革兰阳性需氧菌微.ppt

第十五章革兰阳性需氧杆菌第一节炭疽芽胞杆菌第二节蜡样芽胞杆菌第三节产单核细胞李斯特菌和红斑丹毒丝菌第四节阴道加特纳菌第五节棒状杆菌属第六节诺卡菌属属,第一节炭疽芽胞杆菌,炭疽芽胞杆菌是需氧芽胞杆菌中致病力最强的一种，引起人和动物炭疽病；可多途径传染，自然感染以皮肤炭疽为主，生物武器感染以吸入性感染为主；临床类型可分为皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽、脑膜炎型炭疽；病人最后死于败血症。炭疽病愈后可获持久免疫力。,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验五、耐药性检测六、其他七、结果分析及报告,返回,炭疽芽胞杆菌,第二节蜡样芽胞杆菌,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验五、耐药性检测六、结果分析及报告,返回,第三节产单核细胞李斯特菌和红斑丹毒丝菌,一、产单核细胞李斯特菌二、红斑丹毒丝菌,返回,第四节阴道加特纳菌,一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验五、耐药性检测六、结果分析及报告,返回,第五节棒状杆菌属,一、分类二、白喉棒状杆菌三、其他棒状杆菌,返回,第六节诺卡菌属和放线菌属,一、诺卡菌属二、放线菌属,返回,需氧芽胞杆菌属主要种类炭疽芽胞杆菌（B.anthracis）蜡样芽胞杆菌（B.cereus）蕈状芽胞杆菌（B.mycoides）巨大芽胞杆菌（B.mebateryum）苏云金芽胞杆菌（B.thuringiensis）嗜热脂肪芽胞杆菌,返回,传播途径：多途径临床类型：皮肤炭疽肺炭疽肠炭疽等,返回,细菌特性,返回,形态特征培养特性生化反应抗原性抵抗力,抗原构造,细菌性抗原（1）菌体多糖抗原（2）荚膜多肽抗原由质粒pOX2编码（3）芽胞抗原炭疽毒素由质粒pOX1编码（1）保护性抗原（PA）具有外毒素B片段功能能与靶组织结合（2）致死因子（LF）具有A片段功能（3）水肿因子（EF）发挥毒素效应,返回,（一）标本的采集与处理（二）检验程序（三）检验方法（四）鉴定试验（五）鉴别炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别要点,返回,标本采集,炭疽患者炭疽动物疑似污染物标本处理,返回,标本痰、呕吐物、脑脊液血液皮毛、腐败脏器等标本及炎症分泌物直接涂片荚膜肿胀试验2%家兔血清肉汤肉汤增菌培养以生理盐水制成悬液经快速增菌（374h）加温或饱和尿素处理革兰染色荚膜染色血琼脂平板或戍烷Ascvoil试验脒琼脂平板0.2ml注射于小白鼠菌落观察涂片革兰染色镜检2%兔血清肉汤增菌（48h）腹腔8h后解剖动力观察生化反应串珠试验噬菌体青霉素毒力试验裂解试验抑制试验初步报告确定报告炭疽芽胞杆菌的检验程序,返回,检验方法,显微镜检查分离培养接种BAP卷发状菌落接种于戊烷脒多粘菌素B观察菌落特征接种于肉汤絮状沉淀生长免疫学检测核酸检测,返回,免疫学检测Ascolis试验,病畜腐败脏器、毛皮、大批肉食及其制品不能分离培养时使用。炭疽杆菌菌体抗原具有耐高热特性，在尸体组织和皮毛中数年仍能检测相出，故可作追溯性诊断。,返回,核酸诊断,从质粒中提取编码PA的pOX11.96kbDNA片段,经PCR扩增,制备32P标记的核甘酸探针,用原位杂交检测标本中相应基因片段。该探针特异性强，重复性好。,返回,1.标本直接检查2.