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文档简介
1、1,病原微生物学实验指导,实验教学中心 成 静,2,实验一 细菌的基本形态与特殊结构,实验目的: 1、掌握革兰染色法和细菌的基本形态 2、熟悉细菌涂片的制备 3、掌握细菌特殊结构观察 4、掌握显微镜油镜的使用和保护,3,实验内容,1、临床微生物学实验室规则 2、实验室意外的紧急处理办法 3、实验时的注意事项 4、细菌形态学检查: 革兰染色和细菌基本形态观察 特殊结构观察,4,临床微生物学实验室规则,1、进入实验室必须穿白大衣,离室时脱下反折,必要时戴口罩操作。 2、不必要物品勿带入实验室,必要的物品应放在指定区域。 3、实验室内禁止饮食、抽烟,不得高声谈笑或随意走动。 4、用过的有菌器材必须放
2、在指定位置,小心处理传染材料、培养物和污染物。 5、避免任何有菌材料的溅出,如不慎污染工作台、人、衣服、地面等,应及时报告老师并处理。 6、实验结束后物归原处,用消毒液浸泡、洗手,打扫卫生的同学清洁和消毒桌面、地面,并将实验器材送到准备室和消毒间,关闭水电门窗后离开实验室,5,实验室意外的紧急处理办法,1、皮肤破损 2、烧伤 3、化学药品腐蚀伤 4、菌液误入口中 5、菌液流洒桌面 6、火警,6,实验时的注意事项,一、严格遵循实验指导 二、认真完成实验操作 三、充分利用参考资料,7,细菌形态学检查,8,革兰染色法和细菌的基本形态,器材和试剂: 菌种:金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌 培养基:普通琼脂平
3、板 试剂:革兰染液 其他:载玻片、生理盐水、酒精灯、火柴等,9,革兰染色法和细菌的基本形态,细菌涂片的制作 涂片 干燥 固定,10,革兰染色法,方法 1、初染:将结晶紫染液加在制好的涂片上,染色1分钟,用细水冲洗,甩去积水。 2、媒染:加卢戈碘液,染1分钟,用细水冲洗,甩去积水。 3、脱色:加95%酒精数滴,轻摇玻片数秒,使均匀脱色,至无紫色淌下,用细水冲洗,甩去积水。 4、复染:加稀释复红染1分钟,用细水冲洗,甩去积水。用吸水纸吸干后,在涂片上滴加镜油,置油镜下检查,11,革兰染色法,结果观察(油镜下观察,放大1000倍): 1、细菌的基本形态及大小:球菌、杆菌、弧菌 2、细菌的排列方式:散在、葡萄状、链状、成双、四叠、八叠 3、细菌的染色性:阳性呈紫色、阴性呈红色 4、细菌的特殊结构:荚膜、芽孢,不能看到鞭毛,12,大肠杆菌,金葡菌,13,霍乱弧菌,14,链球菌,15,革兰阴性双球菌,16,革兰染色法,思考题: 1、原理 2、意义 3、注意事项,17,特殊结构观察,芽孢:破伤风杆菌(革兰染色法) 荚膜:肺炎双球菌(革兰染色法) 鞭毛:变形杆菌(镀银染色法,18,破伤风芽孢
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