酶工程化学修饰PPT学习教案

1、会计学1 酶工程化学修饰酶工程化学修饰 第1页/共70页 第2页/共70页 延长导致生产工艺的技术革新延长导致生产工艺的技术革新 和改进。和改进。 第3页/共70页 第4页/共70页 第5页/共70页 第6页/共70页 第7页/共70页 第8页/共70页 第9页/共70页 第10页/共70页 第11页/共70页 第12页/共70页 第13页/共70页 第14页/共70页 第15页/共70页 第16页/共70页 第17页/共70页 第18页/共70页 第19页/共70页 酶的表面修酶的表面修 饰饰 第20页/共70页 第21页/共70页 第22页/共70页 第23页/共70页 第24页/共70页

2、 第25页/共70页 第26页/共70页 第27页/共70页 加加H2O 疏水尾部疏水尾部 亲水头部亲水头部 加酶液加酶液 S P E E E 图：反相胶团的结构和酶的分布图：反相胶团的结构和酶的分布 第28页/共70页 第29页/共70页 第30页/共70页 第31页/共70页 第32页/共70页 第33页/共70页 第34页/共70页 第35页/共70页 （三）反应体系中酶与修饰（三）反应体系中酶与修饰 剂的比例剂的比例 第36页/共70页 辅因子等。酶分子的形状、大辅因子等。酶分子的形状、大 小以及寡聚酶的亚基组成。小以及寡聚酶的亚基组成。 第37页/共70页 第38页/共70页 第39

3、页/共70页 第40页/共70页 第41页/共70页 第42页/共70页 第43页/共70页 第44页/共70页 第45页/共70页 第46页/共70页 第47页/共70页 第48页/共70页 第49页/共70页 第50页/共70页 天然酶和修饰酶的热稳定性比较天然酶和修饰酶的热稳定性比较 酶酶 修饰剂修饰剂 修饰酶修饰酶 天然酶天然酶 处理条件处理条件 (/(/时间时间) ) 残留酶活残留酶活(%)(%) 腺苷脱氢酶腺苷脱氢酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 过氧化氢酶过氧化氢酶 溶菌酶溶菌酶 尿激酶尿激酶 糜蛋白酶糜蛋白酶 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 人血清白

4、蛋白人血清白蛋白 肝肝 素素 37/100min 37/100min 100/30min 100/30min 50/10min 50/10min 100/30min 100/30min 37/48h 37/48h 37/24h 37/24h 70 70 100 100 46 46 64 64 40 40 90 90 20 20 99 99 80 80 0 0 95 95 50 50 第51页/共70页 第52页/共70页 天然酶与修饰酶在生物体内半衰期的比较天然酶与修饰酶在生物体内半衰期的比较 酶酶 修饰剂修饰剂半衰期或酶活残留率半衰期或酶活残留率(%)/时间时间 天然酶天然酶修饰酶修饰酶 羧

5、肽酶羧肽酶C 精氨酸酶精氨酸酶 -淀粉酶淀粉酶 谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶-天门天门 冬酰胺酶冬酰胺酶 L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 尿酸酶尿酸酶 -葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 超氧化岐化酶超氧化岐化酶 尿激酶尿激酶 氨基己糖苷酶氨基己糖苷酶A 精氨酸酶精氨酸酶 酰苷脱氨酶酰苷脱氨酶 L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 过氧化氢酶过氧化氢酶 右旋糖酐右旋糖酐 右旋糖酐右旋糖酐 右旋糖酐右旋糖酐 糖肽糖肽 聚丙氨酸聚丙氨酸 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 PVP PEG PEG PEG PEG PEG 3.5 h 1.4 h 16%/2 h 1 h 3 h 4 h 10 min 6 min

