实验四水果抗氧化活性的研究

1、实验四水果抗氧化活性的研究一、实验目的：通过用分光光度法测定常见水果所含有的抗氧化性物质的量并作比较，寻找当小较有助 于抗衰老的水果种类，为大众通过食用水果抗衰老捉供参考。二、实验原理：（1）kmno4具有强氧化性，能与还原性（即抗氧化性）物质反应，而各种水果汁中含 有不等量的抗氧化物质，能与kmnch反应。通过测出kmno4与各种0. 10讥水果汁反应后吸 光度a1,然后测0. 40ml kmno4标准溶液稀解至50ml,后的吸光度a3,示者的吸光度减去 前者的吸光度，并将计算得出的吸光度代入线性方程y二q+bx （y为吸光度，x为kmno4的 质量），求出kmno4质量的变化值，即得出每0

2、. 10ml水果汁液消耗的kmno4的屋ml,消 耗kmno4越多，则代表该水果中所含的抗氧化性物质越多。三、实验试剂：去离子水、kmno4 （ar）、na2c204 （ar）、h2so4（3 mol/l） > 纱布。电炉、烧杯（250ml、looml）、台式离心机、电子分析天平、722型分光光度计（比色 皿）、移液管（1汕）、容量瓶（50ml）、锥形瓶（250皿）、量筒（50ml） >洗耳球，滤纸、 温度计、棕色酸式滴定管（25ml）、电炉、试镜纸。四、实验步骤：1、0. 01mol/l km11o4标准溶液的配制及标定将0. 79g kmno4置于大烧杯（500n）l）中,加蒸

3、僻水至500ml,煮沸约1小时,静置冷 却后用漏斗过滤，滤液装入棕色细口瓶中，贴上标签，一周后标定，保存备用。准确称取 0. 0550. 075 g基准物质草酸钠3份，分别置于250ml的锥形瓶屮，加约30ml水和3mol/l h2so4 10ml,水浴慢慢加热到7080c （锥形瓶口出现水珠,逐份加热），趁热用kmno4 溶液滴定。根据草酸钠的质量和消耗kmno4溶液的体积计算kmno4浓度，并用同样方法 滴定其他2份草酸溶液。2mno 4+5c2042*+16h+=2mn2+10c02+8h202、kmno4溶液最大吸收波长的确定将已知浓度的kmno4溶液放进722型分光光度计中，以蒸馆水

4、作参比，从波氏为400nm 到610nm,测定kmno4溶液的吸光度，収最大吸收波长。（取适当浓度，0. 3或0. 4稀释 于50汕的容量瓶中）3、kmno4溶液标准曲线测定取8个容量瓶并标号18,向50ml容量瓶依次准确加入0、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、 0.5. 0.6mlkmno4标准溶液，然后用蒸懈水定容后摇匀，静置。以蒸懈水为参比，以kmno4 溶液最大吸收波长测定各浓度kmno4的吸光度，作出kmno4标准溶液的标准曲线，找出线 性回归方程。4、水果样品抗氧化性测定将所有水果样品用自来水、蒸镉水反复冲洗干净示，用水果刀切碎，再用纱布包好挤出 果汁约20ml,并用40

5、00 rpm离心机离心5 min后取上清液，备用。用移液管取0.20ml水 果汁液和0.80ml kmno4标准溶液j： 100ml容量瓶中，用蒸馆水定容，静置30mino用移液 管取0. 10ml水果汁液于50ml容量瓶屮，并用蒸懈水定容，测定其吸光度，消除水果液汁 的背景干扰。然后用蒸谓水做参比，用722型分光光度计测定水果汁液样品屮反应后kmno4的吸光度ai,平均测三次。最后，用0. 4ml km11o4标准溶液稀释至50ml的吸光度a3减去 水果汁液样品中反应后kmno«的吸光度ai以及背景值，得出的吸光度用线性方程算出水 果样品消耗的kmno4量mi。五、实验结果：1、k

6、mno4标准溶液的标定2,sr*1000y mna2c2o4mv1y1 na 2c2o4 v kmno 4样品号123m (na2c2o4) (g)kmno4终读数（ml）km11o4初读数（ml）vkmno4(ml)ckmn()4(mol/l)ckmno4(mol/l)平均值绝对偏差相对平均偏差（%）2、kmno4溶液的最大吸收波长波长nm400410420430440450460470480吸光度a波知m490500510520522524526528530吸光度a波长nm532540550560570580590600610吸光度ad.3d-.d.25-以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制

7、曲线:吸 光 度>d.2d-0.15-d.1d-d.k-d.d0 i_|i_|_i|_i_|_i|_i_|i_|_i_|i|_i(-4dd cd 4« m 4b050052d54d505s0 cd0波长nm图1 kmno4溶液的吸收曲线kmno4溶液的最大吸收波长为nm。3、绘制kmno4的标准曲线项目1234l5678加入kmno4的量(ml)00. 100. 200. 400. 600. 801. 001.20吸光度扣除空口值kmno4 (mg)以吸光度为纵坐标，kmno4的质量为横坐标绘制曲线:d 5d.3吸光度a高毎酸f叩质量mg图2 kmnoq溶液的标准曲线求出的线性回归方程为yw+bx二4、水果抗氧化性水果的抗氧化性编项号123与kmno4反应后aia】平均值水果液汁的背景值0. 80mlkmno4标准溶液稀释至100ml后的吸光度a3a3ai-背景值消耗的 m. (kmno4)/mg注意事项1、标定kmno4溶液时，反应要在酸性、较高温度（7080°c）和冇mn"做催化剂的 条件下进行。开始滴定速度慢，一定要等前一滴kmncu的红色完全褪去再滴入下一滴。若 滴定速度过快，部分kmno4将來不及与na2c2o4反应而在热的酸性溶液屮分解。2、标定kmno4溶液温度不能a高，若超过9o°c,易引起h2c2o4分