消毒灭菌课件

第3章消毒灭菌,消毒disinfection杀灭物体中某些病原微生物的方法。灭菌sterilization杀灭所有微生物的方法，包括病原微生物和非病原微生物、繁殖体和芽胞。抑菌bacteriostasis抑制细菌生长繁殖的方法。防腐antisepsis无菌asepsis不含活菌无菌操作asepsismanipulation,物理消毒灭菌法,热力辐射滤过除菌,热力灭菌法,干热：杀菌机制：使菌体脱水干燥、大分子变性。801001h可杀死繁殖体，160170可杀死芽胞。常用方法有焚烧、干烤等。湿热：杀菌机制：在水分子存在情况下更易于使菌体蛋白凝固，热力穿透性更强。巴氏消毒法(pasteurization)高压蒸气灭菌法（autoclaving):121.3103.4kPa、1520min可杀灭包括芽胞在内的所有微生物。煮沸法,辐射radiation杀菌机制：破坏DNA结构，中断DNA复制与转录，使细菌死亡。紫外线波长265266nm最强。滤过filtration超声波ultrasonicwave干燥与低温:冷冻低温干燥法lyophilization,化学消毒灭菌法,根据作用机制不同，主要有以下几类：使菌体蛋白质变性或凝固todenaturateandcoagulateproteinsofbacterialcell：酚类-石碳酸、来苏、洗必泰等。醇类-70%75%乙醇杀菌力最强。重金属盐类-红汞等烷化剂-甲醛等，杀菌力强，但毒性大，有致癌性。,干扰细菌的酶系统和代谢tointerfereenzymaticsystemandmetabolismofbacterium：,氧化剂-过氧化氢、高锰酸钾等，与细菌的酶结合使之失去活性。过氧乙酸对细菌繁殖体和芽胞、真菌、病毒都有杀灭作用。,损伤菌细胞膜todamagecellmembranceofbacterium,表面活性剂：增加菌细胞表面张力，并增加其通透性使细菌破裂。化学消毒剂大多对人体组织有害，只能外用或环境消毒,第4章噬菌体bacteriophage,定义：噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌、螺旋体等微生物的病毒。是只能在活的微生物细胞中复制增殖的专性细胞内寄生的微生物。噬菌体的生物学性状propertyofphageDNA头部尾部吸附宿主菌细胞并注入核酸尾丝尾刺尾板,概念,毒性噬菌体(virulentphage)温和性噬菌体(temperatephage)前噬菌体(prophage)溶原性细菌(lysogenicbacterium)溶原性(lysogeny),毒性噬菌体virulentphage,复制过程：吸附穿入生物合成成熟与释放,温和噬菌体temperatephage,吸附穿入前噬菌体prophage溶菌周期溶原周期,意义,用于细菌的鉴定与分型分子生物学研究的重要工具细菌感染的诊断与治疗,第5章细菌的遗传与变异Heredityandvariationofbacteria,遗传性变异非遗传性变异基因型变异表型变异genotypicvariationphenotypicvariation,第一节细菌的变异现象phenomenenofbacterialvariation,形态结构变异Variationofmorphologyandstructure细菌L型-在青霉素、溶菌酶、补体等作用下，使菌细胞壁发生缺陷。细菌呈多态性，革兰染色阴性。H-O变异-细菌失去鞭毛,菌落变异variationofcolony,光滑型（smooth,S）粗造型（rough,R）S-R变异S型菌株致病性强，一般新分离的菌株为S型。菌落发生变异后，细菌的理化特性、抗原性、生化能力、毒力等也可发生改变。,毒力变异virulentvariation,毒力增强-无毒的白喉棒状杆菌感染温和噬菌体后成为有毒株。-棒状噬菌体(-corynephage)含毒素基因编码毒素蛋白毒力减弱-有毒菌株变异为弱毒或无毒菌株卡介苗BacillusofCalmette-Guerin,BCG:卡介二氏用有毒的牛结核分枝杆菌在含甘油、马铃薯的培养基上，经13年连续230次传代所获得的一毒力减弱但保留有抗原性的变异株。是用于人工免疫以预防结核病的活疫苗。,耐药性变异variationofvirulence,细菌对某种抗生素或药物由敏感变为不敏感即为细菌的耐药现象。细菌耐药性的产生，一方面是细菌等微生物自然生存能力所表现的一种自然现象，另一方面与人类行为密切相关。例如抗生素的广泛应用。目前耐药菌株越来越多，并随着新抗生素的不断问世，多重耐药株也不断增多，呈现全球范围的普遍趋势。抗生素抗生素耐药敏感,第二节细菌遗传变异的物质基础materiabasisofbacterialheredityandvariation,染色体DNAchromosome质粒plasmid转位因子transposableelement,染色体DNAchromosome,质粒plasmid,定义：是存在于细菌胞质中的闭合环状双链DNA,为染色体外的遗传物质。质粒带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状。如编码菌毛、细菌素、毒素和耐药性。医学上重要的质粒有F质粒（fertilityplasmid）、R质粒（resistanceplasmid）、Vi质粒(virulentplasmid)等。质粒的重要特性：决定特殊性状；能自我复制；能转移。染色体DNA质粒自我复制从细菌的亲代到子代、从一个细菌到另一个细菌的转移,常见的细菌质粒及其功能：,F质粒fertilityplasmid-含性菌毛蛋白基因，编码产生性菌毛。有质粒的细菌称雄性菌，能长出性菌毛；无质粒的细菌称雌性菌，无性菌毛产生。,R质粒resistantplasmid,接合性耐药质粒(R质粒)：conjugativeplasmidofdrugresistance耐药性质粒通过细菌间接合传递非接合性质粒：不能通过接合方式传递，但它可通过噬菌体传递,毒力质粒virulentplasmid,Viplasmid,如致病性大肠埃希菌的ST质粒、LT质粒等。细菌素质粒、代谢质粒等。,转位(座)因子transposableelement,是存在于细菌染色体或质粒DNA分子中的一段特异性核苷酸序列片段，能在DNA分子中移动，在细菌基因组中不断改变位置，并可从一个基因组转移到另一个基因组中。转位因子主要有：插入序列insertionsequence,IS转座子transposon,Tn转座噬菌体tranposablephageorprophageTnprophageIS中心序列IS2kb28kb2kb细菌染色体DNA,IS只编码与转位作用有关的酶转位酶transposases在此酶的作用下，通过碱基配对起插入作用。其基因的两端可以为反向重复序列invertedrepeat,IR，也可以是同向重复序列。IS在细菌染色体、质粒和温和噬菌体DNA中广泛存在，为其正常组分。Tn带有IS,但Tn的中心序列可含多个基因，如抗性基因。ATGCATACGATn3Tn7Tn5ATGCAATGCA氯霉素TACGTTACGT氨苄青霉素卡那霉素transposaseISTn,第三节细菌变异的机制Mechanismofbacterialvariation,一、基因突变genemutation有抗生素无抗生素有抗生素基因突变理论标记点无菌印模培养液培养液(浑浊)(澄清)影印培养,二、基因的转移与重组genetranferandrecombination,1.转化transformation供体菌游离的DNA片段被受体菌直接摄取，使受体菌获得新的性状。RSRSDNA,2、接合conjugation,细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌。F质粒的接合R质粒的接合,F质粒的接合,接合与Hfr,3、转导transduction,定义：以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。完全转导类型：普遍性转导流产转导局限性转导,4.溶原性转换lysogenicconversion,定义：细菌感染带有毒素基因的温和噬菌体时，使宿主菌成为溶原状态，并获得新的性状。,常