法医物证检验方法介绍.ppt

法医物证检验（供医学专业本科教学用）郑州大学基础院医学院法医学教研室曾昭书联系方式：zzs,第19章生物性检材的个人识别,请下载者注意有关内容的保密！,概述,狱事莫重于大辟，大辟莫重于初情，初情莫重于检验。盖死生出入之权舆，幽枉屈伸之机括，于是乎决。宋慈洗冤集录巧舌如簧，难敌铁证如山谚语任何接触都可以留下痕迹。痕迹检验是我们认知当时事件的唯一途径。法国刑事犯罪学家艾德蒙洛卡德,定义,在法医学实践中,分析生物性检材以揭示个体身份的工作称为个人识别。对案件侦查和审判：生物性检材提供证据对灾害、空难事故：生物性检材区别死者身份,学科区别,尸体检验：法医病理伤情检验：法医临床生物性检材检验：法医物证案例：一块破布推断元凶2003年10月，河南省安阳市的一个村庄里，发生了一起抢劫杀人案。死者是收购废品的商贩，躺在两个村子相连的小道上，道路两旁是无际的田野，大白天被人杀害。现场无有价值的足迹，无目击者。仅在现场捡到了一块沾满黑油的衣服碎片，上有一处血迹。案件性质：抢劫杀人死亡原因：颅脑外伤破案经过：血痕非死者所留；黑油是油墨和汽油的混合物；找到嫌疑人为小学印刷厂人员,生物性检材是指生物源性物质证据,包括人体组织、器官；血液、精液、阴道分泌液、唾液、乳汁、尿液等；以及其所形成的斑痕；毛发、骨骼、牙齿及指甲等。,一、生物性检材,特点,受到现场环境因素的作用并非所有的生物源性检材都能起到证据作用，只有经过专门检验后证明其与案件有关并能对案件的真实情况起到证明作用的，方能作为证据。,分析检材的策略,肉眼观察实验检测化学方法免疫学方法分子生物学方法由简单到复杂、逐步排除、逐步缩小范围,二、检材的采集和送检,检材的采取、包装与送检必须遵循一定的规则，以保证检验结果的准确性和可靠性。,在现场勘查或侦查过程中，必须全面、细致地寻找一切可疑的物证。血痕：常见于现场的地面、草丛、墙壁等处，在凶器、指甲缝等处亦多存在。精液斑：常见于衣裤、被褥、床单、内裤等处，似浆糊状。毛发：常见于第一现场尸体附近区域。唾液斑：常见于香烟头、口香糖、咬痕等处。皮肤及脏器碎片：车轮、挡泥板等处。,2.1检材寻找,2.2检材采集,详细记录检材的名称、数量、形状、大小和发现地点，进行绘图，照相和记录之后，根据检材的具体情况，用适当的方法采取和包装。采取检材时，应尽量保持其原状不受损坏。提取现场的检材时，应同时提取受害人的血液、唾液或毛发等。强奸案精斑检验时，必须提取受害人的血液与唾液同时检查。提取尸体血时，最好采取末梢血，不要采取心血，因为尸体腐败时细菌可迅速侵入心脏，使心血污染。采取检材时，切勿用手直接触摸，以免污染。采取检材宁多毋少，以供重复试验用。,各种生物性检材处理方法,活体新鲜血液：静脉采血，EDTA抗凝，冷藏保存，或喷涂于纱布上制成血纱布。血痕：刮下或整件物品提取体液、器官组织：棉签拭子，干净容器，冷藏送检。,2.3检材的包装与保存检材的包装与保存对于保证检验结果的准确性具有重要意义。不同的检材应用不同方式包装。,包装与保存原则不同的检材应分别包装，编号记录，避免混淆和交叉污染。新鲜的血液、唾液、精液等可盛于洁净的玻璃或塑料容器中。潮湿的血痕、唾液斑、精斑及阴道内容物，应在阴凉处晾干后，用干净纸袋或塑料袋分别包装，低温保存。尽可能保证检材中的血型物质、蛋白质及DNA不受外界因素的影响而被破坏，变性和降解。防止温度、酸碱、化学试剂等对检材的影响。应根据检验项目处理和保存检材。如由于唾液中含有一些能破坏ABH血型物质的酶，收集唾液后，应立即在沸水浴中煮沸10分钟使酶灭活。