重要鉴定试验（1）串珠试验（2）青霉素抑制试验（3）青霉素串珠和抑制联合试验（4）重碳酸盐毒力试验（5）动物试验（6）植物凝集素试验（7）噬菌体裂解试验,返回,炭疽芽胞杆菌与其他需氧芽胞杆菌的鉴别鉴别项目炭疽芽胞杆菌枯草芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌及其他需氧芽胞杆菌形态菌体两端平截、长链两端钝园、短链两端钝园、短链荚膜多肽荚膜-动力-+菌落卷发状，有毒株为M型锯齿状、R型蜡样或R型肉汤生长絮状沉淀、上层清形成菌膜均匀混浊有菌膜卵磷脂酶+-+溶血反应不溶或微溶血溶血溶血Ascolis试验+-串珠试验+-青霉素抑制试验+-植物凝集素试验+-荚膜肿胀试验+-（和荧光抗体染色）动物毒力试验+-蜡样芽胞杆菌的肠毒素可致小鼠等动物发病致死，但不产生荚膜，其他需氧芽胞杆菌（-）噬菌体裂解试验+-,返回,细菌特性,形态特征培养特性生化反应抵抗力,返回,致病物质（1）耐热性的呕吐型毒素（2）不耐热腹泻型肠毒素所致疾病（3）食物中毒（4）免疫功能低下或应用免疫抑制剂的患者，引起心内膜炎、败血症和脑膜炎，眼外伤后感染可引起全眼炎等,返回,微生物学检验,（一）标本的采集与处理（二）检验程序（三）检验方法（四）鉴定试验,返回,检验方法,1.直接镜检2.活菌计数3.分离培养4.鉴别试验,返回,报告结果,样品,活菌计数直接接种直接涂片染色镜检,普通琼脂平板卵黄琼脂平板血琼脂平板,生化反应,返回,(一)分类(二)细菌特性(三)临床意义(四)微生物学检验(五)耐药性检测(六)结果分析及报告,返回,临床意义,传染途径致病物质所致疾病,返回,传染途径,（1）以粪口途径为主（2）经胎盘、产道可感染胎儿和新生儿（3）与病畜接触可致眼、皮肤局部感染（4）若污染奶及其制品可引起食物中毒,返回,致病物质,（1）李斯特溶素（2）菌体表面成分,返回,易感者：免疫缺陷和各种原因所致免疫力低下者所致疾病：（1）伴EB病毒感染可引起传染性单核细胞增多症（2）对成人易引起脑膜炎、菌血症,返回,(一)分类(二)临床意义(三)细菌特性(四)微生物学检验(五)耐药性检测(六)结果分析及报告,返回,产单核细胞李斯特菌,形态特征培养特性生化反应抗原性抵抗力,返回,1.标本的采集2.检验程序3.鉴定试验,返回,标本10%CO237菌（2支）4冷增菌每24h一次，共4次，以后每周一次，至少4周萘啶酸血平板选择性平板挑取可疑菌落涂半普普动片镜固通通物染检体肉斜试色汤面验触酶其它试验生化,直接涂片200g/LNaCL2448h分离,染色镜检心脑浸汤增培养,返回,1.标本的采集2.检验程序3.鉴定试验,返回,细菌特性,形态特征培养特性生化反应,返回,红斑丹毒丝菌的检验程序,标本直接涂片接种小白鼠心备分离培养3724h肉汤增菌培养革兰染色血琼指平板3724-48h镜硷观察菌落涂片染色镜检纯培养生化反应动物试验,返回,与产单核细胞李斯特菌的鉴别,产单核细胞李斯特菌红斑丹毒丝菌触酶试验+-动力试验+-MR试验+-V-P试验+-溶血试验+-七叶苷水解试验+-分解阿拉伯糖-+TSI中产硫化氢-+,返回,细菌特性,形态染色培养特性生化反应,返回,临床意义,所致疾病（1）造成阴道微生态平衡失调和阴道分泌物性质改变的一组综合征细菌性阴道病（BV）（2）BV可导致妇产科多种严重并发症，（3）引起新生儿败血症,返回,微生物学检验,（一）检验程序（二）标本的采集线索细胞（Cluecell）检查（三）检验方法（四）耐药性（五）结果分析和报告,返回,检验程序,分泌物（阴道、宫颈）涂片分离培养新鲜湿片染色（5%人血平板）（找cluecell）镜检溶血小菌落纯培养（5%人血平板）触酶、氧化酶试验（一）推定报告GV的主要鉴定试验判定报告：GV,返回,检验方法,1显微镜检查2分离培养3鉴定依据：（1）线索细胞（2）pH测定（3）胺试验,返回,1.