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文档简介
专题2 课题1 课前预习 巧设计 名师课堂 一点通 重点突破 创新演练 大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解培养基的种类 营养要素 配制原则理解微生物培养过程中的无菌操作 接种操作要求 无菌技术的操作 1 概念人们按照微生物对的不同需求 配制出供其生长繁殖的 2 种类 按照培养基的物理性质划分 1 液体培养基 配制成的状态的基质 2 固体培养基 配制成的状态的基质 是实验室中最常用的培养基之一 微生物在其上面生长 可形成肉眼可见的 营养物质 营养基质 液体 固体 菌落 3 营养要素各种培养基的具体配方不同 但一般都含有 此外培养基还需要满足微生物生长对ph 以及的需求 水 碳源 氮源 无机盐 特殊营养物质 氧气 二 无菌技术1 避免杂菌污染的措施 1 对实验操作的空间 操作者的衣着和手进行和 2 将用于微生物培养的 和等器具进行灭菌 3 为避免周围环境中微生物的污染 实验操作应在附近进行 4 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触 清洁 消毒 器皿 接种用具 培养基 酒精灯 火焰 周围的物 品 2 消毒和灭菌 1 消毒 概念 使用的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体 不包括芽孢和孢子 常用方法 消毒法 消毒法 消毒法 2 灭菌 概念 使用的理化因素杀死的微生物 包括芽孢和孢子 常用方法 灭菌 灭菌 灭菌 较为温和 有害的微生物 煮沸 巴氏 化学药品 强烈 物体内外所有 灼烧 干热 高压蒸汽 三 分离纯化大肠杆菌的实验操作1 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 2 纯化大肠杆菌微生物接种的最常用方法是和 1 平板划线法 通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作 将聚集的菌种逐步到培养基的表面 2 稀释涂布平板法 将菌液进行一系列的 然后将不同稀释度的菌液分别到琼脂固体培养基的表面 进行培养 平板划线法 稀释涂布平板 法 连续 划线 稀释分散 梯度稀释 涂布 3 结果分析 1 如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色 形状 大小基本一致 说明操作符合要求 2 若培养基上出现了其他菌落 则说明接种过程中被 3 未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若 则说明灭菌不彻底 实验失败 接种 杂菌污染 长出菌落 四 菌种保存1 临时保藏法适用于使用的菌种 1 过程 将菌种接种到试管的培养基上 合适温度下培养 保藏 菌落长成后 放于冰箱中 转移 每隔3 6个月 将菌种从旧的培养基上转移到的培养基上 2 缺点 菌种容易被或产生 2 菌种的长期保存对于需要长期保存的菌种 可采用的方法 固体斜面 频繁 4 新鲜 污染 变异 甘油管藏 1 读教材p14 基础知识 培养基 归纳并回答下列问题 1 微生物营养要素有哪些 碳源的主要来源有哪些 提示 各种培养基的具体配方不同 但一般都含有水 碳源 氮源 无机盐和生长因子 主要来源 无机化合物有co2 na2co3等 有机化合物有糖类 脂肪酸 花生饼 石油等 2 结合微生物物质组成分析碳源 氮源 生长因子在微生物体内有哪些作用 完成下表 2 读教材p15 无菌技术 的相关内容 归纳并回答下列问题 1 实验室常用的消毒 灭菌方法有哪些 提示 2 试从消毒 灭菌的条件和结果方面进行比较分析二者的区别并填写下表 3 读教材p16 实验操作 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基相关内容 思考并讨论下列问题 1 分析配制培养基之前 对所需要的各种营养物质要计算称量的原因 提示 保证培养基中的各种营养物质比例协调 有利于微生物的生长 2 在配制培养基时 各组分溶化后是否立即进行灭菌 为什么 提示 配制的培养基除满足微生物的营养物质需求外 还需满足微生物对ph 氧气等的要求 所以培养基各组分溶化后需调ph后再进行灭菌 3 倒平板时 应注意哪些问题 提示 培养基灭菌后 需冷却至50 左右时才能倒平板 整个操作在酒精灯火焰旁进行 倒平板时 培养基若溅到培养皿盖和皿底之间的部位 该平板应丢弃 平板冷凝后要倒置 4 平板划线操作时 需要对接种环灼烧灭菌 填表比较下列灼烧灭菌的目的 4 读教材p20 结果分析与评价 内容 根据你自己的实验操作 分析交流下列问题 1 如何判断培养基的制作是否合格 提示 将未接种的培养基在恒温箱中保温1 2d 无菌落生长 说明培养基制备成功 2 如何判断接种操作是否符合无菌要求 提示 根据培养基上生长出的菌落的颜色 形状 大小等特征判断 若菌落特征符合大肠杆菌的特点 则说明接种操作符合要求 若培养基上出现了其他菌落 则说明接种过程中 无菌操作未达到要求 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验 实验包括制备培养基 灭菌 接种及培养 菌落观察计数 请回答与此实验相关的问题 1 培养基中含有的蛋白胨 淀粉分别为细菌培养提供了 和 除此之外 培养基还必须含有的基本成分是 和 2 对培养基进行灭菌 应该采用的方法是 3 为了尽快观察到细菌培养的实验结果 应将接种了湖水样品的平板置于 中培养 培养的温度设定在37 要使该实验所得结果可靠 还应该同时在另一平板上接种 作为对照实验 4 培养20小时后 观察到平板上有形态和颜色不同的菌落 这说明湖水样品中有 种细菌 一般说来 菌落总数越多 湖水遭受细菌污染的程度越 5 如果提高培养基中nacl的浓度 可以用于筛选耐 细菌 这种培养基被称为 解析 1 蛋白胨可提供碳源 氮源 维生素 而淀粉可提供碳源 除此之外 微生物的生长还需无机盐和水 2 对培养基的灭菌 在实验室内常用高压蒸汽灭菌法 3 在实验的过程中 除实验变量以外其他各变量均应适宜且相同 以利于更好的实现实验目的 4 不同的菌落具有各自的菌落特征 如硬度 颜色 透明度 光滑度等 5 培养基中加入某种化学物质 以抑制不需要的微生物的生长 促进所需要的微生物的生长 称为选择培养基 可以培养 分离出特定微生物 答案 1 氮源 碳源不作要求 碳源无机盐水 2 高压蒸汽灭菌 3 恒温培养箱无菌水 4 多高 5 盐 或nacl 选择培养基 微生物的培养和应用相关题目的解题策略对于有关微生物的培养和应用的题目 在解答时应注意从以下几个方面把握 1 培养基的营养构成 包括碳源 氮源 无机盐和水以及生长因子 其中各种成分由哪种有机物提供应根据其化学元素组成来推断 2 无菌操作技术 区别消毒和灭菌 以及各自常用的方法和优点 3 在实验过程中 必须设置对照实验 明确设置对照的方法 培养基 培养皿 接种环 实验操作者的双手 空气 牛奶所采用的灭菌 消毒方法依次是 化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌
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