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文档简介
1、第十一章第十一章 革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌 第一节第一节 肠杆菌科肠杆菌科 概念:是一大群生物学性状相近的革兰阴性概念:是一大群生物学性状相近的革兰阴性 杆菌。杆菌。 分类及临床意义:临床常见有分类及临床意义:临床常见有15个菌属,占个菌属,占 临床分离菌总数的临床分离菌总数的50%,和,和G-总数的总数的80%; 近近50%的败血症、的败血症、70%的泌尿道感染和大量的泌尿道感染和大量 的肠道感染均由肠杆菌科细菌引起的肠道感染均由肠杆菌科细菌引起 与医学关系密切的肠道杆菌与医学关系密切的肠道杆菌 条件致病菌条件致病菌 埃希菌属埃希菌属 变形杆菌属变形杆菌属 克雷伯
2、菌属克雷伯菌属 肠杆菌属肠杆菌属 沙雷菌属沙雷菌属 枸橼酸菌属枸橼酸菌属 致病菌菌致病菌菌 致病性大肠埃希菌致病性大肠埃希菌 志贺菌属志贺菌属 沙门菌属沙门菌属 耶尔森菌属耶尔森菌属 肠道杆菌共同特性肠道杆菌共同特性 形态染色:均为革兰阴性杆菌,无芽孢,形态染色:均为革兰阴性杆菌,无芽孢, 有菌毛,多数有鞭毛有菌毛,多数有鞭毛(除外志贺菌属、克除外志贺菌属、克 雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭无鞭 毛毛),少数有荚膜少数有荚膜 培养特性:需氧、兼性厌氧;营养要求培养特性:需氧、兼性厌氧;营养要求 不高;光滑型菌落;不高;光滑型菌落; 常用培养基常用培养基 选择性培养
3、基:选择性培养基: SS平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌 绿、硫代硫酸钠等绿、硫代硫酸钠等 Mac平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐等平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐等 中国蓝平板:含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指中国蓝平板:含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指 示剂、示剂、 EMB平板:含乳糖、伊红和美蓝指示剂平板:含乳糖、伊红和美蓝指示剂 选择性平板的特点选择性平板的特点 均含有乳糖和酸碱指示剂:均含有乳糖和酸碱指示剂: 细菌分解乳糖产酸,使培养基细菌分解乳糖产酸,使培养基pH降低,降低, 指示剂呈酸性变色,指示剂不同,菌落指示剂呈酸性变色,指示剂不同,菌落 呈现不同
4、的颜色。分解乳糖的细菌呈有呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有 色菌落,不分解乳糖的细菌为无色菌落色菌落,不分解乳糖的细菌为无色菌落 含有不同的抑制剂:含有不同的抑制剂: 对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的 抑制作用,因此可以选择性的培养肠道抑制作用,因此可以选择性的培养肠道 致病菌。致病菌。 选择平板细菌生长现象选择平板细菌生长现象 双糖铁培养基(双糖铁培养基(KIA) 配方:含蛋白胨、牛肉膏、配方:含蛋白胨、牛肉膏、 氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸 亚铁、琼脂、酚红、乳糖亚铁、琼脂、酚红、乳糖1 、 葡萄糖葡萄糖 用途:主要用于观察肠杆菌用
5、途:主要用于观察肠杆菌 科细菌是否分解乳糖、葡萄科细菌是否分解乳糖、葡萄 糖产酸产气、是否产生糖产酸产气、是否产生H2S。 KIA结果观察:结果观察: 发酵葡萄糖:底层呈酸性反应(黄色),发酵葡萄糖:底层呈酸性反应(黄色), 斜面为碱性反应(红色),若发酵葡萄糖斜面为碱性反应(红色),若发酵葡萄糖 产酸产气,底层同时有气泡产酸产气,底层同时有气泡 发酵葡萄糖和乳糖:底层和斜面均呈酸性发酵葡萄糖和乳糖:底层和斜面均呈酸性 反应(黄色)反应(黄色) 产生产生H2S:培养基变黑:培养基变黑 1.未接种细菌未接种细菌 3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性 ( A
