上岗培训-医院感染临床微生物检查标本的采集与送检规范(可编辑)

上岗培训医院感染临床微生物检查标本的采集与送检规范医院感染临床微生物检查标本的采集与送检规范广东省人民医院医院感染控制医学部侯铁英主要内容一临床微生物检查标本送检的意义二微生物检验目前存在的困惑三常见标本的采集与运送规范一临床微生物检查标本送检的意义正确采集转运与保存微生物标本正确采集转运与保存微生物标本直接关系到致病微生物培养的正确性与直接关系到致病微生物培养的正确性与阳性率是从临床微生物检验获得正确阳性率是从临床微生物检验获得正确结果的最关键一步结果的最关键一步近年来由各种不同细菌引起的感染性疾病越来越多导致抗生素的过度使用其结果是耐药菌株的增加临床微生物室应如何帮助临床医生合理治疗感染性疾病成为我们共同目标检验误差发生率哪个阶段最高微生物结果的影响因素微生物结果的影响因素1针对性的检验申请2病人准备3标本的采取466824标本的运输5标本的保存和处理标本检验415结果审核和批准18547危急值报告分析前过程按照时间的顺序从临床医生开出医嘱开始到实验室分析检验程序启动时终止包括检验申请患者准备原始样品的采集标本运送到实验室并在实验室内进行传输的全部过程二微生物检验目前存在的困惑目前存在的困惑医生根据药敏报告进行临床治疗常常无效实验室是否分离到真正的致病菌标本采集不合格标本延迟送检血标本采集时存在的问题1血培养瓶存放于冰箱取出后立即采血进行培养过低的温度抑制细菌生长2血液标本采集后放置于冰箱低温抑制细菌生长3血液标本采集后放于机外时间过长细菌生长已达衰老期4标本采集量少儿童少于1ML成人少于3ML会明显降低阳性率6标本采集时机不合适未抓住菌血症时期或在刚使用抗生素不久采血最好在体温升高前半小时使用抗生素前或停用抗生素24小时7标本消毒时消毒酒精未完全挥发痰液标本采集存在的问题1随机标本采集多而非晨痰2同一条形码反复送检3不同专业的标本要分开条形码帖在同一容器PCR检测结核分支杆菌针对如此严重的分析前误差微生物实验室能做什么提供准确的标本采集输送的标准操作程序持续的临床教育和交流三常见标本的采集与运送规范做好病原学检查要特别重视标本质量基本原则及时采集微生物标本作病原学检查在抗菌药物使用前采集标本采样时严格执行无菌操作采样后立即送检棉拭子标本宜用运送培养基混有正常菌群污染标本不可置肉汤培养最有价值的细菌学检测项目血液培养脑脊液培养胆汁培养胸腹水培养关节液其他无菌体液或分泌液我国血培养现状阳性检出率低10国外约为15原因何在原因何在血流中含菌量低血培养的临床实践血流中含菌量低血培养的临床实践欠规范血液中抗菌物质欠规范血液中抗菌物质抗生素的应用抗生素的应用培养条件限制培养条件限制血培养问题2008年广东省临床检验中心制定广东省血培养指导原则要求怀疑血流感染时应在不同部位采血做血培养至少2套一提高血培养阳性率关键点消毒程序静脉穿刺点皮肤消毒程序取无菌棉签或棉球沾取安尔碘型皮肤消毒剂原液由内向外划圈均匀涂擦消毒区域二遍消毒面积不小于5CM5CM自然干燥后再行穿刺采血如没有佩戴无菌手套不允许按压消毒后的静脉2月的婴儿不建议采用该消毒剂培养瓶消毒程序用75酒精擦拭血培养瓶橡皮塞不能用含碘消毒剂自然待干运送程序血培养标本应按要求尽快送往实验室不得超过2H如无法及时送检血培养标本需室温2025度保存勿冻死细菌血培养标本采集与运送血培养的指征是什么血培养的指征是什么血培养的指征是什么答案当怀疑血流感染或脓毒症时应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时应常规行血培养怀疑患者有血流感染的症状有怀疑患者有血流感染的症状有不明原因的发烧36或体温过低36不明原因的发烧36或体温过低36白细胞增多10000UL粒细胞减少1000UL白细胞增多10000UL粒细胞减少1000UL休克寒颤僵直休克寒颤僵直严重的局部感染脑膜炎心内膜炎肺炎肾盂肾炎腹部术严重的局部感染脑膜炎心内膜炎肺炎肾盂肾炎腹部术后感染后感染心率异常加快心率异常加快低血压或高血压低血压或高血压呼吸频率加快呼吸频率加快怀疑血流感染何时采血最佳怀疑血流感染何时采血最佳血培养采血时机细菌浓度体温03060时间分钟采集血培养样本的最佳时间答案尽可能在患者寒战或开始发热时采血尽可能在患者寒战或开始发热时采血在患者接受抗生素治疗前采血在患者接受抗生素治疗前采血如患者已经应用抗菌药物进行治疗应在如患者已经应用抗菌药物进行治疗应在下一次用药之前采血培养下一次用药之前采血培养应该采几份血液标本应该采几份血液标本基本概念成人