浅谈凯氏定氮仪的使用经验和保养方法

1、浅谈凯氏定氮仪的使用经验和保养方法济南海能仪器有限公司浅谈凯氏定氮仪的使川经验和保养方法摘要：叙述了凯氏定氮仪在使川过程屮的几点注意事项，浅谈凯氏定氮仪的维护与保 养。关键词：凯氏定氮仪；使用经验；保养方法全自动凯氏定氮仪作为测定蛋白质的首选仪器，广泛应用于乳与乳制品中蛋白质的含量 的测定。全自动凯氏定氮仪具有高灵敏度，分析速度快，应用范围广，所需试样少，设备 和操作比较简单等特点它是li前使用最广泛测定乳与乳制品屮蛋门质的仪器。全白动凯氏定氮仪的简单分析装置流程由四个基本部分组成：（1）蒸憾装置；（2）滴定 装置；（3）检测装置；（4）排废装置。下面就木人在丁作屮的心得，分别谈谈对这四部分的

2、维护 与保养的认识。特别提示：反复认真地阅读仪器使川说明书，做到对仪器的主耍部件如蒸谓装置、滴定 装置、检测装置和排废装置的功能、特点及其和互关联匹配情况，熟悉、理解，融会贯 通。严格按照说明书和仪器操作规程的耍求，进行规范操作，这是正确使用和科学保养仪 器的前提。1使用经验1.1开机之前，保证各个溶液能够满足此次试验测定，检查去离子水，碱液和接收液的 使用情况，以及废液桶中废液得到了及时的清理。如果在去离子水，碱液和接收液的液位 低于液位传感器的话，或废液的液位高于液位传感器的话，仪器将报警，正在进行的试验 将被停止，影响测定工作的正常进行。1.2开机z前，保证冷却水的开关是打开了。如果冷却

3、水开关关闭，仪器虽然能自检通 过，但是在蒸憾过程中，由于蒸憾装置的温度太高，仪器将报警，提示打开冷却水开关。 打开冷却水开关后，仪器将继续工作。但此次试验被停止，影响止常测定的同时，在没有 冷却水保护的情况下，对蒸饰装置具有损伤。1. 3等1. 1和1. 2确认无误后开机，仪器自检，自检通过后，仪器进入等待选择程序阶 段。首先进入手动模式对滴定器中的气泡进行排除。气泡的存在会影响测定结呆，因为气 泡进入后，会占据标准滴定酸的体积，使标准滴定酸的体积减小，测定结果偏低。排除气泡的方法是；首先打开仪器前盖，仪器报警，提示仪器前盖被打开，找一块小磁 铁放在仪器前面的触点上，按血板上冋车键，此时仪器默

4、认前盖关闭。将仪器功能选择滴 定器充液，滴定器活塞向上移动停止后，用收捏住滴疋器的塑料软管，选择滴泄常排空， 滴定器活塞向下移动，等移动35秒后立刻松手，滴定器屮气泡将上浮至滴定器上端，选 择滴定器充液，气泡被排除滴定器，反复23次，将气泡排净后开始测定。14空白的测定在空门测定时，首先测定水空门，水空门的测定是为了检杳仪器的稳定程度。当前后两 次空白测定值小于0.05且水空白值小于0.2时，仪器稳定。测定试剂空白，并将空白值 输入仪器。如果不先测定水空白而直接测试剂空白，即在仪器不稳定的情况下就进行试剂 空白的测定，将会得到偏高的试剂空白值，测总结果将偏低。1.5样品测定1. 5. 1称样牛

5、乳样晶需要混合均匀后取样，因为牛乳样站容易脂肪上浮，不事先混合而直接从上层 取济南海能仪器有限公司jinan hanon instruments co., ltd.地址：济南市高新区犬辰大街677号tianchen avenue no. 677, high-tech zone, jinan, china电话：86-531-88874444 tel: 86-531-88874444 传真：86531-88874445fax: 86-531 -88874445 邮箱：saleshanon.ee email: saleshanon.eeanonhanon instruments济南海能仪器有限公司样

