专题一基因工程习题

1、精品文档 专题一基因工程练习 1 金茶花是中国特有的观赏品种，但易得枯萎病，使其观赏价值降低。科学家在某种植物中找到了抗枯 萎病的基因，用转基因技术培育出了抗枯萎病的新品种金茶花。据下图完成(1)(5)题: 13欢迎下载 带有抗病基因 的某植物细胞 (1) 和结合能形成 ，常用的酶有 ;其能结合形成 ，最重要的原因是 和经酶处理后具有 。 (2) 形成的过程是 ，它是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心， 一个的组成，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子及 等。 (3) 若过程为将目的基因导入受体细胞，则将此抗病基因导入植物细胞采用最多的方法是 ;除此之外，转基因植物还可以通过 和两种方

2、法获得。 (4) 在t过程中，获得抗病基因的金茶花细胞将经历 和过程后才能获得 。 (5) 经培养长成的植株 具备了抗病性，这说明。 抗枯萎病金茶花培育成功说明一种生物的基因表达系统能够识别来自另一种生物的DNA的 0.5卩g,所以价格昂 (1)(3)题。 2 干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血只能提取 贵。现在美国加利福尼亚州的基因公司用如下图的方式生产干扰素。阅读材料完成 干扰 盍棊因 错干扰素基 细袍细菌质粒因的质粒 (1)干扰素基因在基因工程中称为 。用技术可使获得的基因迅速扩增。 此基因与细菌的质粒结合，构建基因表达载体要用 处理基因和质粒特定核苷 酸之间的 ，

3、使两者露出相同的黏性末端，再用 将二者连接成基因表达载体，然 后将其导入酵母菌体内。酵母菌在基因工程中称为 (3) 科学家在培养转基因植物时，常用 中的质粒做载体。除了质粒外，基因工程的载体还 有。 3 下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图完成下列问题。 人胰闊 B细胞 /wv 胰岛素A/ZW mRNA /W 皿5处大量 f他杯处的人 大肠杆菌R 胰素胰素 人岛人岛 (1) 能否利用人的皮肤细胞来完成过程？ ,为什么？ (2) 过程一定要用到的酶是 酶，过程 在细胞内需要的酶是 酶。 (3) 在利用 A B获得 C的过程中，一般用 切割 A和B,使它们产生 ，再加入 ，才

4、可形成 C。 (4) 为使过程更易进行，可用 (填药剂)处理D。 抗虫棉。其过程大致如图所示。根 4 科学家通过基因工程方法，培育了能抗棉铃虫的棉花植株 据题意，回答下列问题。 苏云金 芽抱杆莆 T-DNA Tiffin 转人 /恂建基因 表达载体 基因 感 墙养 、日的菇因 MATS 色悴ON A中 郴株细趣 细织 (1) 基因工程的操作程序主要包括的四个步骤是：、 、 、 。 (2) Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA把目的基因插入 Ti质粒的T-DNA中是利用T- DNA的特点。 (3) Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为。 (4) 将目的

5、基因导入受体细胞的方法有很多种，该题中涉及的是 目的基 因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是 这需要通过检测才能知道，检测采用的方法是 5 . a 1一抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾 病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射入 a i-抗胰蛋白酶来缓解症状。据此完成 题。 (1) 图1表示获取人a i 一抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列冋题: 1cimBNA 方法i询曲 Ki a 过程是在 载休 餌2 昱厶*餐情卵一转基因羊 4衣験简邛井因 酶的作用下完成的，该酶的作用 c过程称为 ，该过程需要的原料是 。 要确定获得的基

6、因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用 技术检 测该基因的碱基序列。 (2) 利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人ai抗 胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2所示。 获得目的基因后，常利用 技术在体外将其大量扩增。 载体上绿色荧光蛋白(GEP)基因的作用是便于 基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有。 6 .阅读下面的资料并回答问题。 资料一 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”；科学家采用农杆 菌转化法培育出转基因烟草。 资料二 T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的

7、基因进行了改造，使其表达的T4溶 菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第 97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了 T4溶菌酶的耐热性。 (1)资料一属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用 法。构建基 因表达载体常用的工具酶是 。在培育有些转基因植物时 常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是 资料二中的技术属于 工程的范畴，该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因 修饰或基因合成，对 进行改造，或制造一种 的技术。在该实例中，引起T4溶 菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的 序列发生了改变。 7在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较

