质谱法测青霉素钠

质谱法测青霉素钠,主讲:王辉,中心实验室,TEL实验目的了解质谱的基本结构及其各部件的性能了解质谱的原理及其应用初步掌握质谱控制软件 Analyst的基本使用学会用质谱法测青霉素钠,二. 仪器结构(重点),离子源种类:,EI(Electron Impact Ionization):电子轰击电离硬电离。 CI(Chemical Ionization):化学电离核心是质子转移。 FD(Field Desorption):场解吸目前基本被FAB取代。FAB(Fast Atom Bombardment):快原子轰击或者铯离子 (LSIMS,液体二次离子质谱 ) 。 ESI(Electrospray Ionization):电喷雾电离属最软的电离方式。 APCI(Atmospheric Pressure Chemical Ionization):大气压化学电离同上，更适宜做小分子。APPI(Atmospheric Pressure PhotoSpray Ionization):大气压光喷雾电离同上，更适宜做非极性分子。 MALDI(Matrix Assisted Laser Desorption):基质辅助激光解吸电离。,质谱分类,质谱(用途),同位素质谱,生物质谱,按质量分析器可分为,飞行时间质谱,四极杆质谱,离子阱质谱,磁质谱,有机质谱,无机质谱,三、质谱基础知识,1.概念质谱 (重要)质谱法 (重要)质谱仪 (重要)质谱图 离子的强度（丰度）：百分强度、基峰强度总离子流图、质量色谱图 分子离子 、碎片离子 (重要),2.仪器性能指标,(1)质量范围：仪器所能测量的离子质荷比范围。(2)分辨率：仪器分离质量数为m1,m2的相邻质谱 峰的能力。(3)灵敏度：用一定质量的某样品在一定条件下，产生该样品分子离子峰的信噪比（s/n）。,3.基本原理(了解),动画,动画,4.特点,优点(重点):(1)定分子量准确(2)灵敏度高(3)快速(4)便于混合物分析(5)多功能，广泛适用于各类化合物,局限性:(1)异构体，立体化学方面区分能力差。(2)重复性稍差，要严格控制操作条件，须专人操作.(3)有离子源产生的记忆效应，污染等问题。(4)价格稍显昂贵，操作有点复杂。,5.应用,(1)有机化工a.合成中原料及产品杂质分析LC/MSb.中间步骤监测c.反应机理的研究(2)石油(3)环保a.农药残毒检测b.大气污染c.水分析d.特定成分定量测定(4)食品、香料a.酒：判断真酒假酒，有无害。b.化妆品 (5)生化、医药a.蛋白质，多肽研究，前沿生命科学。b.天然产物. (6)法医、毒化,四实验步骤,1 仪器的启动(1) 检查气表盘有无漏气，各路气的压力。 检查液氮罐浮子的高度，看液氮是否充足，压 力是否正常。 检查不间断电源（UPS），应处在逆变状态。(2) 开空气压缩机； 开机械泵； 15分钟后，开质谱主机,2 运行条件(1) 真空度要求：0.6-0.810-5Torr(2) 质量校准： a. 正离子用稀释10倍的 ppg标准溶液校准； b负离子用ppg 3000标准溶液校准。3. 进样方式 两种进样方式：针泵，液质联用。,4.质谱法测青霉素钠,(1) 溶液配制,其化学名为：(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-(2-苯乙酰氨基)7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环3.2.0庚烷-2-甲酸钠盐。分子式：C16H17N2NaO4S分子量：356.38,(2) 质谱控制软件Analyst的基本使用：,Project,(3).Q1 scan 确定母离子,思考题（1）. 质谱仪有哪几部分组成，各部分的主要功能？（2）为什么实验过程中要维持高真空？（3）. 离子源作用是什么，说出几种常见的离子源？（4）. 质量分析器的种类，四极杆质量分析器的原理是什么？（5）. 质谱仪有哪些应用？,中文参考书:色谱联用技术化学工业出版社，2001 药物分析化学工业出版社，2003 生物质谱技术与方法科学出版社，2003有机质谱原理及应用科学出版社，2001分析化学手册(九)-质谱分析化学工业出版社，2000肿瘤蛋白质组学湖南科学技术出版社，2002现代药物分析选论中国医药科技出版社，2001有机化合物的结构鉴定与有机波谱学科学出版社，2000现代有机质谱技术及应用中国人民公安大学出版社，1999中草药现代研究-仪器分析卷北