毕业论文开题报告书

1、楚雄师范学院本科毕业论文（设计）开题报告书题 目 滇中玛咖中总多酚的提取 姓 名 学 号 系（院） 化学与生命科学院 专 业 生物技术 指导教师 论文（设计）题目玛咖中总多酚的提取 植物多酚是多羟基酚类化合物的总称，广泛存在于蔬菜、水果、豆类、谷物类、茶等1植物中。多酚的独特结构赋予它独特的化学性质，使其具有抗氧化、抗衰老、抗癌、抗肿瘤、抗突变、降血压、降血脂、抑菌消炎、抗病毒作用等1多种生理功能，在食品、医药、化妆品、日用化学品以及保健品等12方面起到了一定的利用价值。近年来已经开发的植物多酚有：苹果多酚、茶多酚、葡多酚、柑橘多酚、石榴多酚等。随着绿色、健康话题越来越时尚，植物多酚已成为国内

2、外天然产物开发利用研究的热点。目前，植物多酚的提取方法主要有：溶剂法、沉淀法、生物酶提取、超临界流体萃取、超声波辅助提取、微波辅助提取等，溶剂萃取法在目前国内使用最为广泛，可分为水溶剂提取和有机溶剂两种，本论文采用醇提取法（SE)。溶剂法提取的优点是操作简单，实验仪器要求较低，药品成本较低。课题的主要内容：1.原料处理2.玛咖中总多酚的提取3玛咖提取液中总多酚的定性分析4.玛咖提取液中多酚总含量测定5.玛咖提取总多酚单因素实验6玛咖提取总多酚的正交实验7.最佳工艺提取玛咖中总多酚8.结果分析与讨论9.结论1.1实验准备1.1.1原料、仪器和试剂 1.1.1.1原料玛咖干果 (来自楚雄) 1.1

3、.1.2试剂没食子酸标准品、乙醇、石油醚、乙酸乙酯、盐酸、氯化钠、碳酸钠等均为分析纯（），明胶、三氯化铁、福林酚试剂（），实验室自制蒸馏水等。 1.1.1.3仪器紫外可见分光光度计；摇摆式植物粉碎机，型离心机；恒温水浴锅；电子天平；循环水式多用真空泵。 1.1.2试剂配制1. 1.2.1 乙醇溶液配制 分别用量筒量取40、50、60、80ml无水乙醇至4个100ml的容量瓶中，加水定容，混匀后倒入试剂瓶中待用。 用量筒另取700ml无水乙醇至1000ml容量瓶中，加水定容，混匀后装入试剂瓶中待用。1.2.2 10%Na2CO3溶液的配制 用天平称量100gNa2CO3固体，用蒸馏水溶解，移至1

4、000ml容量 瓶中加蒸馏水定容，混匀后装入试剂瓶中待用。1.2实验步骤 1.2.1原料处理玛咖干果切片烘干粉碎备用。 1.2.玛咖中总多酚的提取准确称取0.5g玛咖样品加入15ml70%乙醇，在50下浸提2h，提取2次，抽滤，滤液离心，收集上层清液，用石油醚脱脂除去色素，再用乙酸乙酯萃取纯化（并在室温振荡静置分层，取其有几层，进行浓缩干燥，得到总多酚纯化物）。纯化物加3ml无水乙醇溶解再加蒸馏水容至50ml,吸取1ml定容到50ml。 1.2.3玛咖提取液中总多酚的定性分析7-8铁离子反应：分别取标准品溶液及提取液1.0mL于试管中，各加入几滴0.1mol/LFeCl3溶液，振荡。氯化钠明胶

5、反应：分别标准品溶液及取提取液1.0mL于试管中，各加入几滴氯化钠明胶溶液，振荡。 1.2.4玛咖提取液中多酚总含量测定1.2.4.1 没食子酸标准溶液的配制用电子分析天平准确称取0.0109g没食子酸溶于蒸馏水中，定容至500ml作为母液。 1.2.4.2测定方法根据根据在含多酚的溶液中加入福林酚试剂及碳酸钠溶液条件下使多酚与福林酚试剂反应，在紫外可见光区获得稳定的特征吸收峰，来说明提取液中含有多酚。 1.2.4.3测定波长的选择分别准确吸取1.00mL的没食子酸标准液、滇橄榄寄生的总多酚提取液于25mL比色管中，加10%福林酚试剂5.00mL，混匀，放置5min；加10%碳酸钠溶液5.00

6、mL，加蒸馏水定容至25mL刻度线，混匀，放置2h，以蒸馏水为参比，在650800nm之间测定络合物吸光度，确定最大吸收峰波长（此后的吸光度均在此最大波长下测定）。 1.2.4.4标准曲线的绘制分别用吸液管吸取0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00ml母液于25ml比色管中，先加入5ml10%福林酚试剂，混匀5min内（10min内），加入5ml10% Na2CO3溶液，避光反应2h,用1cm比色皿，在最大处测吸光度(A)，以吸光度为纵坐标，没食子酸标准液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得出回归方程。 1.2.4.5玛咖提取液中多酚总含量的测定准确吸取提取液1.00m

