(ppt)组织学与胚胎学教学课件西安交通大学医学院人体解剖与组

1,组织学 与胚胎学 教学课件西 安 交 通 大 学 医 学 院人体解剖与组织胚胎学系,2,Dr. Jinsong Zhou绪论(Introduction) I. 什么是组织学(Histology)?组织学是研究人体正常细微结构及其相关功能的科学。A. 微观结构: 1. 光学显微镜(Light microscope，LM): 计量单位是微米( m )。(1 m =0.001 mm) 。2. 电子显微镜(Electron microscope，EM): 计量单位是纳米(nm )。(1 nm =0.001 m) 。,3,光学显微镜基本结构：1. 照明灯(Lamp)2. 聚光器(Condenser)3. 载物台和切片夹(Mechanical stage and specimen retainer)4. 推进器(Mechanical stage adjustment knob)5. 物镜(Objectives)6. 粗细螺旋(Course and fine focus knob)7. 目镜(Oculars)8. 照相机等接口(Connection to camera, etc.),4,B. 相关功能: 微观结构和其功能相适应，反之亦然。C. 人体结构的4个层次:1. 细胞(Cell): 人体结构的基本结构和功能单位。2. 组织(Tissue): 由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基本组织：上皮组织，结缔组织，肌组织和神经组织。3. 器官(Organ): 由组织有机地结合起来而构成。4. 系统(System): 由结构相似且功能相关的器官构成。,5,II. 为什么要学习组织学?1. 组织学又叫微观解剖学(Microanatomy)，是解剖学知识的进一步完善。2. 结构是功能的基础，学好组织学是学好生理学(Physiology)的基础。3. 只有了解正常结构，才能学习其异常变化。因此组织学是病理学(Pathology)的基础。4. 组织学成绩不及格，必须补考，重修和留级。,6,III. 怎样学习组织学?A. LM技术:分辨率(Resolution)是指能够分辨相邻两点之间的最小距离。LM的分辨率约为200m。1. 切片(Section): 将组织切薄使光线可以透过。a. 固定(Fixation): 为保存新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸，Bouins 液或Zenkers液等固定剂中。,7,b. 石蜡包埋(Paraffin embedding):* 脱水(Dehydration): 用浓度逐渐升高的酒精 (70100%)将组织中的水完全置换出来。* 透明(Clearing): 用二甲苯完全置换出酒精。* 浸蜡(Infiltration): 在6062C时，用液态石蜡完全置换出二甲苯。室温时石蜡凝固成固态，内含待切组织。,8,c. 切片: 用切片机将组织切成120m厚的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。,9,除切片外，还有其他处理组织的方法：* 铺片(Whole mount): 用于很薄的组织，如肠系膜。* 磨片(Ground section): 用于很坚硬的组织，如骨和牙。* 涂片(Smear): 用于液态组织，如血液，精液和唾液。,10,2. 染色(Staining): 染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料是水溶性的。,11,a. 最常用的染料是苏木素(Hematoxylin, H)和伊红(Eosin, E)。* 苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性(Basophilic)。,12,* 伊红是酸性染料，粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性(Acidophilic)。* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。,13,肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色b. 如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有异染性(Metachromasia)。c. 如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。,14,网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。,15,H&E染色的中等动静脉d. 不同的染色方法，其结果不同。,16,醛复红染色的中等动静脉,17,在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶封片，以便长期保存。* 切片: 固定 梯度酒精 二甲苯 石蜡。* 染色: 石蜡 二甲苯梯度酒精 水。* 保存: 水 梯度酒精 二甲苯中性树胶。,18,B. EM技术:1. EM可分为透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)2类。 2. EM的原理和LM相似，但用电子束代替光线，磁场代替玻璃透镜。分辨率约为0.2 nm。,19,3. EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同:a. 通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。b. 切片超薄 (厚度小于90nm)，塑胶包埋。c. 用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有 原始的电镜图片都是黑白的。,20,SEM显示巨噬细胞表面,21,TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。,22,C. 特殊的染色方法:1. 组织化学(Histochemistry, 细胞化学)法: 通过生物化学的 方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示 微细结构的位置，然后用显微镜观察。 PAS 反应: 用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodic acid )将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后用无色亚硫酸品红( Schiff试剂) 还原戊二醛形成紫红色沉淀。,23,肝脏的PAS染色,24,2. 免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法:a. 待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen)，通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合，然后显示标记物，在原位产生不溶有色的反应产物，最后用显微镜观察。,25,b. 2种基本染色法: * 直接法: 第一抗体被标记。* 间接法: 第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因为信号被放大，因此更加敏感。3. 放射自显影(Autoradiography):