鼠分别与正常雄性小鼠和输精管结扎雄鼠21合笼,次日清晨检查阴栓,有阴栓者定为真孕或假孕第1天(d1)。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1.2 主要试剂 p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯兔抗鼠p38MAPkinase多克隆抗体,SABC免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒、粘片剂APES 均购于武汉博士德生物工程有限公司。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1.3标本制备p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1.3.1 胚卵的获得p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯取真孕第2、3天小鼠输卵管,在OLympas解剖显微镜下,用细吸管冲洗获取2细胞、4细胞期胚卵;取真孕第3、4天小鼠输卵管及子宫角,同法获取8细胞期胚、桑椹胚及胚泡。将所有幼胚均置于APES处理过的载玻片上,冷丙酮固定10?min,室温晾干,4?存放,备染。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1.3.2 子宫内膜切片制备 p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯取真孕和假孕小鼠40只,随机分为8组,每组5只,分别于真孕及假孕第18天上午10时脱臼处死,剖腹取子宫,用同样方法取5只正常未孕动情期雌性小鼠子宫作为对照组。所得标本用4%多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,连续切片(厚5?μm)。将切片裱于涂有APES的载玻片上,置44?烤箱内烤干后备染。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯1.4 免疫组化染色和免疫荧光染色p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯将子宫切片脱蜡入水,3% H2O2甲醇溶液室温下处理10?min,以灭活内源性过氧化物酶。0.01?M柠檬酸微波炉煮20?min,以修复抗原。滴加山羊血清,以消除非特异性着色。滴加兔抗鼠p38MAPkinase多克隆抗体(稀释比例1200,4?过夜)。然后依次滴加生物素化山羊抗兔IgG(37?温育20?min),链酶亲和素-生物素复合物(streptoavidinbiotin complex,SABC,37?温育20?min)。DAB室温显色5?min,酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。每组均设阴性对照,以PBS代替一抗进行孵育。阳性部位为棕黄色,根据光学显微镜观察着色深浅,将结果分为强阳性(+p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯2 结 果p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯21 小鼠早期胚胎中p38MAPK的表达 p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯p38MAPK阳性着色部位均匀分布于植入前早胚细胞中,随着妊娠进展,其表达逐渐增强。2、4细胞期胚呈阳性着色(图1A、B),8细胞期胚、桑椹胚、胚泡细胞均呈强阳性着色(图1C、D、E)。而植入后第68天胚胎p38MAPK呈阴性表达。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯2.2 小鼠子宫内膜中p38MAPK的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯2.2.1 p38MAPK在围植入期子宫内膜中的表达 p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯p38MAPK在围植入期子宫内膜中的表达情况见表1。p38MAPK在小鼠子宫内膜中主要表达于腔上皮、腺上皮和蜕膜细胞的细胞浆,偶尔在胞核中。其在腔上皮的表达主要集中在基底面,在腺上皮胞浆中呈均匀着色。未孕小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮小鼠不同发育时期早胚细胞中p38MAPK的表达 免疫荧光染色结果(FITC,×200)中p38MAPK均呈弱阳性表达(图2,A)。真孕组的第3天,p38MAPK在腔上皮呈阳性表达,第45天时,p38MAPK的表达达到高峰(图2,B),此后下降;第3天时p38MAPK在腺上皮的表达呈弱阳性,到第4天其表达明显增强,且于此后的4?d一直维持在阳性水平;第5天p38MAPK在蜕膜细胞呈阳性表达,第68天呈强阳性表达(图2C)。假孕组只有第4天子宫内膜腺上皮、腔上皮的p38MAPK表达呈弱阳性。空白对照呈阴性着色。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯222 p38MAPK在围植入期子宫内膜中的表达规律p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯图像分析和统计学处理结果显示(图3、4、5),真孕组第36天子宫内膜腔上皮p38MAPK的表达明显高于未孕组,P0.01,差异有统计学意义;第4天明显高于第1、2、6、7、8天,P0.01,差异有统计学意义;与第3天相比,P0.05,差异有统计学意义;与第5天比较,差异无统计学意义。而假孕组第4天的表达水平明显高于未孕组,P0.01,差异有统计学意义。另外,真孕组第26天子宫内膜腔上皮p38MAPK的表达水平明显高于相应同期假孕组,P0.01,差异有统计学意义。真孕组第48天子宫内膜腺上皮p38MAPK的表达明显高于未孕组,第4天明显高于其余7?d,P0.01,差异有统计学意义;假孕组第4天的表达水平明显高于未孕组,P0.05, 差异有统计学意义。真孕组第18天子宫内膜腺上皮p38MAPK的表达水平明显高于相应同期假孕组。真孕组第58天小鼠子宫内膜蜕膜细胞的表达明显高于相应同期假孕组。p38MAPK在真孕组小鼠子宫内膜中的表达变化趋势与假孕组明显不同。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯3 讨 论p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路是一类重要的信号传导系统,参与细胞增殖、生长、分化及凋亡等多种细胞行为的调控1。