6、A) 2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(AA) 4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性 (KA) 5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性 (KA) 生化反应:生化反应: 氧化酶;触酶;硝酸盐还原试验发酵氧化酶;触酶;硝酸盐还原试验发酵 葡萄糖葡萄糖 非致病菌多数分解乳糖,致病菌多数不分解非致病菌多数分解乳糖,致病菌多数不分解 乳糖乳糖 其他生化反应:其他生化反应:KIA、IMViC、MIU 肠杆菌科定科试验主要项目肠杆菌科定科试验主要项目
7、是革兰阴性杆菌、是革兰阴性杆菌、 触酶阳性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阳性。触酶阳性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阳性。 抗原结构抗原结构 O抗原:化学成分为脂多糖抗原:化学成分为脂多糖 H抗原:化学成分为蛋白质抗原:化学成分为蛋白质 表面抗原:化学成分为多糖表面抗原:化学成分为多糖(埃希菌属称为埃希菌属称为K抗抗 原;沙门菌属称为原;沙门菌属称为Vi抗原;志贺菌属称为抗原;志贺菌属称为B抗抗 原)原) O抗原、抗原、H抗原为血清分群分型的依据抗原为血清分群分型的依据 表面抗原可阻抑表面抗原可阻抑O抗原、抗原、H抗原凝集,加热可抗原凝集,加热可 解除。解除。 遗传变异:遗传变异:S-R变异、变异
8、、H-O变异变异 抵抗力抵抗力 对胆盐,煌绿耐受对胆盐,煌绿耐受 临床意义:临床意义: 致病物质:菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素致病物质:菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素 传染途径:肠道传染、肠道外传染传染途径:肠道传染、肠道外传染 所致疾病:所致疾病: 肠道致病菌肠道致病菌:以以肠内感染肠内感染为主,腹泻为共显症状,为主,腹泻为共显症状, 引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻 及肠热症等。鼠疫耶尔森菌引起鼠疫及肠热症等。鼠疫耶尔森菌引起鼠疫 条件致病菌:是医院感染的主要病原菌,出现条件致病菌:是医院感染的主要病原菌,出现 移位感染移位感染 (呼吸道、
9、泌尿道、伤口、中枢神经(呼吸道、泌尿道、伤口、中枢神经 系统)系统) 微生物学检验微生物学检验 标本采集标本采集 肠道标本:新鲜粪便肠道标本:新鲜粪便 肠外标本:根据感染部位不同采集不同肠外标本:根据感染部位不同采集不同 标本标本 检验程序检验程序 粪粪 便、肛拭便、肛拭 肠道选择培养基肠道选择培养基 可疑菌落可疑菌落 生化反应生化反应血清学实验血清学实验 结果报告结果报告 药敏试验药敏试验 肠外标本肠外标本 血平板、弱选择平板血平板、弱选择平板 肠道杆菌的生化反应鉴定肠道杆菌的生化反应鉴定 定科试验定科试验 与其他科细菌鉴别:与其他科细菌鉴别: 鉴定试验鉴定试验肠杆菌科肠杆菌科非发酵菌非发酵
10、菌弧菌科弧菌科 氧化酶氧化酶 葡萄糖氧化葡萄糖氧化/ 发酵(发酵(O/F) FOF 鞭毛鞭毛周鞭毛周鞭毛单、丛、周单、丛、周单、丛单、丛 l初步分群初步分群 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸盐()葡萄酸盐() 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸盐()葡萄酸盐() 苯丙氨酸()苯丙氨酸() 葡萄酸盐()葡萄酸盐() 埃希菌属埃希菌属变形杆菌属变形杆菌属克雷伯菌属克雷伯菌属 沙门菌属沙门菌属普罗威登斯菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属肠杆菌属 志贺菌属志贺菌属摩根菌属摩根菌属沙雷菌属沙雷菌属 枸橼酸菌属枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属哈夫尼亚菌属 爱德华菌属爱德华菌属 耶尔森菌属耶尔森菌属 肠道杆菌属间鉴定肠道杆菌属间鉴定 菌属菌属 KIAMIU 斜面斜面底层底层气体气体 H2S动动 力力 吲吲 哚哚 脲脲 酶酶 埃希菌属埃希菌属A/KA/-+/-+- 志贺菌属志贺菌属KA-+/- 沙门菌属沙门菌属KA+D/+- 变形杆菌属变形杆菌属KA+/+-/+ 克雷伯菌属克雷伯菌属AA+-d+ 微量生化反应系统鉴定微量生化反应系统
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