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1、 标准文档 植物组织培养复习题(习题) 一、名词解释 愈伤组织:在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。. 外植体:在组织培养中,由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官 脱分化:由高度分化的植物器官,组织或细胞经过离体培养,产生愈伤组织的过程。 半连续培养:利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异:由任何形式的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。胚状体:在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚胎发生和发育过程,形 成的与合子胚相类似的结构。 看护培养:用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖:由配囊中
2、卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质:亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。悬浮培养:将游离的植物单细胞或小细胞团,按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进 行培养的一种方式。 早熟萌发:在培养后迅速萌发为幼苗,不继续进行胚状生长,超过正常发育阶段。 个相对性状之间,一个性状被选择而生存下来的优势。2选择压:在细胞全能性:任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息,在一定条件下,均具有分化,发育成完 整植株的潜在能力。条件培养基:在培养集中加入高密度的细胞进行培养,经过一段时间后,这些细胞向培养基中分泌一些促 进细胞生长的活性物质,使培养基
3、条件化,使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。无菌 离体授粉:将未授粉的胚珠,子房或柱头从母体上分离下来,进行无菌培养,并通过一定的方式授给 花粉,使其在试管内实现受精的技术。 同步化培养:培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。 ) * 100%、每个平板上形成的细胞团数 / 每个平板上接种的细胞总数植板率:( 继代培养:对来自于外植体所增殖的培养物通过更换新鲜培养基及不断切割分离进行的连续多代的培养。 无性系:由任何形式的细胞培养所产生的植株。 细胞融合:在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。 二、填空题、根据外植体的的种类不同,组织培养可
4、以分为组织培养、细胞培养、器官培养、原生质培养和胚胎培1 养五种类型。根据培养基的物理性状,组织培养可以分为固体培养基和液体培养基两种类型。 、对高温高压条件下易降解变质的物质,在灭菌时应采用过滤灭菌方法。2)高低决定了器官的分化类型,其比值高有、植物组织培养过程中,细胞分裂素与生长素比值(CTK/IAA3 利于芽,比值低有利于根,而两者相等时则促进愈伤组织形成。 实用大全 标准文档型曲线,可分为五个阶段,分别是延滞期、对数生长期、“S”4、在细胞悬浮培养过程中,细胞的生长周期呈 直线生长期、缓慢期和静止期。;消毒时间的0.1-1%和 5、酒精和升汞是两种常用的外植体表面消毒剂,它们的使用浓度
5、分别为70-75% 2-15min。 0.2-2min和 范围分别为 6、单细胞培养的方法有平板培养法、看护培养法、微室培养法和条件培养基培养法等四种方法。 7、在细胞悬浮培养时,实现培养细胞同步化的方法有饥饿法和抑制法。 8、实现细胞全能性的条件是组织或器官解离和给予所需的营养物质。 4-D。、常用于诱导愈伤组织的植物激素是2,9 0.25mm。、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为0.110 。11、在冷冻保存中,对植物材料伤害最小的防护剂一般是二甲基亚砜(DMSO) 、支撑植物组织培养作为一门技术的两个重要模式是培养基模式和激素调控模式。12、无病毒植株的鉴定方法主要有直接测定法、指示植物法
6、、抗血清鉴定法、核酸分析法和电镜显微检测13 法等 伊凡蓝染色法。和 、14、用于细胞活力的测定方法有 TTCFDA 、通过离体培养可获得单倍体植株的材料有花粉和未受精胚珠。15 。、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为小于0.3mm16 、植物离体快速繁殖的方式中,遗传性状稳定的有器官型、短枝发生型。17 18、典型的人工种子由体细胞胚、人工胚乳和人工种皮构成。、原生质体的分离纯化过程中要添加渗透压稳定剂和原生质膜稳定剂提高原生质产量和活力,属于质膜19 CaCl2。稳定剂的有葡聚糖硫酸钾 、根据不同植物的生长发育特点,快速繁殖的途径有短株发生型、器官发生型、胚胎发生型和原球茎发20 生型。 、
