牛肉膏蛋白胨培养基配方

1、牛肉膏蛋白陈培养基配方：牛肉膏蛋白陈培养基是一种应用最广泛和最普通细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。 它含有牛肉膏、蛋白陈和NaCI。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白陈主 要提供氮源，而NaCI提供无机盐。在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼 脂在常用浓度下96c时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以 免琼脂烧焦。琼脂在40C时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂含量根据 琼脂质量和气温不同而有所不同。由于这种培养基多用于梯掰晒(荤食),因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微 碱性,以利于细菌生长繁殖。牛肉膏蛋白陈培养基配方如下：

2、牛肉膏 3g、蛋白陈 10g、NaCI 5g、琼脂 1520g水 1000mk pH 7. 47. 6 (7.0 8.0)三、器材牛肉膏，蛋白陈,NaCI,琼脂；1mol/L NaOH, 1mol/L HCI：试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅， pH试纸(pH 5. 59. 0),棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。四、操作步骤1 .称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白陈、NaCI放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑 取，放在小烧杯或表而皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上，称量后直接 放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会及称量纸分

3、离，然后立即取出纸片。蛋白陈很易吸 潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称 取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。2 .溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待 药品完全溶解后，补充水分到所需总体积。如果配制固体培养基，将称好琼脂放入已溶化药 品中，再加热溶化，在琼脂溶化过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足 所失水分。3 .调 pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基 中逐滴加入1mol/LNaOH,边加边搅拌，并随时用pH试纸测

4、其pH值，直至pH达7. 6。 反之，则用1mol/LHCI进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响 培养基内各离子浓度。对于有些要求pH值较精确微生物，其pH调节可用酸度计进行(使用方法，可参考有关说 明书)。4 .过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果观察。一般无特殊要求情况下，这一步可以省去(本 实验无需过滤)。5 .分装按实验要求，可将配制培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图V-1。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。(1)液体分装分装高度以试管高度1/4左右为宜。(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高1/5,火菌后制成斜而，

5、如图V-20分装三角烧瓶 量以不超过三角烧瓶容积一半为宜。(3)半固体分装试管一般以试管高度1/3为宜，灭菌后垂直待凝。6 .加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而 造成污染，并保证有良好通气性能(棉塞制作方法附本实验后而)。7 .包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉 塞，其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明华本麻名旗组别、日期。三角烧瓶加塞后，外 包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、 日期。8 .灭菌将上述培养基以1. 05kg/cm2 (15磅/英寸2)

6、 , 121. 3, 20分钟高压蒸汽灭菌。如因 特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。9 .搁置斜面将灭菌试管培养基冷至50c左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置斜而长度以不超过试管 总长一半为宜。10 .无菌检查将灭菌培养基放入37温室中培养2448小时，以检查灭菌是否彻底。PDA培养基配方：特点及用途PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基简称,Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂英文。一种常用培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌(素食)。酵母菌PH(3.86.0), 露菌(4.05.8)等。按物理性状划分：固体培养基，按培养基成

7、分划分：半合成培养基配方马铃薯200克面萄糖20克琼脂1520克自来水1000亳升自然PH配制步骤其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水煮烂(煮沸2030分钟，能被 玻璃棒戳破即可)，用四层纱布过滤，再据实际实验需要加前萄糖和琼脂，继续加热 搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000亳升，分装试管，如塞、包扎，(12KC)火 菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。其他事项1 .培养基经灭菌后，必须放在37c温箱培养24h,无菌生长者方可使用。2 .PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节.pH培养基，一般用pH试纸测定其pH。 如果培养基偏酸或偏碱时，可用Imol / LNa

8、OH或Imol / LHCL溶液进行调直。调行 时应逐滴加入NaOH或HC1溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。3 .培养基在使用时也可以做成不含琼脂液体培养基，用于菌类震荡培养。4 .培养基也可以加入氯磁素或上霉素，加入量为O.lg/L培养基，主要是为了抑制细菌 生长，减少干扰性高氏1号培养及配方：培养放线菌用，改良高氏可溶性淀粉 2g , KNO3 0. 1g , K2HP04 0. 05g , MgSO4- 7H20 0. 05g , NaCl 0. 05g , FeS04 7H20 0.001g (母液)，琼脂 2g ,自来水 100mL , pH 7.2-7.4 ,灭菌 1.05kg/cm2> 20min配制时，先用少量冷水，将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量沸水中，在火上加热， 边搅拌边依次逐一溶化其他成分，溶化后，补足水分到100ml,调pH,121灭菌20mino 高温灭菌后，倒平皿前加入10$酚2滴至100ml培养基中混匀，将培养基倒入平皿内 约15ml/皿。高氏1号：可溶性淀粉(20g) , KNO3(lg) , K2HP04 (0. 5g) , MgSO4- 7H20 (0.