用作DNA分析的人体组织，应用酒精固定，不能用福尔马林液固定；用于DNA分析的血样，最好用乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na2)抗凝；有条件的应尽量用冷冻方式保存用于DNA分析的生物样本等。,2.4检材的送检原则送检过程中应使检材保持完好。附上送检单位公函、委托书(包括委托单位名称、委托人姓名、简要案情、送检的目的与要求等)、送检物品清单(检材的名称、数量、提取方法、包装方式等)。如系复检，应同时附送原鉴定书或其复印件。若邮寄送检，应注明送检者姓名，发文日期、复函地址、联系电话和邮政编码等。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。选用灵敏可靠的方法进行检验，尽量节约检材，保留一部分检材(约23)备复检之用。微量检材需全部用完时，需征得送检单位的同意。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。选用灵敏可靠的方法进行检验，尽量节约检材，保留一部分检材(约23)备复检之用。微量检材需全部用完时，需征得送检单位的同意。检验过程中不能用手直接触摸检材，应用镊子夹取，每取完一种检材后，应将镊子擦拭干净，以免交叉污染。检验工具和器皿必须清洁。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。选用灵敏可靠的方法进行检验，尽量节约检材，保留一部分检材(约23)备复检之用。微量检材需全部用完时，需征得送检单位的同意。检验过程中不能用手直接触摸检材，应用镊子夹取，每取完一种检材后，应将镊子擦拭干净，以免交叉污染。检验工具和器皿必须清洁。严格遵守实验操作规程，保证实验结果准确可靠。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。选用灵敏可靠的方法进行检验，尽量节约检材，保留一部分检材(约23)备复检之用。微量检材需全部用完时，需征得送检单位的同意。检验过程中不能用手直接触摸检材，应用镊子夹取，每取完一种检材后，应将镊子擦拭干净，以免交叉污染。检验工具和器皿必须清洁。严格遵守实验操作规程，保证实验结果准确可靠。认真记录检验方法和结果。,2.5检验程序和要求接案后，应及时进行检验，以免因拖延时间使检材中的蛋白质变性或DNA降解。选用灵敏可靠的方法进行检验，尽量节约检材，保留一部分检材(约23)备复检之用。微量检材需全部用完时，需征得送检单位的同意。检验过程中不能用手直接触摸检材，应用镊子夹取，每取完一种检材后，应将镊子擦拭干净，以免交叉污染。检验工具和器皿必须清洁。严格遵守实验操作规程，保证实验结果准确可靠。认真记录检验方法和结果。根据检验结果进行分析，作出客观、公正的结论，写出完整、规范的法医物证检验鉴定书。,三、血痕检验血痕(bloodstain)是法医物证检验中最常遇到的检材。,3.1血痕检验需要解决问题对疑似血痕确定是否为血痕；是人血痕还是动物血痕；如果是人血，通过血型测定或作DNA分析，解决个人识别问题；有时还需要检验血痕的性别，推断出血时间、出血部位及估算出血量等，协助分析或重建作案情况。,3.2肉眼检查(grossexamination),此项检查常在现场进行。主要观察可疑血痕的分布、方向、位置、形状、大小、数量及颜色等，初步判断是否血痕，出血部位及出血量，血液喷溅或流注的方向，血液滴落的高度。由血痕特征推断死亡原因、尸体位置、有无被移动、原始现场与第二现场等，帮助分析案件发生时的情况。,3.3预试验(preliminarytest)预试验即筛选试验。是通过化学或物理学的方法筛选出可能含血的检材，以作进一步的检验。