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文档简介

精益生产智能管理,HPLC测定蛋白质含量方法确认,发言人：程红波,日期：2016-3-15,1,方法确认（HPLC法）,目的：证明HPLC方法适合于重组人粒细胞刺激因子蛋白质含量检测要求依据：中国药典2015年版,2,洗脱梯度（2015年版中国药典）,按下表进行梯度洗脱,A：0.1%三氟乙酸的水溶液B：0.1%三氟乙酸的乙腈溶液,3,含量计算公式,供试品蛋白质含量（ug/ml)=,CRAXnX,ARnR,式中CR为复溶所得标准品溶液的蛋白质含量，ug/ml；AR为标准品溶液的平均峰面积；AX为供试品溶液的平均峰面积；nR为标准品溶液的稀释倍数；nX为供试品溶液的倍数；,4,方法比较（lowry与HPLC）,5,方法比较（lowry与HPLC）,结论：lowry法与HPLC法所测得的浓度存在一定的差异！,6,色谱图比较,工作标准品色谱图例,供试品色谱图例,25.757,25.688,7,重复性实验（出峰时间）,实验结论：RSD值1%，符合2015年版中国药典要求,8,重复性实验（峰面积）,实验结论：RSD值1%，符合2015年版中国药典要求,9,精密度实验（出峰时间）,实验结论：RSD值2%，符合2015年版中国药典要求,10,精密度实验（峰面积）,实验结论：RSD值2%，符合2015年版中国药典要求,11,1、通过对峰面积及出峰时间的计算对比，重复性实验RSD值均低于1%，精密度实验RSD值均低于2%，说明使用以上方法对赛格力成品及原液进行蛋白质含量测定的数据结果具备重复性、精密度2、符合2015年版高效液相色谱法验证要求3、通过对大量赛格力原液和成品的检测，说明该方法适用于我
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