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文档简介

1 DNA粗提取与鉴定 2 学习目标知识目标1 通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取 了解DNA的物理化学性质 2 理解DNA粗提取与鉴定的原理 能力目标掌握DNA粗提取及鉴定方法 能利用DNA的性质进行实验设计和操作 态度观念目标通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作 锻炼科学的思维方法 培养实事求是的科学态度 3 1 鸡血细胞做实验材料 一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富 材料易得 二是鸡血细胞极易吸水胀破 2 DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 3 嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶 其作用是分解蛋白质 使提取出的DNA纯度较高4 预冷的乙醇溶液具有以下优点 一是抑制核酸水解酶活性 防止DNA降解 二是降低分子运动 易于形成沉淀析出 三是低温有利于增加DNA分子柔韧性 减少断裂 5 洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁 破坏细胞膜 同时也能使蛋白质变性 6 在60 75度条件下加温处理 蛋白质变性 而DNA结构不会受到破坏 提取纯度较高的DNA7 甲基绿能使DNA染成绿色 4 根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案 方案一 30mL含DNA的滤液 2mol LNaCl 同方向搅拌 DNA溶解 加入蒸馏水 DNA析出 过滤得到过滤物 放到2mol LNaCl溶液中溶解 DNA NaCl溶解液方案二 30mL滤液 嫩肉粉 木瓜蛋白酶 静置10 15分钟 DNA滤液方案三 30mL滤液 60 75 恒温保温10 15分钟 过滤获得DNA滤液 5 两种材料的DNA粗提取与鉴定过程 以鸡血为材料以花菜为材料 释放组织细胞中的DNA 粗提取DNA 将粗提取的DNA进一步纯化 鉴定提取物是DNA 6 7 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 8 2mol L 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 9 5 过滤 取纱布上的滤物 纱布过滤 6 再次溶解DNA 2mol LNaCl溶液 取滤物 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 10 7 加冷酒精使DNA析出 纯化 冷酒精 鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图 11 DNA的鉴定 12 总结 13 1 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是A 氯化钠的浓度越低 对DNA的溶解度越大B 人血也可代替鸡血进行实验C 柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D DNA不能溶于酒精2 在破碎鸡血细胞时 要先加入20ml的蒸馏水 其作用是A DNA溶解于水B 血细胞破裂 DNA释放C 稀释血液 防止凝固D 有利于搅拌3 若选择的实验材料为植物细胞 破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐 加入食盐的目的是A 利于DNA的溶解B 分离DNA和蛋白质C 溶解细胞膜D 溶解蛋白质4 在DNA粗提取实验中 向在溶解DNA的NaCl溶液中
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