8、好的应用价值。下图所示 是获得转基因萬苣的技术流程，请据图回答下列问题。 质粒A 抗冻蛋白 寻人 7题图 题图 (1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和 (2)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动 子、终止子、 等,这样才能构成一个完整的基因表达载体。 如果受体细胞C是 上壤农杆菌，则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的 使目的基因进入受体细胞C2,并将其插入受体细胞C2中的 上，使目的基因的 遗传特性得以稳定维持和表达 ，形成转基因萬苣。经过程获得的转基因萬苣中的目的基因是否表达，在分 子水平上可用 法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产

9、 品，转基因萬苣培育成功。 &如上图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoR I、BariH I的酶切 位点，amp为青霉素抗性基因，tet R为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的 基因的两端分别有包括 EcoR I、BartH I在内的多种酶的酶切位点。据图回答下列问题。 (1)将含有目的基因的 DNA与质粒表达载体分别用 EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由 两个DNA片段之间连接形成的产物有 、3 种。 (2) 用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。接种到含青霉素的培养基中，能生 长的原核宿

10、主细胞所含有的连接产物是 。 之后将这 些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物 是；能生长的原因是 (3) 目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ,_ 其合成的产物是 。 在上述实验中，为了防止目的基因和质粒自身环化，酶切时应选用的酶 9、图1表示含有目的基因 D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结 构和部分碱基序列。现有 Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I 4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序 列和酶切位点分别为 CCGG &GATCCGATC CCCGGG请回答下列问题。 H的墓因。 | &丄以心処

11、!風丛丛已怙由0 CCTAGGOGGCCC GGGCCC CCTAGG 1111111 L1 I!山 1订1_讥1 i 1 IL1 1 1 1 1 1 1 I 1 卜 MEbp * (1) 图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。 若用限制酶Sma I完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度 为。 (3) 若图1中虚线方框内的碱基对被 TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图 1及其对应的DNA片段，用限制酶SmI完全切割，产物中共有 种不同长度的DNA片段。 (4) 若将图2中质粒和目的基因 D通过同种限制酶处理后进行连接 ，形成重组质粒，那么

12、应选用的限制酶 是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 的 培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正常表达，其最可能的原因 是 O I、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位 10. 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈 1 点请回答下列问题: RamH 1 Kind Til ctjK 1 Sms 1 识别序列及 切割直点 G*GATCC CCTAGG 1 TTCGA/ GA ATT C CT TAA CCCjGC GGGCC JJifldlll (1) 一个如图1所示的质粒分子经 Smal切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团.

13、 (2) 若对图中质粒进行改造，插入的Smal酶切位点越多，质粒的热稳定性越 . (3) 用图中的质粒和外源 DNA构建重组质粒，不能使用 Srna I切割，原因是 . (4) 与只使用EcoR I相比较，使用 BamH和Hind川两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可 以防止。 (5) 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 (6) 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 (7) 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变 体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 11、下表是几种限制酶识别序列及其切

14、割位点 ，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割 位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题。 限制酶 识别序列及 切割位点 BanH I Bcl I Sau3A I Hind 川 GGATCC CCTAGG TGATCA ACTAGT G atc CTAG AAGCTT TTCGAA Hind 1 JR动子 目的墓因 ffi2 用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基 因片段,通过酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处 于态的大肠杆菌。 (2) 为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加 ,平板上长出的菌 落,常用PC

15、R鉴定,所用的引物组成为图 2中。 若BanH I酶切的DNA末端与Bel I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列 为,对于该部位,这两种酶 (填“都能”、“都不能”或“只有一种 能”)切开。 若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得 种大小不同的DNA片段。 12. 干扰素是能够抑制多种病毒复制的抗病毒物质.科学家利用基因工程技术从人的T淋巴细胞中提 图丨ra 2 取干扰素基因转入羊的DNA中，培育出羊乳腺生物反应器，使羊乳汁中含 有人体干扰素.请回答： (1) 研究人员用DNA测序仪显示了基因组的某 DNA片段一条链的碱基排列 顺序图片.其中图1的碱基排列顺序已经解读，其顺序是：

16、GGTTATGCGT青 解读图2显示的碱基排列顺序： 。 (2) 科学家从相关基因组中获取了干扰素基因，并采用 技术对干扰素基因进行扩增， 然后将干扰素基因与质粒等载体组合形成了 。 (3) 科学家将干扰素基因与羊 基因的 等调控组件重组在一起，通过 等方法，导入羊的 细胞中，通过系列操作培育转基因动物。 (4) 如何检测和鉴定目的基因已被成功导入羊体内？请写出两种方法。 13农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗 病棉花品系.请回答下列问题： (1 )要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用 进行切割切割的部位是两个核苷 酸之间的 ，假如运载体被切

17、割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病 基因分子末端是 G7 C. YTTTA氏-AAATC -CTTAA -AATCC G-T (2) 切割完成后，采用 酶将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称 为。 (3) 将连接得到的 DNA分子导入棉花细胞常用的方法是 ，利用植物细胞具有的 性进行组织培养. （4） 为了确定抗病基因是否插入到棉花染色体DNA上，通常才用 技术，并用 标记目的基因做探针. （5）该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是（） A.淀粉 B .脂类 C .蛋白质 D .核酸 E .抗生素 （6） 烟草中的抗病基因可以嫁接到棉花的DNA上，原因是： 14.