,3.3预试验(preliminarytest)预试验即筛选试验。是通过化学或物理学的方法筛选出可能含血的检材，以作进一步的检验。预试验方法有：联苯胺试验、酚酞试验、邻联甲苯胺试验、鲁米诺实验、无色孔雀绿试验及氨基比林试验等。,3.3预试验(preliminarytest)预试验即筛选试验。是通过化学或物理学的方法筛选出可能含血的检材，以作进一步的检验。预试验方法有：联苯胺试验、邻联甲苯胺试验、酚酞试验、无色孔雀绿试验及氨基比林试验等。最常用最灵敏的血痕预试验方法是联苯胺试验(benzidinetest)。,3.4确证试验(conclusivetests)血痕的确证试验主要是通过检验血液的特有成分(如血红蛋白及其衍生物)来判断检材是否是血痕。,3.4确证试验(conclusivetests)血痕的确证试验主要是通过检验血液的特有成分(如血红蛋白及其衍生物)来判断检材是否是血痕。若确证试验为阳性反应，则证明检材为血痕。若呈阴性反应，则不能完全排除血痕的可能性，因为血痕经日晒、雨淋、水洗、加热、发霉、腐败或混有杂质时，确证试验均可能呈阴性反应。,3.4确证试验(conclusivetests)血痕的确证试验主要是通过检验血液的特有成分(如血红蛋白及其衍生物)来判断检材是否是血痕。若确证试验为阳性反应，则证明检材为血痕。若呈阴性反应，则不能完全排除血痕的可能性，因为血痕经日晒、雨淋、水洗、加热、发霉、腐败或混有杂质时，确证试验均可能呈阴性反应。确证试验的灵敏度较低。,血痕确证试验常用方法血色原结晶试验或称高山(Takayama)结晶试验,血痕确证试验常用方法血色原结晶试验或称高山(Takayama)结晶试验氯化血红素结晶试验或称古烟(Teichmann)结晶试验,血痕确证试验常用方法血色原结晶试验或称高山(Takayama)结晶试验氯化血红素结晶试验或称古烟(Teichmann)结晶试验吸收光谱检查,血痕确证试验常用方法血色原结晶试验或称高山(Takayama)结晶试验氯化血红素结晶试验或称古烟(Teichmann)结晶试验吸收光谱检查显微镜下查找红细胞等,3.5血痕的种属鉴定种属鉴定(speciesidentification)是指对已经证明的血痕确定其种属来源。,3.5血痕的种属鉴定种属鉴定(speciesidentification)是指对已经证明的血痕确定其种属来源。即判断其是人血痕还是动物血痕。必要时还需要确定是何种动物血。,血痕种属鉴定的方法主要有以下几类：（1）沉淀试验(precipitingtest)（2）酶联免疫吸附分析法(enzymeimmunosorbentassay，ELISA)（3）胶体金标记免疫层析分析技术(colloidgoldlabellingimmuno-chromatography)（4）PCR方法(PCRtechnique),3.6血痕的个人识别血痕的个人识别主要是通过检测血痕中的遗传标记来进行的，如血型、酶型测定及DNA分型等。,3.6血痕的个人识别血痕的个人识别主要是通过检测血痕中的遗传标记来进行的，如血型、酶型测定及DNA分型等。干燥血痕中的血型抗原及酶蛋白等易受外界因素的影响而变性失活，以至检测不出。,3.6血痕的个人识别血痕的个人识别主要是通过检测血痕中的遗传标记来进行的，如血型、酶型测定及DNA分型等。干燥血痕中的血型抗原及酶蛋白等易受外界因素的影响而变性失活，以至检测不出。随着血痕保存时间的延长，能检出的遗传标记亦逐渐减少。,3.6血痕的个人识别血痕的个人识别主要是通过检测血痕中的遗传标记来进行的，如血型、酶型测定及DNA分型等。