标准解读
《GB/T 35806-2018 动物流感检测 H7N9亚型流感病毒双重荧光RT-PCR检测方法》是一项国家标准,旨在规范H7N9亚型动物流感病毒的检测流程。该标准详细描述了使用双重荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术来检测H7N9亚型流感病毒的具体步骤和技术要求。
首先,标准明确了适用范围,适用于禽类等动物样本中H7N9亚型流感病毒核酸的定性检测。接着,对所需材料进行了规定,包括但不限于引物、探针、阳性对照品、阴性对照品以及内参基因等,并指出了这些材料的质量控制要求。
在操作程序部分,标准详述了从样品采集到最终结果分析的全过程。这包括样本处理方式、RNA提取方法、逆转录条件设定、PCR扩增参数设置等关键环节。特别强调了实验过程中需要注意的安全防护措施及避免污染的重要性。
此外,《GB/T 35806-2018》还提供了如何解读和报告检测结果的具体指导原则。例如,根据Ct值大小判断样本是否为阳性;当出现异常情况时应采取何种补救措施等。同时,也提出了质量保证体系建立的要求,确保实验室能够持续稳定地提供准确可靠的检测服务。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2018-02-06 颁布
- 2018-09-01 实施
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文档简介
ICS11220 B41 . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T358062018 动物流感检测 H7N9亚型流感病毒 双重荧光 RT-PCR 检测方法 AnimalinfluenzadetectionProtocolofduplexreal-timeRT-PCR forinfluenzavirussubtypesH7andN92018-02-06发布 2018-09-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布 中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准动物流感检测 H7N9亚型流感病毒 双重荧光 RT-PCR 检测方法 GB/T358062018 * 中 国 标 准 出 版 社 出 版 发 行北京市朝阳区和平里西街甲 号 2 (100029) 北京市西城区三里河北街 号 16 (100045) 网址 : 服务热线 :400-168-0010 年 月第一版 2018 2 * 书号 :1550661-59180 版权专有 侵权必究 GB/T358062018 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。 本标准由农业部提出 。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会 归口 (SAC/TC181) 。 本标准起草单位 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 中国出入境检验检疫协会 中国农业 : 、 、科学院哈尔滨兽医研究所 中国检验检疫科学研究院 、 。 本标准主要起草人 蒲静 高志强 汪琳 乔彩霞 张锡全 周琦 张鹤晓 张伟 尹羿 柏亚铎 刘艳华 : 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、刘环 王秀荣 包红梅 韩雪清 王慧煜 、 、 、 、 。 GB/T358062018 动物流感检测 H7N9亚型流感病毒 双重荧光 RT-PCR 检测方法1 范围 本标准规 定 了 同 时 检 测 和 亚 型 动 物 流 感 病 毒 核 酸 的 双 重 荧 光 操 作 H7 N9 TaqMan RT-PCR 方法 。 本标准适用于 和 亚型动物流感病毒核酸的快速检测和筛查 H7 N9 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 禽流感病毒通用荧光 检测方法 GB/T19438.12004 RT-PCR 实验室 生物安全通用要求 GB19489 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件 。 或 值 每个反应管内的荧光信号量达到设定的阈值所经历的循环数 Ct( Cp) : (ThresholdCycle,orCrossingPoint) 焦碳酸二乙酯 DEPC: (Diethypyrocarbonate) 羧基荧光素 FAM: (Carboxyfluorescein) 血凝素 HA: (Hemagglutinin) 六氯 甲基荧光素 HEX: -6- (Hexachlorofluorescein) 小沟结合物 MGB: (MinorGrooveBinder) 神经氨酸酶 NA: (Neuraminidase) 羧基四甲基罗丹明 TAMRA: (Carboxytetramethylrhodamine) 荧光 实时荧光反转录聚合酶链反应 RT-PCR: (Real-timeRT-PCR)4 试剂和材料 41 试剂 . 411 总则 除另有说明 所用试剂均为分析纯 所用液体试剂均需使用无 酶的容器进行分装 . : , , RNA 。412
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