18、 如图甲是目的基因 EPSPS（4.0kb , 1kb=1000对碱基）与pUC18质粒（2.7kb ）重组的示意图.图 中Ap是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的 EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧， 其控制合成某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色，最终能在含无色染料 X-gal的培养基上将含该基因的菌 落染成蓝色.（图乙中深色圆点即为蓝色菌落） （1） 将处理后的目的基因 EPSPS与 pUC18质粒、DNA连接酶混合后，再与某菌种混合，若要从混合物中筛 选出含EPSPS基因的菌株，在图乙的培养基中必须加入 请判断图乙中所出现的白 色和蓝色两种菌落中，何种颜色菌落会含有

19、重组质粒 . （2） 现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为 kb_ 和_kb_ 的片段，则可以 判断该质粒已与目的基因重组成功.（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对 忽略不计）. （3）假设 EPSPS基因已被成功转移到植物 F中，但植物 F仍没有表现出抗性，分析可能的原因 是 . 15. 转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其 培育过程如图所示（至代表过程，A至C代表结构或细胞）： (1) 图中过程用到的酶是 ，所形成的B叫做 (2) 过程常用 处理农杆菌，使之成为 细胞，利于完成转化过程。 (3)

20、 图中过程需要用到的激素是 (4) 在分子水平上，可采用 的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原. 16 如图是利用牛乳腺生产人生长激素的流程图，回答相关问题. 人的 细昭 c 从牛乳汁屮槪 曲【城鞄 (1) 图中B过程需要 酶是 含有启动子的是 (填“目的基 因I”或“目的基因n” ) (2) 大量扩增目的基因可采用的方法是 。 (3) 为牛的 , b过程常用的方法为 图示过程中，为使人生长激素基 因在牛乳腺细胞中表达，需将该基因与 等调控组件重组在一起. (4) 检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用 法. 17、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马

21、铃薯可使动物获得免疫力。以 下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。 精品文档 m i辑蛊囚*杠沆皿由 W2 利杨对埼模扳歼令示意舸 表1几种限制酶识别序列及切割位点表 限制酶 Alu I EcoRI Pst I Smal 切割位点 AGJ CT TCf GA GJ AATTC CTTAA? G CTGCA G GT ACGTC CCQ GGG GGG ccc 请根据以上图表回答下列问题. （1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶, 其最主要的特点是 （2）图1步骤所用的DNA连接酶对所连接的 DNA两端碱基序列是否有专一性要求? （3）

22、为将外源基因转入马铃薯，图1步骤转基因所用的细菌B通常为。 （4） 对符合设计要求的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标 示的酶切位点和表 2所列的识别序列，对以下酶切结果做出判断。 采用EcoRI和Pst I酶切，得到 种DNA片段。 采用EcoRI和Smal酶切得到 种DNA片段。 18、ch1L基因是蓝细菌（蓝藻）DNA上控制叶绿素合成的基因，为研究该基因对叶绿素合成的控制，需 要构建该种生物缺失 ch1L基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答问题。 质粒币组质料人 讯组基因 无hl【.嗨同 甲 (1) 与真菌相比较，蓝细菌在结构上最主要的

23、特点是 (2) 过程中均使用的工具酶有 。 (3) 构建重组质粒 B 在整个操作过程中的目的是 和。 (4) 若含有ch1L基因的DNA片段和选用的质粒上的限制酶切割位点如图乙所示。请回答问题: AchlLiE I, n i 4 W解m酶 X列 17欢迎下 构建含ch1L基因的重组质粒 A时，应选用的限制酶是 ，对进 行切割。 同时用酶1和酶4切割图乙中的质粒，则产生含有1500对碱基和8200对碱基的两种片段；用图中四种 酶同时切割此质粒，则产生含有500对碱基和8200对碱基的两种片段；若换用酶1和酶3同时切割此质 粒，则产生的片段是。 (5) 可用PCR术对ch1L基因扩增时，需一对引物 I、II，从理论上推测，该 DNA分子通过PCRT增四 次，产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为。 3 b 5 19. 为扩