苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析

.,第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析,.,基本要求,一、掌握苯乙胺类拟肾上腺类药物的结构和性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。二、熟悉主要苯乙胺类拟肾上腺素药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度三、了解影响苯乙胺类拟肾上腺素药物稳定性的主要因素、体内样品与临床监测方法,.,第一节结构与性质,一、基本结构与典型药物,R1CHCHNHR2HXOHR3,*,拟肾上腺素类,.,*,.,.,.,.,盐酸克仑特罗,无酚羟基,.,盐酸麻黄碱,.,弱碱性,酚羟基特性,芳伯氨基特性,紫外吸收,光学活性,化学性质,烃氨基侧链为仲胺氮，显弱碱性邻苯二酚/酚羟基，FeCl3反应，易氧化手性碳原子，具有旋光性盐酸克仑特罗苯环,二、主要理化性质,.,一、与铁盐的反应,Ar-OHFeCl3,络合显色多为绿色,紫色/紫红色,碱液,详见P224,第二节鉴别试验,.,二、与甲醛硫酸反应在此试剂中形成醌式结构而显色,.,具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色,三、还原性反应,酸性下：,重酒石酸去甲肾上腺素,.,pH3.56酒石酸氢钾饱和溶液,肾上腺素盐酸异丙肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素,I25,Na2S2O3,深红棕,紫色,无色/微红/淡紫,互相区分,.,四、双缩脲反应是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄碱，盐酸去氧肾上腺素鉴别,盐酸麻黄碱,蓝紫色,乙醚,+CuSO4+NaOH,醚层(紫红色),盐酸去氧肾上腺素紫色无色,.,五、吸收光谱特征,例如：盐酸异丙肾上腺素0.05mg/mlmax=280nmA=0.50详见P226,.,一、酮体检查本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。,第三节特殊杂质与检查,.,肾上腺素酮,.,220260300nm,肾上腺素及肾上腺素酮的紫外吸收曲线,max310nm,310nm处，肾上腺素无吸收，酮体有吸收,.,采用UV法检查：利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素配2.0mg/ml=310nmA0.05盐酸去氧肾上腺素配2.0mg/ml=310nmA0.20重酒石酸去甲肾上腺素配2.0mg/ml=310nmA0.05,.,二、有关物质的检查,盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇TLC盐酸苯乙双胍PC其他HPLC,.,第四节含量测定,非水溶剂的种类：酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强相对碱度，如冰醋酸碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强相对酸度，如二甲基甲酰胺两性溶剂：具有酸、碱性能，如methanol惰性溶剂：没有酸、碱性的溶剂，丙酮、氯仿,弱碱性,.,(一)基本原理,当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。,BH+A-,+,HClO4,BH+ClO4,+,HA,游离碱类盐,被置换出的弱酸,因此，要根据不同情况采用相应测定条件,.,(二)一般方法,供试品,+,冰醋酸,10ml-30ml,若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml-5ml,结果,高氯酸滴定液,以空白试验校正,.,(三)问题讨论1.适用范围:pKb8的有机弱碱及其盐类的含量测定pKb为813的弱碱性杂环类药物，可采用本法采用合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法药物pKb为810时，选冰醋酸作为溶剂为1012时，选冰醋酸与醋酐的混合溶液12时，应用醋酐作为溶剂,.,比醋酸合质子的酸性更强，可增强药物的碱性,2(CH3CO)2O,(CH3CO)3O+CH3COO-,醋酐合乙酰氧离子,在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。,.,2.酸根的影响冰醋酸中的酸性:HClO4HBrH2SO4HClHSO4-HNO3当被置换出的酸的酸性较强，则此置换反应无法定量完成。盐酸盐的酸性较强，因此滴定前预先加入醋酸汞与氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的卤化汞，从而消除氢卤酸对滴定反应的不良影响。,.,3.滴定剂的稳定性溶剂冰醋酸具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用公式加以校正,0.0011：冰醋酸的体积膨胀系数,温差超过10时，应重新标定,.,4.终点指示方法常用电位法和指示剂法。电位法：玻璃电极为指示电极饱和甘汞电极为参比电极指示剂：结晶紫（crystalviolet，CV）碱性酸性紫、蓝、蓝绿、绿、黄绿、黄,.,在滴定不同强度的碱时，终点颜色变化不同。较强的碱应以蓝色或天蓝色为终点；较弱的碱应以黄绿色或黄色为终点。最好以电位滴定法作对照，以确定终点的颜色。同时应作空白试验以减少滴定终点误差。,N能键合多个质子，表现为多元碱,.,非水滴定法测定有机碱含量的优点1在水中难以溶解或易发生水解的有机碱及其盐类，都可按非水法测定2由于有机溶剂的电离常数低，用于少量样品的滴定也有明显的终点3方法简便、快速，样品取量少，结果也较准确,.,本类药物的原料药多采用此法。1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定相当于B的有机酸盐，可直接滴定2.盐酸异丙肾上腺素的测定相当于B的盐酸盐，不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定3.硫酸沙丁胺醇的测定相当于B的H2SO4盐，可直接滴定至其硫酸氢盐，加醋酐提高碱性,.,二、溴量法适用：重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素,基本原理：具苯酚结构，酚羟基的邻对位H为活泼H，能与过量的溴定量发生溴代反应,剩余,定、过量,3,结果用空白试验进行校正,.,三、UV与比色法1.UV：结构中苯环具有紫外吸收2.比色法：利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，如：盐酸克仑特罗栓利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe2络合显色，进行比色测定，如：盐酸异丙肾上腺素注射液、盐酸多巴胺注射液四、HPLC肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液等,.,动物组织中盐酸克仑特罗的GC-MS测定,2009,瘦肉精事件,2011年，央视315特别行动“健美猪”真相曝光双汇子公司收购含“瘦肉精”猪肉,第五节体内药物分析,.,盐酸克仑特罗平喘药非兽药非饲料添加剂,使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。中毒：肌肉颤动、心悸、心律失常、心动过速,.,检测方法,GC-MS,HPLC,HPLC-MS/MS,色谱高效快速分离