6、 20 min 5 min 1 h 30min 2 h 0%/6 h 18%/3 h 17 h 12 h 75%/2 h 8.2 h 21 h 20 h 3 h 4 h 90 min 35 min 12 h 28 h 24 h 10%/8 h 65%/3 h 第53页/共70页 第54页/共70页 第55页/共70页 第56页/共70页 通过化学修饰后修饰酶的抗原性变化通过化学修饰后修饰酶的抗原性变化 酶酶 修饰剂修饰剂修饰酶的抗原性变化修饰酶的抗原性变化 胰蛋白酶胰蛋白酶 过氧化氢酶过氧化氢酶 精氨酸酶精氨酸酶 酰苷脱氨酶酰苷脱氨酶 尿酸酶尿酸酶 谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶- -天门冬酰胺酶天门冬

7、酰胺酶 超氧化岐化酶超氧化岐化酶 L-L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 超氧化岐化酶超氧化岐化酶 L-L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 - -葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 尿酸酶尿酸酶 尿酸氧化酶尿酸氧化酶 核糖核酸酶核糖核酸酶 链激酶链激酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 L-L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG PEGPEG 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 PEGPEG 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 PEGPEG 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 聚聚DL-DL-丙氨酸丙氨酸 消除消除 消除消除 消除消除 消除

8、消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 消除消除 降低降低 消除消除 降低降低 降低降低 第57页/共70页 第58页/共70页 第59页/共70页 第60页/共70页 第61页/共70页 天然酶与修饰酶的最适天然酶与修饰酶的最适pH 酶酶修饰酶修饰酶天然酶天然酶修饰剂修饰剂 糜蛋白酶糜蛋白酶 猪肝尿酸酶猪肝尿酸酶 吲哚吲哚-3 -链烷羟化酶链烷羟化酶 猪肝尿酸酶猪肝尿酸酶 产朊假丝酵母尿酸酶产朊假丝酵母尿酸酶 白蛋白白蛋白 PEG PEG 聚丙烯酸聚丙烯酸 肝肝 素素 10.57.4 - 8.5 5.0 - 5.5 9.0 8.8 3.5 8.2

9、 8.2 8.09.0 第62页/共70页 第63页/共70页 第64页/共70页 第65页/共70页 天然酶与修饰酶的Km的对比 酶酶 修饰剂修饰剂 Km 天然酶天然酶修饰酶修饰酶 苯丙氨酸解氨酶苯丙氨酸解氨酶 尿酸酶尿酸酶(猪肝猪肝) 产朊假丝酵母尿酸酶产朊假丝酵母尿酸酶 L-天门冬酰胺酶天门冬酰胺酶 尿酸酶尿酸酶 腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶 吲哚吲哚-3-链烷羟化酶链烷羟化酶 吲哚吲哚-3-链烷羟化酶链烷羟化酶 尿酸氧化酶尿酸氧化酶(猪肝猪肝) 产朊假丝酵母尿酸氧化酶产朊假丝酵母尿酸氧化酶 精氨酸酶精氨酸酶 谷氨酰氨酶谷氨酰氨酶-天门冬酰氨酶天门冬酰氨酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 L-天门冬酰氨酶天门

10、冬酰氨酶 PEG PEG PEG 白蛋白白蛋白 白蛋白白蛋白 右旋糖酐右旋糖酐 聚丙烯酸聚丙烯酸 聚顺丁烯二酸聚顺丁烯二酸 PEG PEG PEG 糖肽糖肽 右旋糖酐右旋糖酐 聚丙氨酸聚丙氨酸 6 10-5 2 10-5 5 10-5 4 10-5 3.5 10-5 3 10-5 2.4 10-6 2.4 10-6 2 10-5 5 10-5 6 10-3 1.2 10-4 7 10-5 5.6 10-5 6.5 10-5 8 10-5 7 10-5 7 10-6 3.4 10-6 6.9 10-5 5.6 10-5 1.2 10-2 不变不变 不变不变 不变不变 第66页/共70页 第67页/共70页 天然酶和修饰酶抗失活因子能力比较天然酶和修饰酶抗失活因子能力比较 酶酶抗抑制剂抗抑制剂抗蛋白酶抗蛋白酶修饰剂修饰剂抗失活剂抗失活剂 过氧化氢酶过氧化氢酶 核糖核酸酶核糖核酸酶 溶菌酶溶菌酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 - - 葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶 尿激酶尿激酶 右旋糖苷右旋糖苷 右