7、L，置于25mL比色管中，按1.3.4.4操作方法在最大吸收波长760nm处测定出提取液的吸光度，根据回归方程，求出玛咖提取液中的多酚得率。1.2.5玛咖提取总多酚单因素实验 1.2.5.1浸提温度对总多酚提得率的影响精确称取0.5g干燥玛咖粉末5份，分别加入15ml70%乙醇，分别在40、50、60、70、80下浸提2h，提取2次，分别抽滤，滤液离心，收集上层清液，用石油醚脱脂除去色素，再用乙酸乙酯萃取纯化（并在室温振荡静置分层，取其有几层，进行浓缩干燥，得到总多酚纯化物）。纯化物加3ml无水乙醇溶解再加蒸馏水定容至50ml,吸取1ml定容到50ml。按1.2.4.5操作方法测定出提取液的吸

8、光度，根据回归方程，计算多酚得率。 1.2.5.2提取剂浓度对玛咖总多酚提得率的影响精确称取0.5g干燥玛咖粉末5份，分别加入15ml40%、50%、60%、70%、80%乙醇，分别在50下浸提2h，提取2次，抽滤，滤液离心，收集上层清液，用石油醚脱脂除去色素，再用乙酸乙酯萃取纯化（并在室温振荡静置分层，取其有几层，进行浓缩干燥，得到总多酚纯化物）。纯化物加3ml无水乙醇溶解再加蒸馏水定容至50ml,吸取1ml定容到50ml。按1.2.4.5操作方法测定出提取液的吸光度，根据回归方程，计算多酚得率。1.2.5.3浸提时间对总多酚提得率的影响精确称取0.5g干燥玛咖粉末5份，分别加入15ml70

9、%乙醇，分别在50下浸提1、2、3、4h，提取2次，抽滤，滤液离心，收集上层清液，用石油醚脱脂除去色素，再用乙酸乙酯萃取纯化（并在室温振荡静置分层，取其有几层，进行浓缩干燥，得到总多酚纯化物）。纯化物加3ml无水乙醇溶解再加蒸馏水定容至50ml,吸取1ml定容到50ml。按1.2.4.5操作方法测定出提取液的吸光度，根据回归方程，计算多酚得率。1.2.6玛咖提取总多酚的正交实验在单因素基础上，设计正交实验。表1-1 玛咖正交实验因素及水平水平因素A浸提温度/B浸提时间/hC乙醇浓度/%123A1A2A3B1B2B3C1C2C31.2.7最佳工艺提取玛咖中总多酚1.2.7.1最佳工艺提取玛咖中总

10、多酚在1.2.6选出的最佳条件下提取玛咖中的总多酚，平行实验三次，按1.2.4.3操作方法测定出提取液的吸光度，根据回归方程，计算多酚得率。1.2.8 结果分析与讨论1.2.9 结论完成期限和采取的主要措施：第一阶段（2015年5月21日）:与相关文献资料的查找、收集和整理；烘烤材料，开题报告第二阶段（2015年5月22日5月24日）：实验；第三阶段（2015年5月26日5月26日）：写论文；。1 耿中华.植物多酚的研究进展J.广西轻工业食品与生物，2008，114(05)：1-2.2宋立江，狄莹，石碧.植物多酚研究与利用的意义及发展J.化学进展，2000，12(02)：161-170.3张庆

11、云.茶多酚提取方法的进展J.福建茶叶，2002，12(2):1-2.4陈荣义，张新申，申金山，等.茶多酚、茶氨酸的联合分离提取的研究J.林产化学与工业，2005，25(1):99-101.5陈龙胜，钟世安，周春山，等.树脂吸附法分离高纯茶多酚新工艺研究J.林产化学与工业，2004，24(4):65-67.6王俊，王国基，颜辉，等.槲寄生的化学成分及药理作用研究进展J.2005，16(4)：300-303.7孙艳秋，刘珂，王守愚，等.槲寄生的研究进展J.中草药，2000，31(6)：471-474.8 何志勇，夏文水Folin-Ciocalteu 比色法测定橄榄中多酚的研究J.林产化学与工业，2006，26(04)9施兴凤,李琼,李学辉,等.黄瓜黄酮类化合物的抗氧化作用J.食物研究与开发,2010,31(3).2 张亮亮，陈茄鸿，汪咏梅等.海南蒲桃叶黄酮的提取及抗氧化性研究J。生物质化学工程，2010,44（2）.9施兴凤,李琼,李学辉,等.黄瓜黄酮类化合物的抗氧