干燥血痕中的血型抗原及酶蛋白等易受外界因素的影响而变性失活，以至检测不出。随着血痕保存时间的延长，能检出的遗传标记亦逐渐减少。因此，对血痕检材应尽早测定血型。,蛋白质水平遗传标记：血痕红细胞血型的测定、红细胞酶型的测定；血痕中血清型的测定；血痕中白细胞血型（HLA）的测定DNA水平的遗传标记血痕的DNA多态性分析血痕的性别判定,血痕个人识别内容,血痕的ABO型测定：吸收试验与解离试验,四、精斑检验,精液斑是精液干燥后形成的斑痕。在法医学实践中，强奸、猥亵行为、同性恋等案件常涉及到精斑的检验。,4.1精液的组成精液主要由精子和精浆组成。精浆主要由精囊液及前列腺液等组成。,4.1精液的组成精液主要由精子和精浆组成。精浆主要由精囊液及前列腺液等组成。精浆中含有很多蛋白质、酶、游离氨基酸、血型抗原和无机盐类。,4.1精液的组成精液主要由精子和精浆组成。精浆主要由精囊液及前列腺液等组成。精浆中含有很多蛋白质、酶、游离氨基酸、血型抗原和无机盐类。精液中90是水，10是固体成分。固体成分除大量的精子外，还有睾丸细胞、淋巴细胞、上皮细胞、前列腺卵磷脂小体、精素结晶、色素颗粒及脂肪球等。正常精液所含白细胞每高倍镜视野不超过5个。,精液的特点新鲜精液为乳白色粘稠状液体。排出体外后约经1小时左右，即液化成灰白色米汤样液体。正常精液呈中性，pH7.4-7.5。,4.2精斑的特点精斑为精液干燥后形成的斑迹。多附着于衣裤、被褥、床单、毛巾、纸张或现场地面等处。,4.2精斑的特点精斑为精液干燥后形成的斑迹。多附着于衣裤、被褥、床单、毛巾、纸张或现场地面等处。精斑多呈乳白色，其外观常因其附着物的不同而有较大差异。白色布类上的精斑多呈黄白色地图状或浆糊状，边缘较中间明显。有色布类上的浓厚精斑多呈灰白色。稀薄的精斑，肉眼检查不易察见。精斑手触之有硬感。,4.3精斑检验需要解决的问题可疑斑痕是否为精斑；,4.3精斑检验需要解决的问题可疑斑痕是否为精斑；是人精斑还是动物精斑；,4.3精斑检验需要解决的问题可疑斑痕是否为精斑；是人精斑还是动物精斑；若是人精斑，则需进行个人识别。,1肉眼检查2紫外线检查3预试验：检验酸性磷酸酶4确证试验主要有以下几类：精子检出法；免疫学检测法；生物化学方法。5.精斑的种属鉴定：P30抗原、Alu序列许多精斑确证试验的同时，亦进行了精斑的种属鉴定。扩增人精子中人类特有的DNA序列(如Alu序列)，亦可进行精斑的种属鉴定。,4.4精斑的分析,4.5精斑的个人识别1、精斑的ABO血型测定2、精斑的同工酶型测定3、精斑中血清型的检测4、精斑的DNA多态性分析,在鉴定强奸案和其他性犯罪案件时，现场提取的斑痕中除精液外常混有受害人的阴道分泌液、血液、尿液或汗液等，此种斑痕称混合斑。由于阴道分泌液、血液及汗液等均含有血型物质或其他遗传标记，故从混合斑中测得的血型或其他遗传标记的表现型或基因型并不一定能准确地反映精液的表现型或基因型，而往往是混合斑中各种成分遗传标记的总和。,4.6精液与其他体液混合斑的检验,4.6精液与其他体液混合斑的检验在鉴定强奸案和其他性犯罪案件时，现场提取的斑痕中除精液外常混有受害人的阴道分泌液、血液、尿液或汗液等，此种斑痕称混合斑。由于阴道分泌液、血液及汗液等均含有血型物质或其他遗传标记，故从混合斑中测得的血型或其他遗传标记的表现型或基因型并不一定能准确地反映精液的表现型或基因型，而往往是混合斑中各种成分遗传标记的总和。因此，对混合斑进行精液的个人识别，是法医物证检验中的一个难题，也是研究热点之一。