7、组织培养中碳源的主要作用是合成有机物和维持合适的渗透压。21 、目前用于细胞融合的方法主要有自发融合和诱导融合两种。22 、原生质体的纯化方法有沉降法、悬浮法和界面法。23)及细胞总体积、细胞鲜重和干重、PCV24、悬浮培养中细胞生长的测定方法:细胞计数、细胞密实体积( 细胞有丝分裂的指数。 、振荡培养的目的:改善液体培养基中培养材料的通气状况。25 26、单倍体育种的主要有优点是:缩短育种年限、后代不出现性状分离。 27、常用于诱导胡萝卜胚性愈伤组织的植物激素是生长素,胚状体的形成则是在细胞分裂素的促进下。报道了马Melchers1978年Steward28、在组织培养的发展史上,1958年
8、报道了胡萝卜细胞悬浮培养; 报道了诱导鸡红细胞与酵母细胞融合培养。年铃薯和番茄的融合培养;1960Cooking 29、在胚乳培养中,由裸子植物胚乳发育成的植株为单倍体;被子植物胚乳发育成的植株为三倍体。 、组织培养中的突变可分为体细胞无性系变异和加选择压(化学物质)诱导产生的变异。30 实用大全 标准文档 三、单选题 )。、常用于诱导愈伤组织的植物激素是( B 14-D C IBA D ZT ,A 6-BA B 2 )。、在用物理方法诱导原生质体融合时,下列哪种方法不在此列( C 2 振荡多聚化合物 D B 显微操作 C 电刺激A )、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为( A 31mm D 1
9、0mm 0.3mm B 0.5mm C 0.5A 0.2 )。 D 4、用酶解法分离原生质的离析液中,下列哪种物质具有抑制核糖核酸酶的作用(D MgSO4 B CaCl2 C 甘露醇A 葡聚糖硫酸钾 )。 A 5、在冷冻保存中,对植物材料伤害最小的防护剂一般是( D 脯氨酸甘露醇氯化钙 C A 二甲基亚砜 B (论述题)四、简答题 1、植物离体快速繁殖的途径有哪些? 4.再生根的锻炼和移栽3.芽苗生根培养 2.答:1.无菌母株的制备 继代芽的增殖 2、脱除植物病毒的方法有哪些?为什么茎尖分生组织培养能够除去植物病毒? 化学疗法珠心培养脱毒 6.愈伤组织脱毒 4.微体嫁接脱毒 5.2.答:1.茎
10、尖培养脱毒 热处理脱毒 3. 糖在幼胚培养中的生理作用?3、 )防止幼胚早期发育(3 (2)作为碳源和能源 答:(1)调节培养基的渗透压 4、单细胞分离的方法有哪些?各有什么优缺点? 由培养的愈伤组织中分离单细胞答:机械法; 酶解法; 2.不发生质器分离;1.细胞不受酶的伤害 机械法:优点: 产量低材料要求是薄壁细胞,组织排列松散 2.缺点:1. 酶解法:优点:能得到比较均匀一致的海绵组织或栅栏组织细胞 缺点:在分离细胞时,必须对酶液给予渗透压保护,防止细胞的账裂。 、通过机械法和酶解法比较原生质体分离优缺点。5 机械法:优点:可避免酶制剂对原生质的某些破坏作用。缺点:获得的原生质少,产生的原
11、生质的细胞类型限制,一般取材局限于具有液泡化程度较大的细胞或长 的细胞组织。形酶解法:优点:可以获得大量的原生质体,适用于几乎所有植物和器官,双子叶植物叶肉细胞比单子叶更 缺点:酶制剂含有核酸酶,蛋白酶,过氧化物酶及酚类物质,会影响原生质体的活力。易分离。 、简述细胞培养的应用。6细胞的工厂进行特化的生物转化反应、(3)(2)一、天然化合物的生产与特化:(1)植物次生代谢物的产生、 )诱导多倍体)间接选择法、()直接选择法、(二:突变体选择:(化生产 123 实用大全 标准文档 、简述实现悬浮培养细胞同步化的两种主要方法:7 2)抑制法)饥饿法(1 ( 8、单倍体育种优点是什么? 1)良好的遗
12、传研究材料( 2)加速育苗进程( 3)提高选育效率( 4)突变体选育,单倍体植株基因表达不受遮蔽,可以充分展示基因型所决定的表现型( 5)遗传转化受体,确保外源基因的稳定遗传,大大提高遗传转化率( 6)利用单倍体育种时,栽培品种进行纯化对基因型混杂品种进行纯化。( 、原生质体培养的意义。9)比较容易摄取外来的遗传物质,研究植物原生质体培养和再生植株技术,有可能采取细胞遗传工程1( 的方法培育出新品种。 )便于进行细胞融合,形成杂交细胞,可广泛的重组植物界优良遗传性状,创造新品种。(2 )原生质体可以作为遗传理论研究的材料。(3 、细胞培养的工业应用有哪些方面:10 )大规模培养(3 (2)种子
13、的培养 (1)高产细胞株的选择 11、在原生质体分离与纯化过程中,影响原生质体活力和数量的因素有哪些? (1)光:一般在黑暗静止条件下进行。 25-30,兼顾原生质稳定性及酶活性(2)温度:酶解温度 24小时(3)时间:几小时或几十小时,太长时间影响原生质活力,一般少于 细胞壁降解酶的种类和组合(4) 渗透压的稳定性种类(5) 原生质膜稳定剂(6) 影响(7)PH 、简述离体授粉的主要方式?12 )离体胚珠授粉3)离体子房授粉 (21()离体柱头授粉 ( 、简述试管苗移栽不易成活的原因?13 )根系结构不完善,不生根,根与芽的输导不相通(愈伤组织),再生根的吸收功能差;(1)叶部结构不完善,缺
