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文档简介
1、第六章第六章 转基因小鼠概述转基因小鼠概述 转基因转基因鼠是除了固有的基因组外,小鼠体鼠是除了固有的基因组外,小鼠体 内还有一个或以上外来转入基因,它能表内还有一个或以上外来转入基因,它能表 达和体现转入基因的功能,实现特定目的。达和体现转入基因的功能,实现特定目的。 转人转人IgIg基因技术的一个基因技术的一个难点难点是需要相对大是需要相对大 的基因片段至整个基因座。的基因片段至整个基因座。 酵母人工染色体技术可以克隆和修饰数酵母人工染色体技术可以克隆和修饰数 千千kbkb的的DNADNA 转基因技术可以将大片段转基因技术可以将大片段DNADNA转入相应的转入相应的 哺乳动物细胞哺乳动物细胞
2、 制备基因敲除小鼠的主要步骤制备基因敲除小鼠的主要步骤 1 1、获得外源目的基因、获得外源目的基因 2 2、靶向载体、靶向载体 3 3、构建同源打靶重组子、构建同源打靶重组子 4 4、小鼠、小鼠ESES细胞的准备细胞的准备 5 5、打靶重组子导入、打靶重组子导入ESES细胞及药物选择细胞及药物选择 6 6、靶向基因、靶向基因-ES-ES细胞转入胚泡细胞转入胚泡 7 7、ES-ES-胚胎移入假性怀孕的雌性受体鼠胚胎移入假性怀孕的雌性受体鼠 及发育及发育 8 8、嵌合小鼠的近亲交配、嵌合小鼠的近亲交配 基本流程 转基因小鼠的应用转基因小鼠的应用 基因表达基因表达 基因调节基因调节 胚胎发育胚胎发育 人类疾病的动物模型人类疾病的动物模型 检验基因治疗药物检验基因治疗药物 从转化的特殊细胞类型在体内建立细胞系从转化的特殊细胞类型在体内建立细胞系 组织特异性诱导基因的表达组织特异性诱导基因的表达 组织特异性基因删除组织特异性基因删除 研究毒性基因特异性细胞消除的作用研究
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