实验七探究影响酶活性的因素

1、实验七 探究影响酶活性的因素一、实验目的：1探究不同温度和PH对酶活性的影响； 2培养实验设计能力。二、探究温度对酶活性的影响（一）实验原理：1淀粉遇碘后，形成紫蓝色的复合物。2淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。注：市售a-淀粉酶的最适温度约600C（二）方法步骤：1、取3支试管，编上号（A、B、C），然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液；2、另取3支试管，编上号（a、b、c），然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液；3、将装有淀粉溶液和酶溶液的试管分成3组，分别放入热水（约600C）、沸水和冰块中，维持各自的温度5min；思考题1、不能只用不同温度处理淀粉溶液或酶溶

2、液，这是为什么？ 4、分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中，摇匀后，维持各自的温度5min；5、在3支试管中各滴入1-2滴碘液，摇匀后观察这3支试管中溶液颜色变化并记录；思考题2、在试管A、B、C中分别能观察到什么现象？ 思考题3、通过上述实验，你能得出什么结论？ 思考题4、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？ 三、探究PH值对酶活性的影响（一）实验原理：思考题5、请依据下面所列实验操作步骤，写出该实验的实验原理。 （二）操作步骤：用表格显示实验步骤：（注意操作顺序不能错）序号加入试剂或处理方法试管1231注入新鲜的淀粉酶溶液1mL1mL1mL2注入蒸馏水1mL/3注入氢氧化钠溶

3、液/1mL/4注入盐酸/1mL5注入可溶性淀粉溶液2mL2mL2mL6600C水浴保温5min7加入斐林试剂，边加边振荡2mL2mL2mL8水浴加热煮沸1min9观察3支试管中溶液颜色变化变记录思考题6、请在上表中填入你所观察到的实验现象。思考题7、通过上述实验，你能得出什么结论？ 思考题8、在上述实验中，自变量是什么？无关变量是什么？ 思考题9、探究温度对酶活性的影响实验中是否可以用斐林试剂来检验实验结果？为什么？ 探究影响酶活性的因素四、与酶有关的曲线解读（一）表示酶高效性的曲线：1、催化剂可 化学反应速率，与无机催化剂相比，酶的催化效率更 。2、酶只能 达到化学平衡所需时间，不改变化学反

4、应的 。3、酶只能催化 的化学反应。（二）表示酶专一性的曲线：1、在A反应物中加入酶A，反应速率较未加酶时明显 ，说明酶A催化底物A参加反应。2、在A反应物中加入酶B，反应速率和未加酶时 ，说明酶B不催化底物A参加反应。（三）影响酶活性的曲线：1、在一定温度范围内，随温度的升高，酶的催化作用 ，超过这一范围酶催化作用将 。2、在最适pH时，酶的催化作用最强，高于或低于最适pH，酶的催化作用都将 。3、过酸、过碱、高温都会使酶 ，而低温只是 酶的活性，酶分子结构未被破坏，温度升高可恢复活性。4、丙图说明反应溶液pH的变化不影响酶作用的最适 。（四）底物浓度和酶浓度对酶促反应的影响：1、在其他条件

5、适宜、酶量一定的条件下，酶促反应速率随底物浓度增加而 ，但当底物达到一定浓度后，受 和酶活性限制，酶促反应速率不再增加（如右图甲）。2、在底物充足，其他条件适宜的条件下，酶促反应速率与酶浓度 （如右图乙）。附：比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率一）实验原理：鲜肝提取液中含有过氧化氢酶，过氧化氢酶和Fe3+都能催化H2O2分解放出O2。经计算，质量分数为3.5%的FeCl3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比，每滴FeCl3溶液中的Fe3+数，大约是每滴肝脏研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。二）方法步骤：步骤注意问题解释取4支洁净试管，编号，分别加入2mL H2O2溶液不让H2O2接触皮肤H

6、2O2有一定的腐蚀性将2号试管放在900C左右的水浴中加热，观察气泡冒出情况，与1号对照向3号、4号试管内分别滴入2滴FeCl3溶液和2滴肝脏研磨液，观察气泡产生情况不可用同一支滴管肝脏研磨液必须是新鲜的肝脏在制成研磨液由于酶具有高效性，若滴入的FeCl3溶液中混有少量的过氧化氢酶，会影响实验准确性因为过氧化氢酶是蛋白质，放置过久，可受细菌作用而分解，使肝脏组织中酶分子数减少，活性降低研磨可破坏肝细胞结构，使细胞内的酶释放出来，增加酶与底物的接触面积2-3min后，将点燃的卫生香分别放入3号和4号试管内液面的上方，观察复燃情况放卫生香时，动作要快，不要插到气泡中现象：3号试管产生气泡多，冒泡时

7、间短，卫生香猛烈复燃，4号试管产生气泡少，冒泡时间长，卫生香几乎无变化避免卫生香因潮湿而熄灭探究影响酶活性的因素参考答案思考题：思考题1、防止混合时，由于两种溶液的温度不同而使混合后温度发生变化，反应温度不是操作者所要控制的温度，影响实验结果。思考题2、试管A、B、C的现象分别是：不变蓝、变蓝、变蓝。思考题3、温度会影响酶的活性。思考题4、自变量是不同的温度；无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量。思考题5、淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖，麦芽糖和葡萄糖是还原性糖，遇斐林试剂煮沸的情况下会有砖红色沉淀。思考题6、试管1、2、3的现象分别是：有砖红色沉淀，没有砖红色沉淀，没有砖红色沉淀思考题7、溶液PH值会影响酶的活性。思考题8、自变量是不同的PH值；无关变量是可溶性淀粉溶液、新鲜淀粉酶溶液、斐林试剂的量以及用于调节PH的蒸馏水、氢氧化钠溶液、盐酸的量。思考题9、不能；因为如用斐林试剂来检验实验结果，需加热煮沸，会使低温试管中也