14、少角质层和蜡质层,保水性差,缺少叶表皮毛,保湿,反光性差,气孔开度大,(2 关闭能力差,叶片中的栅栏组织发育不完善,结合能力低。 、种质保存的意义有哪些?14 所占空间少,节省人力、物力和土地; 有利于国际间的种质交流及濒危物种抢救和快繁; 实用大全 标准文档 需要时,可以用离体培养方法很快大量繁殖; 避免自然灾害引起的种质丢失。 15、概述花粉培养在育种上的应用?; 1)单倍体育种(; )对于二倍体植物加倍变成四倍体或倍数更高的多倍体,可以改善原来植物的某些经济性状(2)对异花授粉作物(如玉米)的单倍体植株进行加倍,可迅速获得自交系,免去了烦琐的人工自交过3( 程,节省大量的时间和人力; )
15、排除显隐性基因干扰,有利于进行突变体选择(4 、植物子房内授粉的意义是什么?16在离体条件下,将无菌花粉直接引入子房中,使花粉粒在子房中萌发,完成受精,并获得具有生活力的种 子的发育,可以克服柱头或花柱授粉不亲和性障碍。 、茎尖脱毒的理论依据是什么?17 )茎尖由分生组织构成,无维管束胞间连丝也不发达,病毒很难进入;(1 )分生组织不断进行活跃的分裂增殖,需要消耗大量能量。代谢旺盛,能抑制病毒复制;(2 )茎尖和根尖中内源激素浓度在很高的水平,抑制病毒复制(3 18、概述胚乳培养的意义?但有时无籽果实及以营养体生产: 对于以种子生产为目的的植物是无益的;(1)三倍体幼苗和植株的获得 为目的的植
16、物则具有重要经济价值。如苹果、香蕉、桑树、西瓜、甜菜、茶及某些花卉的三倍体经济性状更优越。)胚乳植株染色体的不稳定性,为染色体工程的研究提供有效的途径。(染色体不稳定的原因和变化(2 规律) )为研究淀粉、蛋白质和脂肪等产物的生物合成及其代谢,提供了良好的实验系统。(3 、植物细胞规模化培养与次生产物生产前景如何?为什么?19利用植物细胞培养生产代谢产物具有十分广阔的前景。目前植物细胞培养生产的化合物很多,包括糖类、个方3酚类、脂类、蛋白质、核酸以及帖类和生物碱等初生和次生代谢产物,植物细胞培养的应用主要包括以下 面: 1)有用物质(次生代谢产物)的生产;( 2)植物无性系的快速繁殖和遗传突变
17、体的筛选;()植物细胞遗传、生理、生化和病毒方面的深入研究。通过植物细胞培养生产药用成分取得了很大的3(如多种的成分,其中有相当大部分具有药用价值,多种,能够生产超过600进展,目前已经研究过的植物有400 紫草细胞培养生产紫草宁、人参细胞培养生产人参皂苷以及黄连细胞培养生产黄连素等。 、试述离体受精的类型及其意义。20 类型:胚珠授粉,子房授粉,柱头授粉。 意义:克服远缘杂交过程中的受精前障碍,获得可育性种子。 、论述植物快速繁殖的过程。21 实用大全 标准文档)无菌母株的制备:初代培养,选取性状优良,稳定,生长健壮,无病虫害植株上的外植体,经适当(1 存放灭菌处理后,接种在培养基上,诱导其
18、产生芽和愈伤组织。 2)继代芽的增殖:无菌母株再次切割进行继代培养,芽分化增殖成丛芽,加快繁殖速度( )芽苗生根培养:诱导无根苗生根的方法:(3; 试管内生根:将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养a.涂IBAb.试管外生根:有些植物可以将离体条件下形成的枝条,在基部切口处,用生根粉和滑石粉混合的 抹,然后种植到温室或田间,这样可大大降低成本。 )再生根的锻炼与移栽(4 将小苗根系周围的培养基冲洗干净,以避免有害生物的污染A. 筛选适宜的移栽基质,选较好保水性和通气性的B 选择使用营养钵,苗床及遮阳网,以调控光,温度,湿度等C 移栽前后培养条件发生改变D 、论述脱除植物病毒的方法及其原理。22
19、1)热处理脱毒;原理:( 1.某些病毒受热后不稳定,高温使这些病毒失去活性,可以部分地或完全的被钝化病毒在植物体内增殖减一起复制,热处理钝化病毒的活性后,病毒进入植物细胞后,随植物细胞的DNA2. 缓或增殖停止,而失去侵染的能力高温下,一方面不能生成或生成病毒很少,另一方面对病毒的破坏作用加重,病毒颗粒生成和破坏的平3. 衡程度受到破坏,使感染植株的病毒含量不断降低,经过一段时间,病毒自行消失,而达到脱毒的目的。 )愈伤组织脱毒;原理:(2 细胞的增殖速度快于病毒复制的速度1. 细胞产生变异,获得对病毒感染的抗性,最终表现出脱毒现象。2. 3()微体嫁接脱毒; 4)珠心胚培养脱毒;原理:( 珠
20、心组织与维管束没有联系,所以可以培养珠心组织,得到无病毒植株。 )化学疗法;原理:(5 化学药剂对病毒的杀伤力。 6()茎尖培养脱毒;原理: 茎尖几乎不含病毒,采用旺盛分裂的茎尖组织培养,就有可能去除病毒。 注:具体答案参照各自教材 植物组织培养练习题 1. 植物组织培养:指要人工控制的条件下,将植物体的任何部分,或器官、或组织、或细胞, 进行离体培养,使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件,即营养条件和环境条件; 实用大全 标准文档 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。 愈伤组织培养:将外植体接种在人工培养基上,由于植物生长调节剂的存在,而使其细胞2.