标本直接镜检2.分离培养3.生化反应4.与其他细菌的鉴别,返回,分离培养,在BAP形成狭窄溶血，在半固体培养基中生长成扩散呈倒松树状，4冷增菌可提高分离阳性率。,返回,与其他细菌的鉴别,1.与类白喉杆菌幼龄为革兰阳性，陈旧为革兰阴性25动力阳性而不符合革兰阴性杆菌本菌2.与B群链球菌相同：呈短链状排列，37无动力，CAMP试验阳性鉴别：触酶试验3.与粪肠球菌相同：耐盐、耐碱、耐胆汁鉴别：触酶试验。,返回,分类,白喉棒状杆菌（C.diphtheriae）假白喉棒状杆（C.Pseudodiphtheriticum）干燥棒状杆菌（C.xerosis）假结核棒状杆菌（C.pseuotuberculosis）溶血棒状杆菌（C.haemolyticum）J-K群棒状杆菌（C.Jekeium-CDCgroupJK）,返回,(一)细菌特性(二)临床意义(三)微生物学检验(四)耐药性检测(五)结果分析及报告,返回,白喉棒状杆菌为急性呼吸道传染病白喉的病原菌，白喉毒素为其致病物质，所形成的假膜可致患者窒息。,返回,传播途径致病物质致病作用所致疾病白喉,传播途径以飞沫和玩具等为媒介经呼吸道传染,返回,致病物质,白喉毒素索状因子,返回,致病作用,白喉毒素具有强烈细胞毒作用，可使局部粘膜上皮细胞产生炎症、渗出和坏死反应，渗出的纤维素和局部细菌、炎症细胞、坏死粘膜紧密结合在一起形成假膜，不易拭去。若假膜延伸并脱落于气管，可致患者于疾病早期窒息死亡。,返回,白喉,返回,1.标本的采集2.检验程序3.标本直接镜检4.分离培养5.鉴定试验,返回,1.形态特征：异染颗粒2.培养特性3.生化反应4.抗原性5.抵抗力,返回,标本的采集检验程序检验方法,返回,微生物学检验,白喉棒状杆菌检验程序,咽拭子直接涂片镜检吕氏血清斜面亚碲酸盐血琼脂平板血琼脂平板（革兰氏染色及371224h372448h371618h异染颗粒染色）涂片染色镜检（革兰氏染色和异染颗粒染色观察菌落特点涂片染色镜检生化反应毒力试验,返回,白喉棒状杆菌检验方法,显微镜检查分离培养鉴定（1）亚碲酸钾血平板形成黑色菌落（2）毒力实验（3）人群机体免疫力检测,返回,放线菌属,分类细菌特性（1）形态染色（2）培养特性（3）生化反应临床意义微生物学检验耐药性结果分析和报告,返回,微生物学检验,检验程序标本采集检验方法（1）显微镜检查（2）分离培养,返回,检验程序,脓汁、痰液、组织中硫磺颗粒涂片染色镜检分离培养（革兰染色、HE染色）接种液体培养基（葡萄糖接种BAP或牛心脑浸液肉汤或硫乙醇酸钠肉汤）琼脂培养基培养物涂片染色镜检生化反应鉴定（革兰染色、HE染色）,返回,诺卡菌属,分类细菌特性（1）形态染色（2）培养特性临床意义微生物学检验耐药性结果分析和报告,返回,实验诊断,检验程序标本采集检验方法（1）显微镜检查（2）分离培养（3）免疫学检测（4）动物接种,返回,检验程序,脓汁、痰液、组织中硫磺颗粒涂片染色镜检分离培养（革兰染色、HE染色）接种液体培养基（葡萄糖接种BAP或牛心脑浸液肉汤或硫乙醇酸钠肉汤）琼脂培养基培养物涂片染色镜检生化反应鉴定（革兰染色、HE染色）,返回,炭疽杆菌革兰染色,返回,炭疽杆菌荚膜,炭疽杆菌传染途径和所致疾病,返回,返回,返回,Elik平板毒力试验,炭疽杆菌卷发状菌落,返回,炭疽杆菌在血平板上的菌落,返回,蜡样芽胞杆菌革兰染色,返回,蜡样杆菌在血平板溶血,返回,产单核细胞李斯特菌,返回,红斑丹毒丝菌,白喉杆菌Albert染色,白喉杆菌Neisser染色,返回,返回,白喉杆菌亚碲酸钾血平板菌落,返回,白喉