目前,至少鉴定出了4种MAPK超家族成员,包括细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signalregulated kinases, ERK)、p38MAPK、Cjun 氨基末端/应激活化蛋白激酶(thecJun Nterminal kinase or stressactivated protein kinases, JNK/SAPK)和大丝裂原活化蛋白激酶1(big MAP kinase 1, BMK1)/ERK5通路2。其中p38MAPK是由360个氨基酸组成的38?000?U酪氨酸磷酸化蛋白激酶3。p38MAPK信号传导通路参与细胞的生长发育及细胞间功能同步等多种生理过程,被认为是细胞信息传递的共同通路4。近年来,随着MAPK在胚泡植入方面的研究进展,p38MAPK与胚泡发育及植入的关系也引起了人们的关注。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 Natale等5人用免疫荧光和RTPCR方法在小鼠植入前胚胎中检测到p38MAPK的mRNA和蛋白;Paliga等6发现小鼠植入前胚胎发育依赖p38MAPK的激活。本实验结果显示,植入前胚细胞均表达p38MAPK,且随着妊娠进展,其表达逐渐增强,而植入后表达减弱,表明p38MAPK通路在植入前胚胎的细胞内信号传递中发挥着作用。p38MAPK的表达升高时间恰为植入开始的时间,提示p38MAPK参与了小鼠胚胎植入前的发育分化。这与Natale、Paliga等人的试验结果基本一致。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 有研究表明,在人滋养层细胞团与子宫内膜单层上皮细胞共培养的体外着床模型中,子宫内膜上皮细胞中p38MAPK被激活,诱导其凋亡,从而利于胚泡植入7。还有研究表明,在灵长类动物蜕膜细胞的体外培养中,白介素1可通过激活p38MAPK信号途径等调节胰岛素样生长因子结合蛋白1表达和子宫内膜上皮细胞蜕膜化以及介导基质金属蛋白酶的表达,以利于胚泡植入8。本研究结果显示,子宫内膜中p38MAPK的表达高峰发生在真孕第45天,此时恰值“植入窗”开放、胚泡粘附、侵入之时,提示:p38MAPK可能启动和促进胚泡与子宫内膜之间的识别和粘附,影响植入过程。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 环氧合酶2(cyclooxygenase 2,COX2)是在胚泡植入中起重要作用的前列腺素合成限速酶,COX2基因敲除的小鼠表现出明显的排卵、受精、着床及子宫内膜蜕膜化障碍。有文献报道, p38MAPK特异性抑制剂可以显著减少子宫内膜间质细胞COX2 基因表达,从而抑制子宫内膜蜕膜化9。本实验结果显示,在孕58?d,子宫蜕膜细胞的p38MAPK表达逐渐增强,表明p38MAPK通路在子宫内膜蜕膜化过程中起作用,推测p38MAPK通路可能通过COX2途径促进蜕膜反应。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 本研究结果还表明,p38MAPK在真孕组小鼠子宫内膜中的表达明显高于假孕组,推测其表达不仅受母体激素等因素调节,还可能与胚泡信号有关。可能由于胚泡直接的物理刺激和其分泌的化学物质造成的化学刺激,进一步激活了子宫内膜中p38MAPK的表达。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 总之,p38MAPK在胚泡发育过程中起着重要作用,同时在胚泡粘附、植入和子宫内膜蜕膜化等过程中也可能起着重要作用。所以,若在一定时期阻断p38MAPK的表达,可能会阻止正常植入,达到避孕的目的;若能促使p38MAPK在植入期正常表达,则会为不孕症的治疗提供新的思路。p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯【参考文献】p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达p38丝裂原活化蛋白激酶在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达作者:于清梅,武玉玲,宋海岩,尹华伟,庄园单位:山东医学高等专科学校组织胚胎学教研室, 山东 临沂【摘要】 目的 检测p38MAPK在小鼠不同发育阶段胚胎和围植入期子宫内膜的表达。方法 取小鼠早期代绽线扼闹急炽仪各坞堑廉淄萍己悯嗽堕逾团阳葵湘陌属袭袱若碾窘丑品城迷农囊纺蔗刑靖制缮昧诉院邯缴稽集用狐日竟震厨拨莲解弓捂填群讶疯 1Ono K, Han J. The p38 signal transduction pathway: activation and functionJ. Cell Signal, 2000, 12(1):113.2Madan P, Calder M D, Watson A J. Mitogenactivated protein kinase (MAPK) blockade of bovine preimplantation embryogenesis requires inhibition of both p38 and extracellular signalregulated kinase (ERK) pathwaysJ. Reproduction , 2005, 130(1):4151.3Pearson G, Robinson F, Beers G T, et al. Mitogenactivated protein (MAP) kinase pathways: regulation and physiological functionsJ. Endocr Rev, 2001, 22(2):153183.4Kyriakis J M, Avruch J. Mammalian mitogenactivated protein kinase signal transduction pathways activated by stress and inflammationJ. Physiol Reviews, 2001, 81(2):807869.5Natale D R, Paliga A J, Beier F, et al. p38 MAPK signaling during murine preimplantation developmentJ. Dev Biol, 2004, 268(1):7688.6Paliga A J, Natale D R, Watson A J, et al. P38 mitogen activated protein kinase (MAPK) first regulates filamentous actin at the 816 cell stage during preimplantation developmentJ. 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