21、脱分化形成愈伤组织,然后通过再分化形成再生植株。 外植体:植物组织培养中的各种接种材料,包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质3. 体等。 脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。4. 、接种:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞,转放到无菌培养基上的5 全部操作过程。、褐变:外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活,使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的6 醌类而且还会抑制其他酶的活性,这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色,物质, 严重影响外植体的脱分化和器官分化,最后变褐而死亡的现象。 填空二 植物组织培养根据培养方式分为固体
22、培养和液体培养。 2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。单倍体育种、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、 种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。 4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快速繁殖和脱毒培养两种类型。 5的表面灭菌和接种,培养;试管苗的驯化、移栽与初期管理。 实验室、摄影室等分室,另加驯化室、温室和大棚。6、培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、7 。PH 、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。8并具有发育成完整植株的潜在细
23、胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,9、 能力。、玻璃化现象是指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的10 嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。 11、液体培养是将培养物方在液体培养基中培养,又称为液体震荡培养。 三、 、简述培养基的配制、分装、包扎和灭菌。1 答:)贮备液(或母液)的配制与保存配一些浓溶液,用时稀释,这)确定培养基的配方。(2(1种浓溶液叫贮备液或母液。按药品种类和性质分别配制,单项、单独保存或几种混合保存。一般应按配方顺序依次称量,分别溶解在少量蒸馏水中,最后再依次加到一起,并定容到规定体积。
24、贮备液配 好后贴上标签,保存在冰箱中。 )配制培养基(3 实用大全 标准文档蒸馏水,加入所需要的琼脂和糖,最好能在水浴锅理将先在洁净的不锈钢锅理放入约750ml 琼脂溶化,如直接加热应不停地搅拌,防止在锅底烧焦或沸腾溢出。 按需要加入相应量的母液。(或充分混合好后,用1NKOH按需要加入相应量的植物激素和其它物质。加蒸馏水定容, )分装:按容器的大小和培养要求,趁热将适量培养基分注到三角瓶值到所需值。(4NaOH)调整PH 或试管中,并即刻用封口膜封住瓶口。、什么叫接种?简述无菌操作注2分钟。1530(5)灭菌:压力108kPa,温度121度,时间答:把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、
25、组织、细胞,转放到无菌培养基上的 意事项。 全部操作过程叫接种。无菌操作注意事项好下: 操作人员双手必顺进行灭菌。进无菌室之前,操作人员需着经灭菌的白色工作服,戴口罩。(1) ?植物组织培养室的核心是无菌室(又叫接种室),怎样进行无菌室的灭菌 答: )常规灭菌法(1 新洁尔灭)朝天花板、四周墙壁方向喷洒;酒精(或0.1%用70% 70%酒精将台子揩一遍;待整个室喷洒完毕后依次用 70%酒精打湿),把地板拖一次;用湿拖把( 530分钟;然后将无菌室的门关闭,开紫外灯,照射 0.52小时后进入室内操作,待工作完毕后,将室门打开换气。以后每用一次灭菌一次。 )无菌室发现霉斑(墙上)时的灭菌(2 酒精
26、擦一遍(里里外外);用70% 酒精重复再擦一遍;用新配70%24克高锰酸钾的比例,蒸房间甲醛(福尔马林)加0.2甲醛蒸:方法是每立方米空间用2ml 小时(门窗密闭),然后开启房门,放走甲醛气体。 常规灭菌法再灭菌一次。待用。 4、什么叫污染?污染的原因有哪些?简述预防污染的措施?污染是指在组培过程中,由于真菌、细菌等微生物的浸染,在培养器内滋生大量的菌斑,使培 养材料不能正常生长和发育的现象。污染原因有以下几种: 培养基及各种使用器具消毒不彻底; 外植体灭菌时不彻底,在菌残存在细胞组织中; 环境不清洁;操作时人为因素带入; 超净工作区域污染。预防污染的措施:做好器具灭菌、外植体灭菌,做好无菌操
27、作技术,搞好组培室环境条件,正 确使用和维护好超净工作台。 5、简述培养物的玻璃化现象及其预防措施。答:玻璃化是试管苗的一种生量失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。结果是瓶内的小苗过 实用大全 标准文档渡生长,但有用的苗很少。各种不同植物,玻璃化的发生频率各不相同。大量的试验表明:玻璃幕化苗是在芽分化启动后的生长过程中,由碳水化合物、氮代谢和水分状态等发生生理性异常所引起,它由多种因素影响和控制,产生玻璃化的主要原因有:激素浓度、温度、湿度、培养基的硬度、光照时间和培养成分。针对以上原因,可以通过降低培养基
