[生物医药论文精品]lc-msms法测定牛肉中玉米赤霉醇的残留

LCMS/MS法测定牛肉中玉米赤霉醇的残留摘要目的建立动物源性食品牛肉中玉米赤霉醇的残留分析方法。方法采用叔丁基甲醚溶剂提取牛肉中玉米赤霉醇的残留，以乙腈水（7030）为流动相，流速08ML，进样量50L，经高效液相色谱分离，以多反应监测（MRM）测定。结果本方法在05625NG/ML内线性良好（R09998）；检出限02G/KG；方法回收率为8045，RSD为321。结论本方法稳定、可靠、准确，可用于动物源性食品牛肉中玉米赤霉醇的残留分析方法。关键词液相色谱串联质谱牛肉玉米赤霉醇食品安全VESTIGITALOFZERANOLINBEEFBYLIQUIDCHROMATOGRAPHYTANDEMMASSSPECTROMETRYABSTRACTAIMTOESTABLISHAMETHODFORDETERMINATIONTHEZERANOLINBEEFMETHODSMETHYLTBUTYLETHERWASUSEDFOREXTRACTZERANOLINBEEFWITHMOBILEPHASECONSISTINGOFACETONITRILEWATER（7030）ANDELUTEDATFLOWRATEOF08MLMIN1AT25INJECTVOLUME50LTOSEPARATEBYHPLC,TOANALYSISWITHMRMRESULTSTHELINERANGESFORZERANOLWEREWITHIN05625NG/MLTHELIMITOFDETECTIONWAS02G/KGTHEAVERAGERECORVERYWAS8045（RSD321）CONCLUSIONTHISMETHODCOULDBEUSEDFORTHEDETERMINEATIONOFZERANOLINBEEF，ANDSTABLE、RELIABLEANDACCURATEKEYWORDSLIQUIDCHROMATOGRAPHYTANDEMMASSSPECTROMETRY，BEEF，ZERANOL，THESAFEOFFOODS玉米赤霉醇（ZERANOL，ZER），属于雷索酸内酯类非甾体同化激素。ZER作为牛羊促生长剂，以耳根埋植的形式应用，促进蛋白质的合成，能提高胴体瘦肉率及饲料转化率。但是，玉米赤霉醇具G7389G5381G19616激素作用，在动物G4627液中的残留G1262G5353G17227G1166体性G7438能G13022G1093及G5445G2721G12544G1120性G5461的G8503G5132G2469G13958，在G3818G18108G7477G1226G16837G4560G991，G17836可能G14280G11296。ZERG6502出动物体G3818G2530，G17836可经G20290水G2656食物G17908成G1120G8437G8757G7591及G10627G3671G8757G7591。1998G5192G8443G11443G12117G8502G4570玉米赤霉醇G12573激素类G14659物应用于G11056G12177G1871G8554，G6117G3281G1904G1006G18108G12544235G2507G1856G2590G7138确G16280定玉米赤霉醇G12117用于G6164G7389食品动物，G6164G7389可食动物G993G5483检出。G6117G3281G4590G7422G13491G980G2058G16758动物性食品中玉米赤霉醇残留检测的G15904G1006G7643准。G11013于玉米赤霉醇作为牛羊G3698G18337剂效G7536好，经G8994回G6265高，G1185G7389G17841法G1363用的G10628G16949，G4600G1866是G6117G2318作为G980G1022G1095G1006G8616G17751G2469G17810的G3332G2318，在G4557G1866残留G6523G2058G990G7368应G5353G17227G1166G1216的G18337G16282。G11752G12362建立动物源性食品牛肉中ZER的检G20576方法，G13485G6931G5232、G1237G1006及相G1863G18108G19388提G1391检测G6228G7427，G4557牛肉中的ZER残留进G15904检测，G4557G1457G19568G6117G3281食品安全具G7389G18337G16213G5859G10531。1实验部分11G4466G20576G1214G3132G994G7460料API3200LCMS/MS串联质谱G1214（G13666G3281ABG1856G2508），G18209LC20AG3423高效液相色谱G1214（G7097本G4719G8953G1856G2508）G2656大气压化学电离源。