一套血培养应该包括需氧瓶和厌成人一套血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个也叫一份氧瓶各一个也叫一份注意一次穿刺采血算一套采集注意一次穿刺采血算一套采集第二套应从另一个穿刺点获得第二套应从另一个穿刺点获得儿童一般只做需氧培养特殊患者才考虑儿童一般只做需氧培养特殊患者才考虑厌氧培养厌氧培养采血套数991009690808065706050血培养套数4030201001套2套3套4套COCKERILLCID2004血培养套数与阳性检出率COCKERILLCID2004采血套数WEINSTEINETALDETECTIONOFBLOODSTREAMINFECTIONSINADULTSHOWMANYWEINSTEINETALDETECTIONOFBLOODSTREAMINFECTIONSINADULTSHOWMANYBLOODCULTURESARENEEDEDJCLINMICROBIOL20074535463548BLOODCULTURESARENEEDEDJCLINMICROBIOL20074535463548表皮葡萄球菌的临床意义采集1套无法判阳性套数采集套数临床意义污染可能无法确认断是病原菌还是污染菌110973122953226033713010002375025331000023套血培养有助于污染的判断TOKARSJICLININFECTDIS200439333TOKARSJICLININFECTDIS200439333应该采几份血液标本每位患者采血最少2套3套更好每位患者采血最少2套3套更好初发患者绝不能只采1套标本初发患者绝不能只采1套标本标本须间隔多久采集标本须间隔多久采集标本须间隔多久采集同时或短时间内采集23套血培养因为体内巨噬细胞吞噬系统会在同时或短时间内采集23套血培养因为体内巨噬细胞吞噬系统会在1530MIN内清除掉进入人体内的细菌1530MIN内清除掉进入人体内的细菌可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养30分钟内完成3套血培可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养30分钟内完成3套血培养的采集采集后立即进行抗菌药的经验治疗如果24小时内报告阴养的采集采集后立即进行抗菌药的经验治疗如果24小时内报告阴性则继续采集2套血培养性则继续采集2套血培养可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1H采集1套连续采集3套可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1H采集1套连续采集3套标本如果24小时内报告阴性则继续采集2套血培养标本如果24小时内报告阴性则继续采集2套血培养应该采集多少血液应该采集多少血液采血量ML与检出率的关系10090807060RELATIVE50YIELD40302010051015202530354045505560MLOVERALL血培养物每增加一毫升真性菌血症成年人微生物的检出率增加3要采集多少血液采血量是影响灵敏度最关键因素采血量是影响灵敏度最关键因素成人一份标本2个培养瓶需氧厌氧每瓶8成人一份标本2个培养瓶需氧厌氧每瓶810ML共20ML要求至少采两份标本即40ML10ML共20ML要求至少采两份标本即40ML儿童一般只需采集需氧瓶在保证采集血量1总血儿童一般只需采集需氧瓶在保证采集血量1总血量下一般为13ML量下一般为13ML采血量不足时应优先保证需氧瓶因临床90以上的感采血量不足时应优先保证需氧瓶因临床90以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌感染染为需氧菌或兼性需氧菌感染要不要做厌氧培养要不要做厌氧培养菌血症病原菌种类构成需氧瓶厌氧瓶需氧菌兼性厌氧菌厌氧菌病原菌培养更完整痰培养标本采集与运送咳痰途经口咽部不可避免地受到污染8唾液中口咽部定植菌的浓度可达10109ML研究显示国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象痰标本的采集方法自然咳痰采集标本前应冷开水漱口刷牙然后用力从气管深部咳出痰液放入痰杯内下呼吸道肺泡灌洗支气管刷洗气管抽吸将抽吸物或灌洗液直接放入痰杯内刷出物放入1ML无菌生理盐水的痰杯中诱导咳痰刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