28、的水位;减少培养基中含氮化合物的用量;增加光照强度;调整培养温度;降低培养基中细胞分例素的用量;提高培养基的硬度等措施,来减少玻璃 化现象的发生。 6、简述外植体的褐变及其预防措施。褐变是指在组培过程中,由培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基逐渐变成褐色,培它的发生是由外植体中的酚类化合物与多酚氧化酶作用被氧化养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。形成褐色的醌类化合物,醌类化合物在酪氨酸酶的作用下,与外植体组织中的蛋白质发生聚合,进一步引起其他酶系数失活,导致组织代谢紊乱,生长受阻,最终逐渐死亡。引起褐变的原因包括外植体 本身、培养基及培养条件等方面的影响。减轻褐化现象的途径有以下: 天的遮
29、光培养或暗培养;外植体和培养材料进行2040 选择适宜的培养基,调整激素用量; 控制温度和光照,在不影响正常生长和分化的前提下,尽量降低温度,减少光照; 冬春季节选择年龄适宜的外植体材料进行组培,并加大接种数量;在培养基中加入抗氧化剂和其他抑制剂,如抗坏血酸、硫代硫酸钠、有机酸、半光氨酸及其 盐酸盐、亚硫酸氢钠、氨基酸等,可以有效地抑制褐化; 2.5%),是生产上常用的有效方法。加快继代传瓶的速度,添加活性炭等吸附剂(0.5% 四、请设计一个组织培养室,说明规模、面积、作用、目的、各室作用,并绘出平面图。 植物的组织培养技术测试题专题3 一单选题 植物细胞表现出全能性的必要条件是(1) 导入其
30、它细胞的基因 A.给予适宜的营养和外部条件B. C.脱离母体后,给予适宜的营养和外部条件 将成熟筛管细胞核移植到去核的卵细胞内D.( ) 2以下成为组织培养条件的是 细胞分裂素生长素 矿质元素 水 C02 有机物 C. D. A. B. ( ) 3无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键 , 以下说法正确的是 , 对无菌操作的要求非常严格由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差 对培养材料进行表面灭菌时一方面要考虑药剂的对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 不同药剂、不同植物材料甚至不消毒效果 , 另一方面还要考虑植物材料的耐受能力 , 将对培养材料可用高压蒸汽灭菌 如果不小心导致污染 同器官要
31、区别对待 可能造成培养工作的前功尽弃 C. D. A. B. 诱导分化的器 , , 当培养基中细胞分裂素 / 生长素的比值较低时4愈伤组织分化过程中( ) 官是 胚性细胞团叶 D. 芽A. 根 B. C. 。 , 后使用生长素时 5当先使用细胞分裂素, 实验结果是( ) 实用大全 标准文档 但细胞不分化B. 细胞既分裂又分化有利于细胞分裂A. , , 但不分裂D. C. 分化频率提高 有利于细胞分化 在植物组织培养中,切取胡萝卜的外植体时一般选择(6. ) B具有木质部的部分 具有韧皮部的部分A 具有髓的部分 DC具有形成层的部分 )菊花的组织培养一般选择( 7 正在开花的枝条 BA开过花的老
32、枝 任何枝条均可未开花植株的茎上部新萌生的侧枝DC 8动物细胞培养与植物组织培养的重要区别是() A培养基不同 动物细胞不需要在无菌条件下进行B C动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株 )9细胞具有全能性的原因是( 生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 生物体的每一个细胞都具有全能性 生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的 10.在月季花药培养成单倍体植株的过程中,应选择哪个时期最易成活( ) A单核期前的花药B单核期后的花药 C单核期花药 D双核期 11.影响花药培养的主要因素是 A材料的
33、选择与培养基的组成 B亲本植株的生理状况 选择合适的花粉发育时期C D材料的低温处理与接种密度 712粗糙脉孢菌的单倍体细胞中具有条染色体。两 个不同类型的粗糙脉孢菌A和a融 合后成为二倍体,随即发生典型的减数分裂,紧接着又进行一次有丝分裂。此过程最 )终形成的子细胞数及每个子细胞中的染色体数分别为( 8个、14条 14条 D4个、7C4个、条 8A个、7条B ),那么,一个花粉管中的两个精子中的染色体是(6条染色体,它们是AaBbDd 某高等植物体细胞内假设有13Abd Abd和和和abd BAbDabd CAaBBbd D和AABD 如果某种植物的基因型为AABb,这两对基因分别位于两对同
34、源染色体上,去雄后授14 植株的花粉,其胚乳可能的基因型是( )以aabbAABb 、AABBAAaBBb、AAabbb、AAaBbb BAAaabbb AAabbb DAAaBBb、AaaBbb、C 15一个豆荚中种子的数目,从理论上讲取决于() 花中雌蕊的数目 B雌蕊中柱头的数目A D胚囊中胚的数子房中受精胚珠的数目C 二.多选题( ) )要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,需要16(2003年高考江苏卷 离体状态具有完整细胞核的细胞A B C导入外源基因D一定的营养物质和激素 17.(2004年高考广东、广西卷)下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是() A叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态