6、的话，测定结果将偏低。乳粉样品混合均匀后用称量纸称 量，并川铁子送如消化管底部。因操作不当残留在管壁上的样品，在加入硫酸的时候川硫 酸冲入消化管底部。如果残留在管壁上而不用硫酸冲入的话，将会使测能结果偏低。1.5.2消化在加酸的过程中，要考虑到样品的组成对消耗酸量的影响。酸量小，样品消化不完全， 测定结果偏低；酸量大，在上机过程屮与碱屮后酸过量，游离胺不能被蒸憾出來，严重影 响测定结果。所以，要严格控制硫酸的用量，表1列出了乳与乳制品中各个组分对酸的消 耗量。表1乳与乳制品中各个组分对酸的消耗量样甜的成分消耗的酸量（ml硫酸/g）脂肪9. 7蛋白质4. 9糖类4.0从表1中吋以看出高脂肪含量的

7、样品消耗的酸量将多于高蛋口质和碳水化合物样品消耗 的酸量。农2列出了各类乳制品中消耗酸的情况，对效果过程加酸量有指导意义。表2各类样品的组成及消耗酸量样品名称样品质量(g)脂肪含量(g/100g)蛋白质含量(g/100g)糖类含量(g/100g)消耗酸量(ml)纯牛奶调味奶原味酸奶加糖酸奶全脂乳粉乳清粉以上简单-的计算也适用于不同纟i成的其他样站。所得的结果也可以用来修正其他方而的 应用。在消化过程中蒸发损失约1.2 ml,催化剂反应消耗约2.1 ml,样品消耗，消化管内残 留，需要的碱量50 mlo在消化过程中，先220°c预消化1小时，然后将温度升高到420°co预消化

8、的fl的是让样品和硫酸先缓慢的反应。不预消化，浓硫酸将和样品在高温下剧烈反应，造成炭化，测定结果将偏低，炭化造成的颗粒还会在排废过程中堵塞管路，造成仪器不能正常丁作。 1.6回收率的测定采用硫酸钱和尿素分别对冋收率进行测定。单纯的采用硫酸钱，简单快速，不要要消 化，但只能保证仪器测定的部分，而不能对前处理的消化过程迹行质量体系保证。尿索需 要消化进济南海能仪器有限公司jinan hanon instruments co., ltd.地址：济南市高新区天辰大街677号tianchen avenue no. 677, high-tech zone, jinan, china电话：86-531-88

9、874444 tel: 86-531-88874444 传真：86531-88874445fax: 86-531 -88874445 邮箱：saleshanon.ee email: saleshanon.eeanonhanon instruments济南海能仪器冇限公司anonhanon instruments行测定，对前处理和仪器测宦部分全程进行质量保证。表3和表4分别列出了硫酸鞍和 尿素的回收率测定结果。表3硫酸钱冋收率测左结呆序号质量m(g)盐酸滴定量v (ml)氮实测值n1 (mg)氮理论值n2 (mg)冋收率(%)1 0. 1444 21.6855 30. 5419 30. 5831

10、 99. 87% 2 0. 1465 22. 0579 31.0663 31.0278100. 12% 3 0. 1489 22. 3872 31. 5301 31. 5361 99.98% 4 0. 1976 29. 7176 41. 854341.8505 100.01% 5 0. 1917 28. 8199 40. 5899 40. 6009 99. 97% 6 0. 1930 29. 086440. 9653 40. 8762 100. 22%其平均回收率为100. 03%,标准偏差为0.011,相对标准偏差 rsd 为 0. ll%o表3尿素四收率测定结果序号质量m(g)盐酸滴定量v

11、 (讥)氮实测值n1 (mg)氮理论值n2 (mg)回收率(%)1 0.0536 17.6984 24. 9264 24.9883 99.75%2 0.0612 20.1842 28. 4274 28.5315 99. 64%3 0.057 18. 9469 26.6848 26.5734 100.42%4 0.0523 17.2913 24. 3531 24.3823 99.88%5 0. 0585 19.3074 27. 1925 27.2727 99.71%6 0. 0604 20. 0183 28. 1938 28. 1585 100. 13% 其平均回收率为 99. 92%,标准偏差