,五、其他生物性斑痕分析,唾液斑：唾液淀粉酶检测口腔黏膜脱落上皮细胞检查血型分析，DNA分析性别鉴定,尿液,麻醉抢劫醉人的酒心巧克力2004年月日，由贵阳开往湛江的2236次列车从广西宜山车站开车后，值乘列车的贵阳铁路乘警支队一名乘警在巡视车厢时，突然发现号车厢94号座位上的一名男性旅客在座位上昏睡不醒，经过检查，该旅客身体的一些条件反射基本消失，其衣物还有被翻动过的迹象。经乘警将提取的陈某的尿样送检，其尿液中含有麻醉药物“三唑仑”成分，证明陈某是在被麻醉的情况下遭到抢劫。他吃了坐在旁边的一个年轻女人给他的两颗酒心巧克力后不久即昏睡不醒毒品分析酒精分析个人识别：雪地上的尿痕,大便,可以获得相关DNA线索从厕纸上发现线索天津市2001年的一系列恶性性侵犯事件。2001年2月25日晚上8点左右，在卢台县镇北一个新区，一个年仅15岁，正值花季的少女在上厕所的时候遭到了一名色狼的袭击。经过走访，发现这里多次发生妇女遭到歹徒强暴的事件，被害妇女们因为怕羞都没有报案。经过分析，他们认为这十几宗案件是同一个人所为。于是，董喜宽和队员们在朔朔冬夜里，在这个小区蹲堵了半个多月，谁知道狡猾的色狼非但没有出现，还改变了作案时间。真是苦心人天不负，董喜宽猛然想起从案发现场提取的擦大便用过的纸条。这几张被写着歌词的纸条，之前被有关部门鉴定为：妇女的笔记，没有什么价值。董喜宽马上联系派队员取回。从手机号码上破案：抓获运煤人电脑大盗跨省作案安徽告破一名超级电脑大盗先后携同多名同伙，一年内流窜省个市县，仅用一把起子，在多家机关单位窃得总价值多万元的笔记本电脑和电脑配件细心的民警在该大院围墙外侧一隐蔽处发现一堆留下时间不长的大便，旁边有一张使用过的餐巾纸，以及一个印有“黄石市福寿阁大酒店”抓获三名湖北人,毛发为皮肤的附属器官，由排列规律的角化鳞状上皮细胞组成。在凶杀、强奸、抢劫、盗窃、交通事故等案件中，有时毛发可能成为重要的物证。,六、毛发检验,6.1毛发检验的意义毛发很容易脱落，并留在作案现场及有关物体上；,6.1毛发检验的意义毛发很容易脱落，并留在作案现场及有关物体上；毛发的主要成分是角蛋白，其理化性质较稳定，能抵抗蛋白分解酶及酸的作用，不易腐败和毁坏，可长期保存，有助于个人识别；,6.1毛发检验的意义毛发很容易脱落，并留在作案现场及有关物体上；毛发的主要成分是角蛋白，其理化性质较稳定，能抵抗蛋白分解酶及酸的作用，不易腐败和毁坏，可长期保存，有助于个人识别；在交通事故中，将肇事车辆上的毛发与死(伤)者的毛发进行比对检验，有助于分析事故责任；,6.1毛发检验的意义毛发很容易脱落，并留在作案现场及有关物体上；毛发的主要成分是角蛋白，其理化性质较稳定，能抵抗蛋白分解酶及酸的作用，不易腐败和毁坏，可长期保存，有助于个人识别；在交通事故中，将肇事车辆上的毛发与死(伤)者的毛发进行比对检验，有助于分析事故责任；毛发的形态结构、血型、同工酶型、DNA多态性及无机元素含量等均具有个体特征，可作为个人识别的重要依据。,6.2毛发检验需要解决的问题：区分检材是毛发还是纤维；,6.2毛发检验需要解决的问题：区分检材是毛发还是纤维；鉴别是人毛还是动物毛；,6.2毛发检验需要解决的问题：区分检材是毛发还是纤维；鉴别是人毛还是动物毛；区别毛发来自人体何部位；,6.2毛发检验需要解决的问题：区分检材是毛发还是纤维；鉴别是人毛还是动物毛；区别毛发来自人体何部位；检验毛发的遗传标记及性别进行个人识别；,6.2毛发检验需要解决的问题：区分检材是毛发还是纤维；鉴别是人毛还是动物毛；区别毛发来自人体何部位；检验毛发的遗传标记及性别进行个人识别；检验毛发的损伤，推断致伤物。,与其他纤维的鉴别有的纤维外形与毛发很相似，故疑似毛发的检材，首先要区别是不是毛发。纤维无毛发的结构，且其组成成分亦与毛发不同。根据毛发的结构及理化性质，一般即可确认毛发。