35、的薄壁细胞 B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜C 实用大全 标准文档 D叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性? ( ) 18MS培养基和微生物培养基相比有哪些不同 A.MS培养基不含有机物 B. 微生物培养基以有机物为主 C.MS培养基不含微量元素 D.MS培养基需提供大量无机营养 三.非选择题 下图是被子植物的受精过程19 写出图中数字所代表的结构的名称: 生殖;蘑菇进行(2)草履虫进行 生殖。生殖,酵母菌和水螅常常进行 2n=24)胚珠中胚囊的)下列图解表示水稻(3 发育过程,试根据图回答: 减数分裂直接发育 薄壁细胞 )孢原细胞(2n 珠心 三次有丝
36、分裂 相同。n,其中遗传物质应与 水稻种子的种皮遗传物质应为 条,胚 条,其中卵细胞中含染色体 条;若水稻授粉受精后发育成胚和胚乳,则胚细胞中含有染色体水稻胚珠中的胚囊应共有染色体 条。乳细胞中含染色体 ,则胚囊母细胞基因型为AaBb 。7细胞或8核中的7细胞其中就包括了一个卵细胞和两个极核,若水稻的基因型为 Ab,则极核的基因型为,其原因是如果水稻卵细胞基因型应为 。,一个番茄细胞发生减数分裂,形成的细胞中有三个退化消失。剩下一个细胞迅速发生了三次有丝分裂,(244)番茄的染色体数目是2 你会找到多少个细胞核?这些核含有多少个染色体( ) 4个核,各有24个染色体个染色体A4个核,各有12
37、B 个染色体个核,各有12 C8个核,各有24个染色体D8条染色体。在正常情况下,它的卵细胞、一个极核、胚细胞、胚乳细胞、珠被细胞和子房壁细胞所含染色体205)玉米的体细胞含有(2 数目依次应为( )20 、2020 B10、10、3030、20、A1010、2020、20 20、20、30、C10、1020、3020、20 D10、20 20阅读下列材料,分析后简要回答问题: 写出以下过程或结构的名称: D ;。B A ;C 2中在获得杂种细胞的容器中还有其他什么细胞?材料 过程是否需要光照? ;再分化是否需要光照?。A3() )名贵花卉进行离体培养时不应采用该株的(4 实用大全 标准文档
38、D.叶片A茎尖 B.子房壁 C.花粉粒 这一项生物技术。(21.1)植物的胚状体是 繁殖的产物。培育胚状体利用了 )包埋胚状体的胶质可看作种子的哪部分?(2 3。)由人工种子萌发出的植株是否可育?说明理由。 ( 22 参考答案:CCCAB CCACC AADCC :1-15ABD AD BD 16-18: 受精极核 受精卵 珠孔珠被19. (1)花粉管 子房壁 出芽(2)分裂 孢子 卵细胞和极核是由单核胚囊经三次有丝分裂而来3)2 母方 96 12 24 36 AaBb Ab (C 5)(4)D(b 原生质体a;原生质体20.(1)脱分化;愈伤组织; 、(2)细胞a 一、选择题 )( C 3植
39、物体细胞杂交的结果是 形成愈伤组织原生质体融合 DA.产生杂种植株 B产生杂种细胞 C科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合,培育出的驱蚊草含有香4茅醛,能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中,驱蚊草的培育属于细胞工程育种,其优 A C )错误的是 ( 点是能克服远源杂交不亲和的障碍驱 CPEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法B驱蚊草培育过程要用到纤维素酶果胶酶、驱蚊草 D蚊草培育过程是植物体细胞杂交,不同于植物组织培养无愈伤组织和试管苗形成,上海)将(2005不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 5、具有完整细胞核)
40、A ( D 胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时,下列条件中不需要的是 、导入指定基因 C、离体状态 D B的细胞、一定的营养物质和植物激素 ) ( A 6植物体细胞杂交的目的中错误的是克服远源杂交不亲和的障 C.把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上 B.获得杂种植株A. 实现原生质体的融合碍 D. )( D 7植物组织培养的用途中不正确的是 2 D生产白细胞介素 B.生产新品种 C生产生物碱快速繁殖A.两种植B,将显示细胞核)A、 8A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如右图所示(仅 组织培养 物细胞去掉细胞壁后,诱导二者的原生质体融合,形成单核的杂种细胞,若经过三DdYyRr B基因型是 ) A二
41、倍体;后得到了杂种植株,则该杂种植株是(DDddYYyyRRrr 基因型是DdYyRr D四倍体;四倍体;倍体;基因型是DdYyRr C基因型是 C )以下关于原生质的叙述,正确的是(9 、原生质就是细胞质A、原生质泛指细胞内的基质 B 、细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质、一个动物细胞就是一团原生质C D 实用大全标准文档 10不能人工诱导原生质体融合的方法是 ( D ) A.振动 B.电刺激 C.PEG试剂 D重压 11植物细胞表现出全能性的必要条件是 ( C ) A.给予适宜的营养和外界条件 B.导入其他植物细胞的基因 C.脱离母体后给予适宜营养和外界条件 D.将成熟筛管细胞核移植到去核的卵
42、细胞内 12细胞具有全能性的原因是 ( C ) A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能 B.生物体的每一个细胞都具有全能性 C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因 D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的 13植物组织培养过程中的脱分化是指 (C ) A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 14.下列植物细胞全能性最高的是 (B ) A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞 15植物组织培养过程的顺序是 ( A )