口借助喷雾器使患者吸入约25ML35的无菌盐水诱导咳痰痰标本的采集量1ML支气管肺泡灌洗应采集10100ML痰标本运送尽快2H送至实验室如不能及时送达应将标本暂存于4但放置时间不可超过24H合格的痰标本应10个鳞状上皮细胞LPF痰培养的拒收光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显没有标签或贴错标签运送容器选择不当或有渗漏同一天同一试验重复送检2次标本采集不符合要求延时送至实验室的标本尿培养标本采集与运送采集指征有典型的尿道刺激症状肉眼脓尿或血尿尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性几个号不明原因的发热无其他局部症状留置导尿管时间超过48H的患者出现发热膀胱排空功能受损泌尿系统疾病手术前采集方法尽量取早晨第一次尿液弃去开始流出的尿液以冲刷尿道口的细菌取能代表膀胱部位病原菌的中段尿详细告知病人以下操作步骤女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净从前向后仔细擦洗尿道区域分开阴唇开始排尿排出几毫升后不停止尿流采集中段尿男性病人回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后不停止尿流采集中段尿导尿管尿液集尿袋内的尿液不能用作培养导尿管末端的尿液也不能用于培养因为很难避免没有尿道菌群污染留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液采样端口用酒精消毒必要时可先夹住导尿管但不能超过30分钟将注射器针头插入采样端口抽吸出尿液注入无菌杯或试管中标本运送收集中段尿液510ML及时送检室温保存下不得超过2小时否则应置于4冰箱保存保存时间不得超过24H粪便培养标本采集与运送采集指征粪便标本的采集方法自然排便采集标本时取有脓血粘液组织碎片部份的粪便13G花生米大小液体粪便则取絮状物一般取13ML直接装入粪便容器或运送培养基中送检直肠拭子采集粪便标本先以肥皂水和70酒精将肛门周围洗净然后用经无菌盐水湿润的棉拭子插入肛门超越肛门括约肌约24CM与直肠粘膜表面接触轻轻旋转必须将棉拭子置于运送培养基中送检粪便标本的运送一般粪便标本装于无菌封闭广口塑料杯直肠拭子置于肠道运送培养基做霍乱弧菌检查的粪便标本置于碱性蛋白胨水试管中粪便标本室温1小时内送至直肠拭子室温1小时内送至高度怀疑霍乱弧菌感染的标本室温1小时内送至运送必须符合特殊标本的安全要求你知道吗住院超过3D或入院诊断不是胃肠炎的患者不做常规粪便培养除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测有腹部痉挛的患者在发病6H内采集到的血便或液状便的效果最好疑似致病性大肠埃希菌气单胞菌邻单胞菌弧菌小肠结肠炎耶尔森菌感染的病人需要培养时须另外提出申请脑脊液标本采集与运送脑脊液标本的采集方法按脊椎穿刺操作规程采集约35ML脑脊液于3支无菌试管中每支试管至少12ML然后马上将第2支或第1支送至实验室做脑脊液培养时建议同时做血培养腰穿时必须作彻底消毒和无菌操作脑脊液标本的运送常温立即送检实验室收到标本后应立即接种脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内半小时送检是可接受的如果送检时间超过1小时则会影响结果在结果报告时在备注处注明此情况如不能及时送检可使用血培养瓶怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时请勿使用血培养瓶穿刺液标本采集与运送穿刺液标本的采集方法由临床医生进行胆汁的采集方法有三种十二指肠引流法以B管来自胆囊做细菌培养意义较大胆囊穿刺法及手术采取法由临床医生采取约2ML左右放入无菌密封容器立即送检其它穿刺液的采集方法2碘酊消毒要穿刺的皮肤后由临床医生穿刺采集标本2ML左右装入无菌密封容器立即送检穿刺液标本的送运采集后应正确盖好防止泄漏或容器外部留有残留物保温立即送检保证在15MIN内送至实验室实验室收到标本后应立即接种为提高阳性率像胸腹水等标本可接种到血培养瓶中送检手术切口与软组织感染标本采集与运送采集方法未破裂脓肿不能用拭子消毒覆于脓肿表面的皮肤用注射器将脓肿内容物吸出然后切开脓肿引流取部分脓肿壁送检用于厌氧培养开放病灶和脓肿尽量去除表面菌群用拭子采集病灶及底部