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文档简介
1、培养基母液的配制激素母液由于多数生长调节物质难溶于水,因此配法各不相同,激素母液可以在24 冰箱中保存。在配制药品前,应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒,用纯净水冲洗干净方可使用:1、 IAA 、 IBA 、 GA3 、 ZT 可先用少量95%酒精溶解,再加水定容,摇匀后贮于试剂瓶中,贴上标签。2、 2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解,再加水定容。3、 6-BA 可用少量 1mol/LHCl 溶解后,再加水定容。4、 NAA 可溶于热水或少量95%酒精中,再加水定容至一定体积。5、 1mg/ml 的 2.4-D 的配制:称取0.1g2,4-D, 用少量1mol/LNaOH溶解,然后定
2、容到100ml 容量瓶中。6、 1mg/ml 的 6BA 的配制:称取0.1g6-BA , 用少量1mol/LNaOH溶解,然后定容到100ml 容量瓶中。7、 1mg/ml 的 NAA 的配制:称取0.1gNAA ,用少量95%酒精助溶,然后定容到 100ml 容量瓶中。8、 1mol/L 的 HCl 的配制: 量取 83.3ml 盐酸加水稀释定容至 1L。(一般、 组培室用量少, 配制 500ml 即可, 即: 称取盐酸 41.65ml稀释定容至500ml 。配制盐酸时。需要带口罩、戴手套。)9、10%的NaOH的配制:称取10gNaOH,加少量纯净水溶解,然后定容到100ml 容量瓶中。
3、10、 HgCl 2 的配制:称量1g 的 HgCl 2,加热水后进行溶解定容至 1L 。二、培养基配制配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。因此,配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。为了降低配错培养基的风险,最好准备一张纸,详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。每配完一种成分或配完一种母液,划掉相应的记录。1、一般而言,分化配方的配制:除萱草琼脂为 5.5g/L 外,其它植物为琼脂5g/L 。白糖为30g/L 。母液粉为4.74g/L 。用自己配制的母液配培养基时,大量母液( 1 号) 50ml/L ,微量( 25 号为 5 ml/L ) 。2、配制?的生根培养基,是大量母液( 1 号)减半为 25ml/L ,微量不变 ( 25 号为 5 ml/L ) 。 生根配方中, 萱草、 红掌白糖为 25g/L , 其他不变。配制培养基步骤:1、称量母液粉一加入少量水溶解一放入琼脂、糖溶解一水开后关火一混合均匀定容7加生长调节物质(激素)一调pH值一选用干净瓶子分装培养基(每瓶约30ml)一培养基凝固一培养基封口-培养基高压灭菌-冷却一备用2、加入一定量的纯净水一放入琼脂、糖溶解一水开后关火一加 大量元素及微量元素一加激
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