《药理学实验V》PPT课件

药理实验,同济大学医学生,2,基本操作训练,（一）实验要求1、实验课重要性及要求：掌握基本技能，验证药理学中重要的基本理论、基本知识。培养严谨的态度、严密的工作方法和实事求是的工作作风；培养对事物观察、比较、分析的能力和综合解决实际问题的能力；培养创新意识。,3,2、实验过程具体要求：包括实验前、实验中、实验后。3、实验报告要求：要求：科学性真实记录，不可涂改；严密性层次分明艺术性字法，句法，章法内容：实验题目、实验目的、实验方法、实验结果、讨论、结论,4,（二）基本操作小白鼠捉持法、灌胃法、皮下注射法、肌肉注射法、腹腔注射法、处死法。,5,药物剂型介绍,分为四大类1、液体剂型2、软膏剂型3、固体剂型4、气雾剂,6,戊巴比妥钠半数有效量的测定操作步骤：1取鼠10、分5组、称重2分别给药，戊巴比妥钠349、39、31、25、20mg/kg4记录15分钟内入睡鼠数5实验室同剂量组合并求P，计算ED506ED50=lg-1Xm-i(P-0.5),7,有关知识：测定LD50、ED50的意义粗略估计药物安全性的重要常数TI=LD50/ED50安全范围，一般指ED95LD5之间的距离，更精确点，指ED99LD1之间的距离,8,药物血浆半衰期（t1/2）的测定一有关知识血浆半衰期（t1/2），血药浓度下降一半所需要的时间二操作步骤1取兔称重麻醉20%乌拉坦5ml/kg（或戊巴比妥钠1.5ml/kg）2血液抗凝处理0.3%肝素ml/kg3仰位固定，分离颈动脉，扎夹远近心端4颈动脉插管，取空白动脉血ml5注射SD（1.5ml/kg），取，分钟血ml6严格按P6表格操作，计算t1/2,9,注意事项：勿忘抗凝步骤；给药后均补入0.3毫升生理盐水；给药后取血时，先放血约0.3毫升；三氯乙酸加入血样后应立即震荡！SD给药液与SD标准液勿混淆；6加样顺序、加样量要正确！,10,乙酰胆碱的量效曲线及药物pD2、pA2测定一有关知识pD2（亲和力指数）：引起50最大效应时，药物摩尔浓度的负对数值。pA2（拮抗参数）：使加倍浓度的激动剂仅引起原浓度的效应水平时，拮抗剂摩尔浓度的负对数值。,11,操作步骤：1取豚鼠处死、剖腹取回肠2清洗分离、剪成1.5cm左右长数段3进行计算机Medlab系统参数设置4取肠段对角结扎，一端挂钩、一端连换能器5平衡10分钟后，预刺激（Ach3x10-3M,0.1ml),换液3次，每次平衡5分钟6记录正常回肠收缩曲线7按表依次加入不同浓度乙酰胆碱液迅速！8洗肠3次、平衡10分钟，加入阿托品液0.3毫升9平衡5分钟后按表P9重复加入不同浓度乙酰胆碱液10绘制乙酰胆碱量效曲线图PD2=q-lgA;pA2=pAx+lg(x-1),12,注意事项：1悬挂肠段不要过度牵拉（控制在1克左右）；2实验开始后不能再改变肠管的负荷！3加药时勿碰连线及管壁；4药物剂量加入要注意连续累积性；5浴管内温度要恒温（低于38度）！,13,强心苷对离体蟾蜍心脏的作用有关知识:强心苷可1加强心肌收缩性;2减慢窦性频率强心机理抑制钠钾ATP酶,钠钾交换受抑钠钙交换增加,14,操作步骤:制备蟾心;处死,分离心脏;穿线二,插管;结扎,取出夹上加入任氏液约1毫升,夹心尖,连接Medlab生物信号系统,描记正常曲线I换入低钙任氏液约1毫升,描记低钙曲线II滴加夹竹桃3滴+3滴,描记强心曲线III滴加夹竹桃直至中毒,描记中毒曲线IV6换洗三次,观测心脏功能恢复情况及曲线,15,吗啡的镇痛作用【有关知识】吗啡镇痛作用机制吗啡(+)阿片R(、R)镇痛、致幻吗啡成瘾后的戒断症状：a.兴奋,失眠,疼痛,震颤b.流泪,涕,呕,泻,出汗c.一种说不出来的难受感觉,16,【操作步骤】予试验小鼠2只，后爪SC2福尔马林20l,间隔5分钟累积，观察30分钟内连续舔足时间正式试验生理盐水组6只小鼠，SCNS(0.1ml/10g),5分钟后：后爪SC2福尔马林20l,记录5分钟内连续舔足时间,17,吗啡组6只小鼠，SC0.02%盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后后爪SC2福尔马林20l,记录5分钟内连续舔足时间吗啡纳洛酮组6只小鼠，IP0.01%纳洛酮(0.1ml/10g)，5分钟后,SC0.02%盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后,后爪SC2福尔马林20l,记录5分钟内连续舔足时间,18,【注意事项】1保持安静，以免影响小鼠的痛觉行为；2注射福尔马林时角度不要太大，进针不要太深；3应预先熟悉秒表的使用方法，以免错过记录时间。