43、离体的植物器官、组织或细胞 根、芽 愈伤组织 脱分化 再分化 植物体 A B C D 16下列有关细胞工程的叙述不正确的是 (C ) A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质 B在细胞器水平上定向改变遗传物质 C在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 D在细胞整体水平上获得细胞产品 17下列细胞全能性最高的是 (C ) A植物的卵细胞 B植物的精子细胞 C被子植物的受精卵 D被子植物的的叶肉细胞 18植物体细胞融合完成的标志是 ( A ) A、产生新的细胞壁 B、细胞膜发生融合 C、细胞膜发生融合 D、细胞膜发生融合 19.植物体细胞杂交的目的是 ( D ) A.用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的
44、原生质体 B.以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合 C.用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株 D.通过以上三者来完成 20.下列提法正确的是: ( D ) A、原生质专指细胞质 B、人体内的水都属于原生质 C、细胞核不是原生质 D、一个动物细胞就是一团原生质 21(多选)有关原生质体的下列叙述中,正确的是 ( A B ) A组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸 B原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质 C被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体 D原生质体只能用于植物细胞工程 绪论复习题及参考答案 一、填空: 1、根据培养的材料,植物组织培养分: 愈伤组织培养 、 器官培养
45、 、 细胞培养 、 原生质体培养 、悬浮培养等类型。 2、植物组织培养的发展分为三个阶段:萌芽阶段 、 奠基阶段 和 快速发展和应用阶段 。 3、1902年, Haberlandt提出了植物细胞 “全能性”学说 ,1934年,White出版了植 实用大全标准文档 物组织培养手册 从而使植物组织培养为一门新兴学科。 二、名词解释: 1、植物组织培养(plant tissue culture):是指通过无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。由于培养材料已脱离了母体,又称为植物离体培养( Plant culture
46、 in vitro)。 2、脱分化(dedifferentiation):由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。 3、再分化(redifferentiation):脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官,这一过程称为植物细胞的再分化。 4、外植体(explant):由活体(in vivo)植物体上切取下来的,用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等 5、愈伤组织(callus):原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞,多在植物体切面上产
47、生。 三、问答题: 1、简述植物组织培养的理论依据? 植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说,即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组,并具有发育成为完整植株的潜在能力。 2、植物组织培养有哪些特点? (1)培养条件可以人为控制 (2)生长周期短,繁殖率高: (3)管理方便,利于工厂化生产和自动化控制: 3、植物组织培养的分类? (1) 根据培养对象不同:组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等;( 2) 根据培养物培养过程:初代培养、继代培养; (3) 根据培养基的物理状态:固体培养、液体培养。 4、植物组织培养主要应用于哪些方面? (1)快速繁殖 运用组织培养的途径,一个
48、单株一年可以繁殖几万到几百万个植株; (2)种苗脱毒 针对病毒对农作物造成的严重危害,通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗; (3)培育和创制新品种 利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功,从而育成一些罕见的新物种; (4)大量生产次生代谢物质 通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类,其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平。植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累,后来居上。 (5)植物种质资源的离体保存 植物组织培养结合超低温保存技术,可以给植物种质保存带来一次大的飞跃。因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子,但
