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1、志贺氏菌检验方法志贺氏菌简介志贺氏菌简介 志贺氏菌检验志贺氏菌检验 12生物学性状 志贺氏菌为革兰氏阴性杆菌,菌体短小,长约2-3 m ,宽0.5-0.7 m。不形成芽胞,无荚膜,无鞭毛,有菌毛 。为兼性厌氧菌,在有氧和无氧条件下均能生长;最适生长温度为 36,最适ph为7.27.4;36培养18-24小时后菌落呈圆形、微凸、光滑湿润、无色、半透明、边缘整齐,直径约2mm,宋内氏菌菌落一般较大,较不透明,并常出现扁平的粗糙型菌落。在液体培养基中呈均匀浑浊生长,无菌膜形成。 致病因素 志贺氏菌的致病因素包括侵袭力、内毒素,外毒素。志贺氏菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细胞表面,继而在侵袭
2、蛋白作用下穿入上皮细胞内,一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。志贺氏菌a群型及部分ii型菌株还可产生外毒素,称志贺氏毒素。 志贺氏菌属(shigella)是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌。细菌性痢疾是最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。 可经由食物,水,日常接触,苍蝇等传播。抵抗力抵抗力 志贺氏菌属在外界环境中的生存力,对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱,对酸敏感 。 一般在潮湿土壤中能存活34天,37水中存活20天,在粪便内(室温)存活11天。日光直接照射30分钟,56-6010分即被杀死,对高温和化学消毒剂很敏感,1%石炭酸中15-30分钟即被杀死,对氯霉素
3、、磺胺类、链霉素敏感,但易产生耐药性。志贺氏菌检验流程图36 ,6 h8 h41.5 , 16 h20 h厌氧培养xld琼脂mac琼脂或志贺氏菌显色培养基36 ,20 h48 h挑取可疑菌落tsi,葡萄糖半固体, 营养琼脂斜面血清学分型生化鉴定志贺氏菌属分群及分型结果报告 检样 25 g(或25 ml)样品+ 志贺氏菌增菌肉汤225 ml 检样25 g(或25 ml)样品+gn增菌液225 mlxld琼脂平板志贺氏菌志贺氏菌沙门氏菌沙门氏菌菌落呈粉红色,带或不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黄色菌落,带或不带黑色中心。 粉红色至无色,半透明、光滑
4、、湿润、圆形、边缘整齐或不齐,直径1 mm2 mm。 麦康凯琼脂平板麦康凯琼脂平板无色至浅粉红色,半透明、光滑、湿润、圆形、边缘整齐或不齐,直径2 mm3 mm。 培养物中出现下述情况之一者即可弃去: a)在三糖铁琼脂斜面上呈蔓延生长; b)发酵乳糖或蔗糖的; c)不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的; d)产气的(福氏志贺氏菌6型可产生少量气体); e)产生硫化氢的; f)有动力的培养物 2志贺氏菌 3沙门氏菌 4大肠杆菌 血清学分型血清学分型 凡疑为志贺氏菌,挑取营养琼脂斜面上的培养物,做玻片凝集试验。 先用4种志贺氏菌多价血清检查,如果由于k抗原的存在而不出现凝集,应将菌液煮沸后再检查; 如果呈现凝集,则用a1、a2、b群多价和d群血清分别试验。如系b群福氏志贺氏菌,则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见附表。可先用群因子血清检查,再根据群因子血清出现凝集的结果,依次选用型因子血清检查。 4种志贺氏菌多价血清不凝集的菌株,可用鲍氏多价1、2、3分别检查,并进一步用115各型因子血清检查。如果鲍氏多价血清不凝集,可用痢疾志贺氏菌312型多价血清及各型因子血清检查。进一
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