12、为 0.0027,相对标准偏差rsd为0.27%。2保养方法2. 1蒸谓装置2. 1. 1清洗当样甜测定完毕后，采用手动功能加入80毫升水，开蒸汽蒸饰5分钟，对蒸饰装置进 行清洗。清洗后取下消化管，倒掉内容物，对安全门和滴流盘进行擦拭，去除测定过程屮 残留的碱液。2. 1.2橡皮头的更换在蒸憾过程屮，热的碱液对蒸憾装置的橡皮头有腐蚀作用，长时间使用后，会造成橡皮 头和消化管接触不密闭，导致游离胺泄露，影响测定结果。定期（一般以约为周期）对橡 皮头进行检查，发现腐蚀严重，立即更换。更换方法如下：关闭仪器电源开关，打开仪器前盖，取下安全门，用钳了夹住橡皮头一 端，川力向下拉扯即可。安装新的橡皮头时

13、，先川热水浸泡5分钟，热水使橡皮头变软， 易于安装。济南海能仪器有限公司jinan ilanon instruments co. , ltd.地址：济南市高新区天辰大街677号tianchen avenue no. 677, high-tech zone, jinan, china电话：86-531-88874444 tel: 86-531-88874444 传真：86531-88874445fax: 86- 531-88874445 邮箱：saleshanon. cc email: saleshanon. cc 济南海能仪器冇限公司anonhanon instruments2. 2滴定装置2

14、. 2. 1清洗检测完毕后，清洗滴定缸及液位探针，防止接收液的残留附着在滴定缸的内表面，影响 下次测定。2. 2. 2标准酸酸溶液的更换当采用浓度不同的标准酸溶液时，应当将仪器滴定器中残留的酸液清除掉。排除酸液的方法；首先打开仪器前盖，仪器报警，提示仪器前盖被打开，找一块小磁铁 放在仪器前面的触点上，按面板上回车键，此时仪器默认前盖关闭。将仪器功能选择滴定 器充液，滴定器活塞向上移动停止后；再选择滴定器排空，滴定器活塞向下移动，反复3、5次，旧酸液将被新酸液置换岀来。2. 3排废装置2. 3. 1清洗定期（一般以约为周期）对排废装置进行清洗，长时间不清洗，会堵塞管路。量取25ml 醋酸溶液和5

15、ml水，采用手动蒸憎半小吋，挥发的醋酸将清除排废装置内壁上残留的碱 液。2. 3. 2维修当排废装置堵塞后，一般为废液征下方的电磁阀内被炭化的颗粒堵塞。关闭仪器电源开 关，打开仪器后盖，取下电磁阀，拆开后清除内部废渣后并安装。2. 4注意事项在每次更换完标准滴处酸或接收液后，以及对仪器进行维修后，都要対仪器进行回收率 的测定。一般采用硫酸镀进行回收率分析，保证回收率在99.5%100.5%的范围z内，说明 仪器正常，可以进行样品测定。3结语为了使凯氏定氮仪保持良好的灵敏度和稳左性，能高效，快速的分析样品，得到准确的 分析结果，平时使用时，应注意保持仪器各个部件的止常，开机前仔细检查一下，确认无 误后开机测定。参考文献：1中华人民共和国国家标准gb/t5413. 1-1997婴幼儿配方食品和乳粉蛋白质的测定， 242陈玲霞.测能食品中蛋白质含量时氢氧化钠的用量控制j铁道劳动安全卫生与环 保，2005.32 (6) :2932943陈辉，刘振林，张忠义凯氏定氮法测定牛奶屮蛋白质的不确定度分析j.中国卫生 检验杂志,2004. 14 (3) : 3733744雷彩霞.凯氏定氮法测左粗蛋白应注意的几个问题j.西部粮油科技，2003. 10 (1) 62645于雯，吕玉琼全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质j.中国卫生检验杂志，200