药物分析习题解答-第十三章小结

第十三章抗生素类药物分析学习目标知识目标了解内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类抗生素的结构特征理解内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类抗生素的理化性质与分析方法的关系掌握内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类抗生素的鉴别、特殊杂质检查和含量测定方法能力目标能够根据抗生素的结构特点，选择合适的鉴别方法能够解释抗生素的特殊杂质检查的项目及原理、操作特点能够解释抗生素常用含量测定方法的原理学会依据药典，分析此类药物质量内容概述1抗生素类药物的质量控制具有复杂性和特殊性的特点2抗生素的含量一般用效价大小来表示，即每毫升或每毫克中含有的抗生素的有效成分的量，用单位（U）或微克（G）表示，不同抗生素具有不同的效价基准。3内酰胺类抗生素的分析（1）包括青霉素类和头孢菌素类，分子结构中均具有内酰胺环，以及与内酰胺环并合的杂环氢化噻唑环或氢化噻嗪环，结构通式如示NSCOHNOCH3C3OH1234567RNCOHNO1234567RSCH2R1CO86氨基青霉烷酸（6APA）7氨基头孢霉烷酸（7ACA）青霉素类药物头孢菌素类药物（2）主要理化性质旋光性；紫外吸收；内酰胺环的不稳定性。（3）鉴别试验（重点掌握）呈色反应1）羟肟酸铁反应中国药典（2010年版）中，哌拉西林、头孢哌酮、磺苄西林钠等的鉴别2）肽键特征反应中国药典（2010年版）对头孢克洛、头孢拉定TLC鉴别显色试剂采用茚三酮。3）其它呈色反应酚羟基发生与三氯化铁试液的反应；头孢氨苄紫外光谱头孢类抗生素7ACA结构具有紫外特征吸收，可用紫外分光光度法鉴别。如头孢替唑钠的鉴别红外光谱色谱方法薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC）目前广泛应用于本类药物的鉴别比较供试品与对照品主斑点颜色、位置（RF）或主峰保留时间（TR），要求一致。钠、钾盐鉴别反应头孢曲松钠，青霉素V钾（4）特殊杂质检查（重点掌握）高分子聚合物检查采用分子排阻色谱法，使用葡聚糖凝胶G10为填充剂；阿莫西林阿莫西林聚合物有关物质和异构体的检查采用色谱法，多采用HPLC法；头孢呋辛酯有关物质、异构体细菌内毒素的检查鲎试剂检查法热原检查家兔体温升高试验其它特殊检查1）抽针试验苄星青霉素2）水分费休氏法或甲苯法（5）含量测定内酰胺类药物的含量测定多采用高效液相色谱法头孢羟氨苄、头孢羟氨苄片4氨基糖苷类抗生素的分析（1）氨基糖苷类抗生素由碱性环己多元醇（苷元）与氨基糖缩合而成（2）主要理化性质碱性；糖苷键的稳定性；（3）鉴别试验（重点掌握）坂口（SAKAGUCHI）反应坂口反应为链霉胍的特征反应，链霉胍、8羟基喹啉分别同次溴酸钠反应，进一步相互作用后生成橙红色产物麦芽酚（MALTOL）反应麦芽酚反应为链霉素特征反应，碱性条件下，链霉素水解生成链霉糖，经分子重排扩环等生成麦芽酚硫酸铁铵可与麦芽酚在微酸性条件下生成紫红色配合物3FE茚三酮反应硫酸小诺霉素、硫酸庆大霉素的鉴别N甲基葡萄糖胺（ELSONMORGAN）反应水解时，庆大霉素产生N甲基葡萄糖胺、硫酸新霉素产生D葡萄糖胺。在碱性条件下与乙酰丙酮缩合生成吡咯衍生物，进而与对二甲氨基苯甲醛的酸性醇试剂（EHRLICH试剂）反应，生成特征樱桃红色产物硫酸新霉素的鉴别糠醛反应（MOLISH试验）酸性条件下水解生成糠醛或羟甲基糠醛，与蒽酮试液反应呈色阿米卡星、硫酸卡那霉素的鉴别硫酸盐鉴别反应色谱法薄层色谱法和高效液相色谱法（4）特殊杂质检查（重点掌握）庆大霉素C组分的检查采用高效液相色谱法；十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂异常毒性小鼠死亡实验溶液的澄清度与颜色控制生产中引入的杂质、菌丝体、培养基、降解产物和色素等（5）含量测定多数药物仍旧采用抗生素微生物检定法卡那霉素、阿米卡星、硫酸依替米星采用了高效液相色谱法5四环素类抗生素分析（1）四环素类抗生素的化学结构中均具有典型的氢化并四苯环（2）四并苯或萘并萘的衍生物，具有以下基本结构OONH2OOHOHOHRR2HNR31HC3H3ABCD12345678910112（3）理化性质酸碱性；紫外吸收；与金属离子的反应（4）四环素的不稳定性PH26条件下的差向异构化反应生成差向异构体PH2的酸性条件下的降解反应生成脱水产物；C6位具有羟基的四环素类药物碱性条件下的降解反应C6位具有羟基的四环素类药物；生成内酯结构的异构体，紫外照射下具有强烈的荧光（5）鉴别试验（重点掌握）呈色反应硫酸反应；三氯化铁反应氯化物鉴别薄层色谱法盐酸土霉素；EDTA的加入；氨蒸气熏蒸高效液相色谱法要求供试品主峰保留时间应与对照品溶液的主峰保留时间一红外吸收光谱法；紫外分光光度法盐酸美他环素（6）特殊杂质（重点掌握）有关物质采用高效液相色谱法控制杂质吸光度紫外可见分光光度法；盐酸美他环素（7）含量测定中国药典（2010年版）对四环素类药物的含量测定均采用高效液