49、所占的空间仅为原来的几万分之一,而且在-193度的液氮中可以长时间保存,不像种子那样需要年年更新或经常更新。 (6)人工种子 人工种子便于贮藏和运输,适合机械化播种;繁殖速度快,不受季节和环境限制,利于工厂化生产; 体细胞胚由无性繁殖体系产生,可以固定杂种优势。 植物组织培养复习题(习题) 一、名词解释 愈伤组织:在培养基上由培养物产生的无序生长且没有一定结构的薄壁细胞团。 外植体:在组织培养中,由植物体上取下来进行离体培养的那部分组织或器官. 脱分化:由高度分化的植物器官,组织或细胞经过离体培养,产生愈伤组织的过程。 半连续培养:利用培养罐进行大量细胞培养的一种方式。 无性系变异:由任何形式
50、的细胞培养所产生的植株所表现出来的差异。 实用大全标准文档 胚状体:在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚相类似的结构。 看护培养:用同种或异种材料的愈伤组织作为看护组织培养细胞的一种方法。 无融合生殖:由配囊中卵细胞以外的其他细胞发育成的单倍体植株。 种质:亲代通过生殖细胞活体细胞直接传递给子代并决定固有生物性状的遗传物质。 悬浮培养:将游离的植物单细胞或小细胞团,按一定的细胞密度在受到不断拉动或摇动的液体培养基中进行培养的一种方式。 早熟萌发:在培养后迅速萌发为幼苗,不继续进行胚状生长,超过正常发育阶段。 选择压:在2个相对性状之间
51、,一个性状被选择而生存下来的优势。 细胞全能性:任何有完整细胞核的植物细胞具有全部的遗传信息,在一定条件下,均具有分化,发育成完整植株的潜在能力。 条件培养基:在培养集中加入高密度的细胞进行培养,经过一段时间后,这些细胞向培养基中分泌一些促进细胞生长的活性物质,使培养基条件化,使原来在合成培养基上不能分裂的细胞发生分裂。 离体授粉:将未授粉的胚珠,子房或柱头从母体上分离下来,进行无菌培养,并通过一定的方式授给 无菌花粉,使其在试管内实现受精的技术。 同步化培养:培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段。 植板率:(每个平板上形成的细胞团数 / 每个平板上接种的细胞总数) * 100%、
52、 继代培养:对来自于外植体所增殖的培养物通过更换新鲜培养基及不断切割分离进行的连续多代的培养。 无性系:由任何形式的细胞培养所产生的植株。 细胞融合:在自发或人工诱导下,两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。 二、填空题 1、根据外植体的的种类不同,组织培养可以分为组织培养、细胞培养、器官培养、原生质培养和胚胎培养五种类型。根据培养基的物理性状,组织培养可以分为固体培养基和液体培养基两种类型。 2、对高温高压条件下易降解变质的物质,在灭菌时应采用过滤灭菌方法。 3、植物组织培养过程中,细胞分裂素与生长素比值(CTK/IAA)高低决定了器官的分化类型,其比值高有利于芽,比值低有利于
53、根,而两者相等时则促进愈伤组织形成。 4、在细胞悬浮培养过程中,细胞的生长周期呈“S”型曲线,可分为五个阶段,分别是延滞期、对数生长期、直线生长期、缓慢期和静止期。 5、酒精和升汞是两种常用的外植体表面消毒剂,它们的使用浓度分别为70-75%和 0.1-1%;消毒时间的范围分别为 0.2-2min和 2-15min。 6、单细胞培养的方法有平板培养法、看护培养法、微室培养法和条件培养基培养法等四种方法。 7、在细胞悬浮培养时,实现培养细胞同步化的方法有饥饿法和抑制法。 8、实现细胞全能性的条件是组织或器官解离和给予所需的营养物质。 9、常用于诱导愈伤组织的植物激素是2,4-D。 10、用来做茎
54、尖脱毒的外植体大小一般为0.10.25mm。 11、在冷冻保存中,对植物材料伤害最小的防护剂一般是二甲基亚砜(DMSO)。 12、支撑植物组织培养作为一门技术的两个重要模式是培养基模式和激素调控模式。 13、无病毒植株的鉴定方法主要有直接测定法、指示植物法、抗血清鉴定法、核酸分析法和电镜显微检测法等 14、用于细胞活力的测定方法有 TTC、FDA和 伊凡蓝染色法。 实用大全标准文档 15、通过离体培养可获得单倍体植株的材料有花粉和未受精胚珠。 16、用来做茎尖脱毒的外植体大小一般为小于0.3mm。 17、植物离体快速繁殖的方式中,遗传性状稳定的有器官型、短枝发生型。 18、典型的人工种子由体细
55、胞胚、人工胚乳和人工种皮构成。 19、原生质体的分离纯化过程中要添加渗透压稳定剂和原生质膜稳定剂提高原生质产量和活力,属于质膜稳定剂的有葡聚糖硫酸钾 、CaCl2。 20、根据不同植物的生长发育特点,快速繁殖的途径有短株发生型、器官发生型、胚胎发生型和原球茎发生型。 21、组织培养中碳源的主要作用是合成有机物和维持合适的渗透压。 22、目前用于细胞融合的方法主要有自发融合和诱导融合两种。 23、原生质体的纯化方法有沉降法、悬浮法和界面法。 24、悬浮培养中细胞生长的测定方法:细胞计数、细胞密实体积(PCV)及细胞总体积、细胞鲜重和干重、细胞有丝分裂的指数。 25、振荡培养的目的:改善液体培养基中培养材料的通气状况。 26、单倍体育种的主要有优点是:缩短育种年限、后代不出现性状分离。 27、常用于诱导胡萝卜胚性愈伤组织的植物激素是生长素,胚状体的形成则是在细胞分裂素的促进下。 28、在组织培养的发展史上,1958年Steward报道了胡萝卜细胞悬浮培养;1978年Melchers报道了马铃薯和番茄的融合培养;1960年Cooking报道了诱导鸡红细胞与酵母细胞融合培养。 29、在胚乳培养中,由裸子植物胚乳发育成的植株为单倍体;被子植物胚乳发育成的植株为三倍体。 30、组织培养中的突变可
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