,19,利多卡因对氯化钡诱发家兔心律失常的预防作用【有关知识】利多卡因药理作用1降低异位自律性；2影响传导：已有阻滞之，致传导抑制钠离子内流部分除极之，致传导促进钾离子外流,20,【操作步骤】A1取甲兔、称重；B1取乙兔，同左2麻醉(iv2%戊巴比妥钠1.5ml/kg)2同左3缓慢iv2%利多卡因0.5ml/kg，5后3ivNS，同左4iv0.4%BaCl20.8ml/kg4同左5记录01、3、5、10、15、5同左20、30心电图6统计心律失常出现时间、持续时间6同左,21,【注意事项】1利多卡因静脉注射速度要慢，以免诱发惊厥;2氯化钡静脉注射速度要快；3每次给药后补入0.5ml生理盐水,22,苯巴比妥和苯妥英钠的抗电惊厥作用【有关知识】苯巴比妥抑制病灶神经元异常放电及其扩散，主要用于癫痫大发作及其持续状态苯妥英钠阻止病灶异常放电向正常脑组织扩散，降低细胞膜对钠离子、钙离子的通透性，抑制PTP形成。主要用于1大发作、精神运动性发作首选2三叉神经痛、舌咽神经痛3心律失常（室性）,23,【操作步骤】设定条件：电压100V。方式：单次，A频率2Hz，B时间1S选择电惊厥阳性鼠6只，称重后分3组；甲、乙、丙组分别IPNS、苯巴比妥、苯妥英钠剂量均为0.1ml/10g30分钟后，原条件再给予电刺激，记录强直性屈曲、伸展等的持续时间,24,【注意事项】小鼠电惊厥指标：前肢屈曲、后腿伸直；鳄鱼夹需沾生理盐水，以利导电；3用药前后小鼠电刺激条件要一致。,25,地西半的抗药物惊厥作用【有关知识】地西半作用机制BZ类药（）BZ受体促进GABA与相应受体结合，增加Cl通道开放频率,Cl内流，超极化，抑制性效应作用用途抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥抗癫痫、中枢性肌松印防己毒素1(+)脑干呼吸中枢；2中毒量致阵挛性惊厥解除中枢以GABA为介质的运动神经突触前抑制，从而取消了限制中枢兴奋泛发传播的自身调节机制导致惊厥。,26,【操作步骤】1取鼠4只分2组；2甲组IPNS，乙鼠IP地西半，剂量均为0.05ml/10g；330分钟后，IP印防己毒素0.15%0.05ml/10g；4比较，记录惊厥发生时间,27,【注意事项】1腹腔注射应注意穿刺部位和深度；2注射时避免药液外漏；3观察药物惊厥现象时可给予触动刺激。,28,有机磷农药中毒及药物治疗有关知识:1中毒机理有机磷酸酯+胆碱酯酶磷酰化胆碱酯酶（Ach蓄积)2中毒表现3解毒机理阿托品M受体阻断氯解磷定+磷酰化胆碱酯酶磷酰化解磷定+胆碱酯酶,29,操作步骤:1取兔,称重,记录正常指标;瞳孔,唾液,二便,肌震颤2灌胃6%敌百虫6ml/kg,记时观察;3中毒明显时,耳缘i.v.阿托品0.05%3ml/kg;4i.m.氯解磷定0.5ml/kg,观察,30,注意事项:1灌药后,补入适量生理盐水;2灌药前,阿托品及解磷定予先抽好备用;3敌百虫灌药40分钟后不出现症状可补适量.,31,传出神经系统药物对家兔血压的影响,实验目的1、观察拟肾上腺素药肾上腺素、去甲肾上腺素与异丙肾上腺素对心血管作用的不同。2、观察应用-肾上腺素能受体阻断剂酚妥拉明后拟肾上腺素药物对血压的影响。3、观察应用-肾上腺素能受体阻断剂心得安后拟肾上腺素药物对血压的影响。,32,相关知识1、Adr：（+）1、1、22、NA：（+）1、显弱13、ISO：（+）1、24、酚妥拉明：（-）1、15、心得安：（-）1、2,33,操作步骤连接检压装置（压力换能装置）套管系统充满肝素生理盐水取兔称重、麻醉2%戊巴比妥钠30mg/kg耳缘iv（缓慢）仰卧、固定、剪去颈毛切开颈部皮肤、分离出气管及颈动脉,34,气管切开