SIGMA216KG3423冷冻离心G7438，IKAT18BASICG3423均质G7438，VS100VORTEXSHAKERG3423振荡G3132，TTLDLG3423氮吹G1214，24PORTSPEVACUUMMANIFOLDSYSTEM固相萃取装置，玉米赤霉醇G7643准品；叔丁基甲醚（分析纯），乙腈（色谱纯），G8503己烷（分析纯），G1120氯甲烷（分析纯），葡糖苷酸酶12分析G7477G1226液相色谱G7477G1226色谱柱ZORBAXC85M3150MM；流动相乙腈水（7030）；流速08ML；柱温室温；进样量50L质谱G7477G1226离子源APCI，扫描方式负离子扫描CURTAINGAS20PSI；COLLISIONGAS6PSI；IONSOURCEGAS135PSI；IONSOURCEGAS245PSI；离子源温度350监测离子及碰撞能量3211/2772（8EV）；3211/3032（6EV）；3212/2593（6EV）13玉米赤霉醇G7643准储备液取玉米赤霉醇G4557照品10MG，置10ML量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度（10MG/ML）。再逐级用流动相稀释至G6164需浓度。14样品的G2058备提取取待测样品500G，置50ML离心管中，加入20ML叔丁基甲醚，涡旋5MIN，4600R/MIN离心5MIN，G4570G990清液全G18108转移至另G98050ML具塞试管中备用。离心管中的残渣置于通风橱中挥G246930MIN，加入15ML乙酸盐缓冲液（PH52）G2530，涡旋5MIN，4600R/MIN离心5MIN，G4570G990清液全G18108转移至另G98025ML具塞试管中，并在氮气浓缩G1214G990于40吹去残余叔丁基甲醚G2530，加入80L葡糖苷酸酶混匀，于52烘箱中放置过夜，在此缓冲液中加入氢氧化钠溶液（3MOL/L），G4570溶液PH值调至7，加入10ML叔丁基甲基醚，充分混合，4000R/MIN离心2MIN，移取叔丁基甲基醚层G994前述的叔丁基甲醚提取液混合，在氮气浓缩G1214G990于40水浴中吹干，加入1ML溶解液G8503己烷G1120氯甲烷（6040），涡旋30S，待净化。净化把样液转入硅胶固相萃取柱（G1363用前用6MLG8503己烷预洗硅胶柱），在样品试管中加入3ML淋洗液乙酸乙酯G8503己烷（694），混合G2530过柱，用3ML淋洗液淋洗，加入2ML空气吹过硅胶柱，用6ML洗脱液乙酸乙酯G8503己烷（6040）洗脱，加入2ML空气吹过硅胶柱，收集洗脱液。G4570洗脱液在氮气浓缩G1214G990于40水浴吹干，加入1ML流动相，涡旋30S溶解。溶液经滤膜过滤G2530，G1391液相色谱串联质谱测定2。2结果与讨论21LCMS/MSG7477G1226的选择选择G993同的液相色谱柱及色谱质谱G7477G1226，最G2530确定出12的LCMS/MS质谱G7477G1226检测玉米赤霉醇。玉米赤霉醇G7643准品的多反应监测（MRM）图及定向性离子的质谱图见图1、图2。应用12中的色谱质谱G7477G1226进G15904分析。通过G1457留时间以及各离子之间的丰度G8616值可以定性确定玉米赤霉醇是否存在，G6502除假阳性的产生3。22G7643准曲线G2656检出限玉米赤霉醇在05625G/L范围内线性G1863系良好，取05G/L、125G/L、25G/L、50G/L、625G/L的溶液，用12的LCMS/MSG7477G1226进G15904测定，G5483G2052子离子3211/2772的G4804G19766G12227G2656浓度。以G1120级子离子3211/2772浓度（X，NG/ML）G4557G4804G19766G12227（Y）进G15904线性分析，线性方G12255为Y410X745R09998。方法的最G1314检出限为02G/KG（S/N3）。23方法的准确度G994G12946G4506度取经测定G993G2559G7389玉米赤霉醇的样品500G9G1233，分G2047加入20NG/ML、40NG/ML、60NG/ML的G7643准G5049作液100L，G636514方法G6817作，测G54839G1233的回收率。G4466G20576G13479G7536见G159321G159321牛肉中玉米赤霉醇的G9167加回收率G5219G2507加入量NG测G5483量NG回收率（G705）G5191均回收率（）RSD（G705）120121709849422012167583253201215967932440243189792554024320179558045321640243065761776036482179878603649518202960364811797124G4466G19481样品的测定应用本方法测定G1114G1128G1022G3332G2318的牛肉各1G6221（样品G12228样量为500G），测G5483的ZER的残留量见G159322G159322牛肉中ZER残留量样品12345测定值（NG/G）056G7422检出（G19464性样品图见图3）25本方法G17878用于牛、G10494G13937G13970G2656G13920肉G13464G13467中玉米赤霉醇的残留量的测定。A11A2A0A3MRMA1A12A2A0A3A4A5A1A13A7A6A8A3MRMA1参考文献1、出G2487肉G12177G12117用G14659物G2529G5417G3281G4490质检G5647G4628G2656G3818经G17164G18108G2469G50792002G5192G1254437G2507G